| 摘要 | 第5-6页 |
| ABSTRACT | 第6页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-16页 |
| 1.1 前言 | 第9页 |
| 1.2 重金属诱导活性氧（Reactive oxygen species,ROS）的生成 | 第9-10页 |
| 1.2.1 活性氧（ROS） | 第9页 |
| 1.2.2 常见的金属介导 ROS 生成机制 | 第9-10页 |
| 1.3 重金属铬（Chromium,Cr） | 第10-11页 |
| 1.3.1 自然界中铬的价态 | 第10页 |
| 1.3.2 六价铬和氧化应激（oxidative stress） | 第10-11页 |
| 1.4 实验用鱼 | 第11-12页 |
| 1.5 抗氧化防御系统 | 第12-14页 |
| 1.5.1 抗氧化酶系统 | 第12-13页 |
| 1.5.2 金属硫蛋白（Metallothionein,MT） | 第13页 |
| 1.5.3 泛素(Ubiquitin,Ub） | 第13-14页 |
| 1.5.4 氧化应激防御型传导通路 Nrf2-Keap1 | 第14页 |
| 1.6 选题目的和意义 | 第14-16页 |
| 第二章 稀有鮈鲫抗氧化酶基因的克隆 | 第16-32页 |
| 2.1 前言 | 第16页 |
| 2.2 材料与试剂 | 第16页 |
| 2.2.1 主要仪器 | 第16页 |
| 2.2.2 主要试剂 | 第16页 |
| 2.2.3 实验用鱼及其组织样品 | 第16页 |
| 2.3 实验方法 | 第16-21页 |
| 2.3.1 总 RNA 的提取 | 第16页 |
| 2.3.2 中间片段的克隆 | 第16-18页 |
| 2.3.3 cat、Cu/Zn-sod、gpx1、ub、mt 基因 cDNA 末端序列的快速扩增 | 第18-21页 |
| 2.4 结果与分析 | 第21-30页 |
| 2.4.1 总 RNA 的检测 | 第21-22页 |
| 2.4.2 稀有鮈鲫 cat 基因全长 cDNA 的克隆 | 第22-23页 |
| 2.4.3 稀有鮈鲫 Cu/Zn-sod 基因全长 cDNA 的克隆 | 第23-24页 |
| 2.4.4 稀有鮈鲫 gpx1 基因全长 cDNA 的克隆 | 第24-26页 |
| 2.4.5 稀有鮈鲫 cat、Cu/Zn-sod、gpx1 基因全长 cDNA 的序列分析 | 第26-30页 |
| 2.5 讨论 | 第30页 |
| 2.6 小结 | 第30-32页 |
| 第三章 Cr~(6+)对稀有鮈鲫抗氧化酶基因 mRNA 表达的影响 | 第32-40页 |
| 3.1 前言 | 第32页 |
| 3.2 材料与试剂 | 第32页 |
| 3.2.1 主要仪器 | 第32页 |
| 3.2.2 主要试剂 | 第32页 |
| 3.2.3 实验用鱼 | 第32页 |
| 3.2.4 Cr~(6+)暴露实验 | 第32页 |
| 3.3 实验方法 | 第32-34页 |
| 3.3.1 总 RNA 的提取及其反转录 | 第32-33页 |
| 3.3.2 内参基因的筛选 | 第33页 |
| 3.3.3 设计实时定量引物 | 第33页 |
| 3.3.4 qRT-PCR | 第33-34页 |
| 3.3.6 数据分析 | 第34页 |
| 3.4 结果与分析 | 第34-37页 |
| 3.5 讨论 | 第37-39页 |
| 3.6 小结 | 第39-40页 |
| 第四章 CR~(6+)对稀有鮈鲫抗氧化酶活性的影响 | 第40-52页 |
| 4.1 前言 | 第40页 |
| 4.2 材料与试剂 | 第40页 |
| 4.2.1 主要仪器 | 第40页 |
| 4.2.2 实验用鱼 | 第40页 |
| 4.3 实验方法 | 第40-44页 |
| 4.3.1 组织匀浆的制备 | 第40页 |
| 4.3.2 蛋白测定 | 第40-41页 |
| 4.3.3 过氧化氢酶（CAT）测定 | 第41页 |
| 4.3.4 超氧化物歧化酶（SOD）测定 | 第41-42页 |
| 4.3.5 谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）测定 | 第42页 |
| 4.3.6 谷胱甘肽 S 转移酶（GST）测定 | 第42-43页 |
| 4.3.7 谷胱甘肽还原酶（GR）测定 | 第43页 |
| 4.3.8 谷胱甘肽（GSH）测定 | 第43页 |
| 4.3.9 总羰基测定 | 第43-44页 |
| 4.3.10 丙二醛（MDA）测定 | 第44页 |
| 4.4 结果与分析 | 第44-49页 |
| 4.4.1 水样中 Cr~(6+)浓度 | 第44-45页 |
| 4.4.2 Cr 在鱼体内的生物富集 | 第45页 |
| 4.4.3 Cr~(6+)处理后鱼体生理指标和酶活性变化 | 第45-49页 |
| 4.5 讨论 | 第49-51页 |
| 4.6 小结 | 第51-52页 |
| 结论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-60页 |
| 附录 | 第60-71页 |
| 缩略词 | 第71-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |
| 作者简介 | 第73页 |
