| 摘要 | 第5-9页 |
| Abstract | 第9-12页 |
| 目录 | 第13-16页 |
| 主要縮略词简表 | 第16-17页 |
| 前言 | 第17-20页 |
| 第一章 材料与方法 | 第20-41页 |
| 第一节 材料 | 第20-29页 |
| 1 组织和细胞系样本 | 第20-28页 |
| 1.1 组织标本 | 第20-21页 |
| 1.2 细胞系 | 第21页 |
| 1.3 菌株和质粒载体 | 第21-22页 |
| 1.4 试剂 | 第22-23页 |
| 1.5 抗体 | 第23页 |
| 1.6 分子量标准 | 第23-24页 |
| 1.7 其它试剂 | 第24页 |
| 1.8 细胞培养用试剂及耗材 | 第24页 |
| 1.9 实验室临时自配试剂 | 第24-25页 |
| 1.10 引物 | 第25-28页 |
| 2 主要仪器 | 第28-29页 |
| 第二节 方法 | 第29-41页 |
| 1 RNA的提取 | 第29-30页 |
| 1.1 组织RNA的抽提 | 第29页 |
| 1.2 细胞总RNA的抽提 | 第29页 |
| 1.3 消化RNA中痕量DNA | 第29-30页 |
| 1.4 RNA质量检测 | 第30页 |
| 2 Real-time PCR检测 | 第30-33页 |
| 2.1 Real-time PCR检测miRNA的表达 | 第30-31页 |
| 2.2 实时定量PCR验证mRNA的表达 | 第31-32页 |
| 2.3 Real-time PCR的检测结果分析 | 第32-33页 |
| 3 质粒构建与克隆 | 第33-34页 |
| 3.1 感受态Stab13细胞的制备 | 第33页 |
| 3.2 质粒的构建 | 第33-34页 |
| 3.3 质粒中抽 | 第34页 |
| 4 质粒、miRNA或siRNA瞬时转染目的细胞 | 第34-35页 |
| 5 MTT | 第35页 |
| 6 Transwell侵袭实验 | 第35-36页 |
| 7 细胞克隆形成实验 | 第36页 |
| 8 免疫荧光检测 | 第36页 |
| 9 luciferrase检测miRNA与靶基因的结合 | 第36-38页 |
| 10 Western Blotting分析 | 第38-40页 |
| 10.1 细胞总蛋白的抽提 | 第38-39页 |
| 10.2 BCA法测定样本的蛋白浓度 | 第39页 |
| 10.3 SDA-PAGE电泳和western印迹 | 第39-40页 |
| 11 统计学分析 | 第40-41页 |
| 第二章 结果 | 第41-84页 |
| 第一部分：Rap1B是miR-128、miR-149和miR-181共同作用靶基因 | 第41-54页 |
| 1.1 生物信息学分析 | 第41-43页 |
| 1.2 荧光素酶报告基因载体构建 | 第43-47页 |
| 1.3 miR-128、miR-149和miR-181a/b/c/d与Rap1B基因3'UTR区不同位点荧光素酶报告基因活性检测 | 第47-51页 |
| 1.4 miR-128、miR-149和miR-181a/b/c/d调控胶质瘤细胞内源性Rap1B表达 | 第51-54页 |
| 第二部分：miR-128、miR-149和miR-181及Rap1B在WHO不同分化级别星形胶质细胞瘤中的表达及相关性分析 | 第54-60页 |
| 2.1 WHO不同分化级别星形胶质细胞瘤组织及正常脑组织总RNA的提取 | 第54-56页 |
| 2.2 miR-128、miR-149和miR-181及Rap1B在WHO不同分化级别星形胶质细胞瘤中的表达 | 第56-58页 |
| 2.3 miR-128、miR-149和miR-181与Rap1B在星形胶质细胞瘤组织中表达呈负相关 | 第58-60页 |
| 第三部分：miR-128、miR-149和miR-181通过Rap1B对脑胶质瘤细胞增殖和侵袭的影响 | 第60-69页 |
| 3.1 miR-128、miR-149和miR-181a/b/c/d抑制脑胶质瘤细胞的增殖 | 第60-63页 |
| 3.2 MTT检测miR-128、miR-149和miR-181a/b/c/d抑制脑胶质瘤细胞的增殖 | 第63-64页 |
| 3.3 miR-128、miR-149和miR-181a/b/c/d抑制胶质瘤细胞的侵袭能力 | 第64-66页 |
| 3.4 干扰Rab1B对脑胶质瘤增殖和侵袭能力的影响 | 第66-69页 |
| 第四部分：miR-128、miR-149和miR-181增强脑胶质瘤细胞的化疗敏感性及其作用机制 | 第69-84页 |
| 4.1 miR-128、miR-149和miR-181对脑胶质瘤细胞化疗敏感性的影响 | 第69-74页 |
| 4.2 miR-128、miR-149和miR-181增强TMZ对脑胶质瘤细胞化疗敏感性的作用机制 | 第74-84页 |
| 第三章 讨论 | 第84-89页 |
| 第四章 结论 | 第89-90页 |
| 参考文献 | 第90-96页 |
| 综述 | 第96-106页 |
| 参考文献 | 第101-106页 |
| 攻读博士学位期间主要研究成果 | 第106-107页 |
| 致谢 | 第107页 |
