中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
缩略语府号说明 | 第10-11页 |
前言 | 第11-15页 |
研究现状、成果 | 第11-13页 |
研究目的、方法 | 第13-15页 |
材料与方法 | 第15-27页 |
1. 主要实验仪器 | 第15页 |
2. 实验材料 | 第15-18页 |
2.1 组织标本 | 第15-16页 |
2.2 人胶质瘤细胞系和培养基 | 第16页 |
2.3 原位杂交探针、Mimics及PCR引物序列(见表2-5) | 第16-17页 |
2.4 主要试剂 | 第17-18页 |
3. 实验方法 | 第18-27页 |
3.1 组织微阵列原位杂交技术 | 第18-19页 |
3.2 三种miR-29 Mimics转染效率的鉴定 | 第19-22页 |
3.3 三种miR-29靶mRNA的生物信息学预测 | 第22页 |
3.4 胶质瘤细胞中三种miR-29靶mRNA的鉴定 | 第22-23页 |
3.5 DNMT3A及DNMT3B mRNA的qRT-PCR检测 | 第23-24页 |
3.6 DNMT3A和DNMT3B蛋白表达的Westernblot检测 | 第24-26页 |
3.7 统计学方法 | 第26-27页 |
结果 | 第27-42页 |
1. 对照组及各胶质瘤组三种miR-29表达水平的比较 | 第27-28页 |
2. 转染Mimics可有效提高胶质瘤细胞三种miR-29的总含量 | 第28-29页 |
3. 三种miR-29靶mRNA的生物信息学预测结果 | 第29-30页 |
4. 胶质瘤细胞中三种miR-29靶mRNA的鉴定 | 第30-34页 |
4.1 重组荧光素酶表达质粒的提取与鉴定 | 第30-32页 |
4.2 各组U87MG及U251细胞荧光素酶活性检测结果 | 第32-34页 |
5. miR-29家族调控胶质瘤细胞DNMT3A及DNMT3B表达 | 第34-38页 |
5.1 miR-29家族诱导胶质瘤细胞DNMT3A和DNMT3B mRNA降解 | 第34-36页 |
5.2 miR-29家族下调胶质瘤细胞DNMT3A和DNMT3B蛋白表达 | 第36-38页 |
6. miR-29抑制剂上调胶质瘤细胞DNMT3A和DNMT3B表达 | 第38-42页 |
6.1 miR-29抑制剂上调DNMT3A和DNMT3B mRNA表达水平 | 第38-39页 |
6.2 miR-29抑制剂上调DNMT3A和DNMT3B蛋白表达水平 | 第39-42页 |
讨论 | 第42-46页 |
1. miR-29家族成员在胶质瘤细胞中表达异常降低 | 第42页 |
2. 在胶质瘤细胞DNMT3A和DNMT3B均是miR-29家族的靶基因 | 第42-43页 |
3. 在胶质瘤细胞miR-29家族可敲低DNMT3A或DNMT3B表达 | 第43-44页 |
4. 抑制miR-29活性可上调胶质瘤细胞DNMT3A和DNMT3B表达 | 第44页 |
5. 总结与展望 | 第44-46页 |
结论 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-49页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第49-50页 |
综述 | 第50-66页 |
综述参考文献 | 第60-66页 |
致谢 | 第66页 |