摘要 | 第3-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
中英文缩略词表 | 第9-11页 |
第1章 引言 | 第11-14页 |
第2章 材料与方法 | 第14-29页 |
2.1 实验材料 | 第14-15页 |
2.1.1 细胞株 | 第14页 |
2.1.2 标本采集 | 第14页 |
2.1.3 仪器设备 | 第14-15页 |
2.2 实验主要试剂和溶液配制 | 第15-19页 |
2.2.1 MKN45 培养主要试剂 | 第15页 |
2.2.2 DCs 分离、纯化、培养、鉴定主要试剂 | 第15-16页 |
2.2.3 药物干预实验所需要的主要试剂 | 第16页 |
2.2.4 RT-PCR 所需要的主要试剂 | 第16-17页 |
2.2.5 免疫细胞化学染色所需要的主要试剂 | 第17页 |
2.2.6 实验主要试剂配制方法 | 第17-19页 |
2.3 实验方法 | 第19-28页 |
2.3.1 胃癌细胞株 MKN45 培养 | 第19-20页 |
2.3.2 实验流程图及分组 | 第20-21页 |
2.3.3 DCs 的分离、纯化、培养及鉴定 | 第21-22页 |
2.3.4 药物干预及 MKN45 共孵育试验 | 第22页 |
2.3.5 目的基因 mRNA 表达的检测(RT-PCR 方法) | 第22-26页 |
2.3.6 检测目的基因的蛋白表达(免疫细胞化学方法) | 第26-28页 |
2.4 图像处理及分析方法 | 第28页 |
2.5 统计学处理 | 第28页 |
2.6 伦理学问题 | 第28-29页 |
第3章 结果 | 第29-50页 |
3.1 LPS 诱导 DCS 成熟实验结果 | 第29-34页 |
3.1.1 DCs 的形态学观察结果 | 第29-30页 |
3.1.2 LPS 诱导 DCs 成熟相关分子表达检测结果 | 第30-34页 |
3.2 药物干预及 MKN45 共孵育后 DCs 中目的基因 mRNA 及蛋白的表达 | 第34-50页 |
3.2.1 VIP、LY294002 干预及 MKN45 共孵育后 DCs 中β-actin mRNA 表达 | 第34页 |
3.2.2 VIP、LY294002 干预及 MKN45 共孵育后 DCs 中 CD80 mRNA 及蛋白的表达 | 第34-37页 |
3.2.3 VIP、LY294002 干预及 MKN45 共孵育后 DCs 中 CD86 mRNA 及蛋白的表达 | 第37-39页 |
3.2.4 VIP、LY294002 干预及 MKN45 共孵育后 DCs 中 CD40 mRNA 及蛋白的表达 | 第39-41页 |
3.2.5 VIP、LY294002 干预及 MKN45 共孵育后 DCs 中 MHC-ⅡmRNA 及蛋白的表达 | 第41-44页 |
3.2.6 VIP、LY294002 干预及 MKN45 共孵育后 DCs 中 PI3K p85 mRNA 及蛋白表达 | 第44-46页 |
3.2.7 VIP、LY294002 干预及 MKN45 共孵育后 DCs 中 Akt mRNA 及蛋白的表达 | 第46-48页 |
3.2.8 VIP、LY294002 干预及 MKN45 共孵育后 DCs 中 p-Akt(Ser473)蛋白的表达 | 第48-50页 |
第4章 讨论 | 第50-54页 |
4.1 DCS 成熟过程中细胞内抗原提呈相关分子表达变化 | 第50-51页 |
4.2 VIP 干预及 MKN45 共孵育后 DCS 中抗原提呈相关分子变化 | 第51-52页 |
4.3 VIP、LY294002 干预及 MKN45 共孵育后 DCS 中 PI3K/AKT 信号通路变化 | 第52-53页 |
4.4 LY294002 干预 DCS 后抗原提呈相关分子变化 | 第53-54页 |
第5章 结论 | 第54-55页 |
致谢 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-59页 |
综述 | 第59-68页 |
参考文献 | 第65-68页 |