| 摘要 | 第4-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 符号说明 | 第16-17页 |
| 第一章 绪论 | 第17-31页 |
| 1.1 引言 | 第17-18页 |
| 1.2 miRNA和lncRNA简介 | 第18-22页 |
| 1.2.1 miRNA-101 | 第18-19页 |
| 1.2.2 miR-217 | 第19-20页 |
| 1.2.3 MALAT1 | 第20页 |
| 1.2.4 miRNA与lncRNA | 第20-21页 |
| 1.2.5 miRNA与食管癌关系 | 第21-22页 |
| 1.3 基因治疗 | 第22-23页 |
| 1.3.1 抑癌基因治疗 | 第22页 |
| 1.3.2 基因沉默治疗 | 第22-23页 |
| 1.3.3 针对肿瘤血管生成相关基因的治疗 | 第23页 |
| 1.4 阳离子聚合物载体 | 第23-27页 |
| 1.4.1 简介 | 第23-24页 |
| 1.4.2 基因载体运转及影响因素 | 第24-25页 |
| 1.4.3 体内外实验中的影响因素 | 第25-27页 |
| 1.4.3.1 毒性影响 | 第25-26页 |
| 1.4.3.2 体外实验中的影响因素 | 第26-27页 |
| 1.4.3.3 体内实验中的影响因素 | 第27页 |
| 1.5 转染 | 第27-28页 |
| 1.6 研究的基础 | 第28-29页 |
| 1.7 立题背景与研究意义 | 第29-31页 |
| 第二章 基因载体在食管癌细胞中的转染研究 | 第31-67页 |
| 2.1 实验细胞、材料和设备 | 第31-35页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第31-33页 |
| 2.1.2 实验所用细胞系 | 第33页 |
| 2.1.3 实验相关溶液配制 | 第33-34页 |
| 2.1.4 实验相关仪器 | 第34-35页 |
| 2.2 实验方法 | 第35-50页 |
| 2.2.1 文献查询 | 第35-36页 |
| 2.2.2 细胞培养相关实验 | 第36-37页 |
| 2.2.2.1 培养基的配置 | 第36页 |
| 2.2.2.2 复苏和冻存 | 第36页 |
| 2.2.2.3 培养 | 第36-37页 |
| 2.2.2.4 传代 | 第37页 |
| 2.2.2.5 细胞计数与铺板实验 | 第37页 |
| 2.2.3 阳离子聚合物基因载体性能研究实验 | 第37-50页 |
| 2.3.3.1 基因载体准备 | 第37-38页 |
| 2.2.3.2 质粒复合物溶液与miRNA复合溶液配置 | 第38-40页 |
| 2.2.3.4 荧光素酶报告基因实验 | 第40页 |
| 2.2.3.5 绿色荧光蛋白实验 | 第40-41页 |
| 2.2.3.6 粒径与表面电荷实验 | 第41页 |
| 2.2.3.7 AFM实验 | 第41页 |
| 2.2.3.8 细胞毒性实验 | 第41-42页 |
| 2.2.3.9 检测miRNA转染效率实验 | 第42-47页 |
| 2.2.3.10 转染miRNA对靶基因MALAT1影响 | 第47-50页 |
| 2.3 实验结果与讨论 | 第50-64页 |
| 2.3.1 荧光素酶实验 | 第50-52页 |
| 2.3.2 绿色荧光蛋白(EGFP)实验 | 第52-53页 |
| 2.3.3 粒径和表面电位测定 | 第53-55页 |
| 2.3.4 AFM原子力显微镜检测 | 第55-56页 |
| 2.3.5 毒性MTT实验 | 第56-58页 |
| 2.3.6 检测miRNA转染效率实验 | 第58-61页 |
| 2.3.7 转染miRNA对靶lncRNA MALAT1影响 | 第61-64页 |
| 2.4 小结 | 第64-67页 |
| 第三章 基因载体在食管癌细胞生物学性能的研究 | 第67-81页 |
| 3.1 实验细胞、材料和设备 | 第67-69页 |
| 3.1.1 实验细胞培养材料 | 第67页 |
| 3.1.2 生物学性能检测试剂 | 第67页 |
| 3.1.3 实验所用细胞系 | 第67页 |
| 3.1.4 实验相关仪器 | 第67-69页 |
| 3.2 实验方法 | 第69-71页 |
| 3.2.1 划痕实验 | 第69页 |
| 3.2.2 计数实验 | 第69页 |
| 3.2.3 单克隆形成实验 | 第69-70页 |
| 3.2.4 侵袭实验 | 第70-71页 |
| 3.3 实验结果与讨论 | 第71-79页 |
| 3.3.1 划痕实验 | 第71-75页 |
| 3.3.2 计数实验 | 第75-76页 |
| 3.3.3 单克隆形成实验 | 第76-78页 |
| 3.3.4 侵袭实验 | 第78-79页 |
| 3.4 小结 | 第79-81页 |
| 第四章 结论和创新点 | 第81-82页 |
| 4.1 结论 | 第81页 |
| 4.2 创新点 | 第81-82页 |
| 参考文献 | 第82-86页 |
| 致谢 | 第86-87页 |
| 研究成果及已发表的论文 | 第87-88页 |
| 作者和导师简介 | 第88-89页 |
| 附件 | 第89-90页 |
