| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 专业名词縮写中英文对照表 | 第12-13页 |
| 前言 | 第13-15页 |
| 主要实验技术路线图 | 第15-17页 |
| 第一章 DNAJB13在人成熟精子中的表达和定位 | 第17-34页 |
| 1 对象、材料和方法 | 第17-34页 |
| 1.1 对象 | 第17页 |
| 1.2 材料 | 第17-19页 |
| 1.2.1 标本 | 第17页 |
| 1.2.2 分子量标准 | 第17页 |
| 1.2.3 主要试剂 | 第17-18页 |
| 1.2.4 主要耗材 | 第18页 |
| 1.2.5 仪器设备 | 第18-19页 |
| 1.3 方法 | 第19-27页 |
| 1.3.1 Western blot检测DNAJB13蛋白在人成熟精子中的表达 | 第19-23页 |
| 1.3.2 人成熟精子免疫荧光共定位 | 第23-24页 |
| 1.3.3 SDS处理前后精子的免疫荧光共定位 | 第24-25页 |
| 1.3.4 免疫电镜研究DNAJB13蛋白在人成熟精子中的精细定位 | 第25-26页 |
| 1.3.5 相关试剂的配制 | 第26-27页 |
| 1.4 结果 | 第27-32页 |
| 1.4.1 Western blot检测DNAJB13蛋白在人成熟精子中的表达 | 第27-28页 |
| 1.4.2 人成熟精子中DNAJB13的免疫荧光共定位 | 第28页 |
| 1.4.3 SDS处理前后DNAJB13在精子中的免疫荧光共定位 | 第28-30页 |
| 1.4.4 免疫的电镜检测DNAJB13在人成熟精子中的超微结构定位 | 第30-32页 |
| 1.5 讨论 | 第32-34页 |
| 第二章 DNAJB13与特发性弱精症的相关性 | 第34-64页 |
| 2 对象、材料和方法 | 第34-64页 |
| 2.1 对象 | 第34页 |
| 2.2 材料 | 第34-35页 |
| 2.2.1 标本 | 第34页 |
| 2.2.2 分子量标准 | 第34页 |
| 2.2.3 主要试剂 | 第34-35页 |
| 2.2.4 主要耗材 | 第35页 |
| 2.2.5 仪器设备 | 第35页 |
| 2.2.6 引物 | 第35页 |
| 2.3 方法 | 第35-41页 |
| 2.3.1 外周血DNA抽提 | 第35-37页 |
| 2.3.2 引物设计 | 第37-38页 |
| 2.3.3 PCR聚合酶链式反应扩增 | 第38-39页 |
| 2.3.4 PCR产物检测 | 第39页 |
| 2.3.5 DNA测序 | 第39-40页 |
| 2.3.6 PCR产物限制性内切酶酶切 | 第40页 |
| 2.3.7 DNAJB13突变前后生物信息学分析 | 第40-41页 |
| 2.4 配备试剂 | 第41-42页 |
| 2.4.1 电泳试剂的配制 | 第41页 |
| 2.4.2 聚丙烯酰胺凝胶银染试剂的配制 | 第41-42页 |
| 2.5 结果 | 第42-60页 |
| 2.5.1 DNAJB13基因第2号外显子片段突变筛查结果 | 第42-46页 |
| 2.5.2 DNAJB13基因第3号外显子片段突变筛查结果 | 第46-47页 |
| 2.5.3 DNAJB13基因第8号外显子片段突变筛查结果 | 第47-49页 |
| 2.5.4 DNAJB13第2号外显子扩增片段T38C突变前后生物信息学分析 | 第49-60页 |
| 2.6 讨论 | 第60-64页 |
| 第三章 免疫共沉淀联合质谱分析筛选人成熟精子中DNAJB13的相互作用蛋白 | 第64-94页 |
| 3 对象、材料和方法 | 第64-94页 |
| 3.1 对象 | 第64页 |
| 3.2 材料 | 第64-65页 |
| 3.2.1 标本 | 第64页 |
| 3.2.2 分子量标准 | 第64-65页 |
| 3.2.3 主要试剂 | 第65页 |
| 3.2.4 主要耗材 | 第65页 |
| 3.2.5 仪器设备 | 第65页 |
| 3.3 方法 | 第65-68页 |
| 3.3.1 精子细胞全蛋白的提取 | 第65页 |
| 3.3.2 免疫共沉淀 | 第65-66页 |
| 3.3.3 SDS-PAGE电泳和凝胶染色 | 第66页 |
| 3.3.4 蛋白质酶解 | 第66页 |
| 3.3.5 肽段提取 | 第66页 |
| 3.3.6 LC-ESI-MSMS分析 | 第66-67页 |
| 3.3.7 信息分析 | 第67-68页 |
| 3.4 标准生物信息学分析 | 第68-72页 |
| 3.4.1 原始质谱数据 | 第68-69页 |
| 3.4.2 数据库的选择 | 第69页 |
| 3.4.3 Mascot搜索 | 第69-70页 |
| 3.4.4 鉴定质量评估 | 第70-72页 |
| 3.4.5 CO-IP联合Western Blot对初筛蛋白进行验证 | 第72页 |
| 3.5 结果 | 第72-87页 |
| 3.5.1 SDS-PAGE电泳后考染脱色 | 第72页 |
| 3.5.2 基本鉴定信息 | 第72-73页 |
| 3.5.3 蛋白鉴定覆盖度分布 | 第73-74页 |
| 3.5.4 GO注释 | 第74-79页 |
| 3.5.5 COG注释 | 第79-81页 |
| 3.5.6 Pathway代谢通路 | 第81-85页 |
| 3.5.7 DNAJB13蛋白相互作用蛋白的初筛 | 第85-87页 |
| 3.5.8 CO-IP联合Western Blot验证 | 第87页 |
| 3.6 讨论 | 第87-94页 |
| 全文结论 | 第94-95页 |
| 参考文献 | 第95-101页 |
| 综述 | 第101-109页 |
| 参考文献 | 第105-109页 |
| 在读硕士期间发表的论文目录 | 第109-110页 |
| 致谢 | 第110页 |
