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VIP对PI3K/Akt信号通路的影响在DC细胞胃癌抗原提呈中的作用研究

摘要第3-5页
ABSTRACT第5-6页
中英文缩略词表第9-11页
第1章 引言第11-14页
第2章 材料与方法第14-29页
    2.1 实验材料第14-15页
        2.1.1 细胞株第14页
        2.1.2 标本采集第14页
        2.1.3 仪器设备第14-15页
    2.2 实验主要试剂和溶液配制第15-19页
        2.2.1 MKN45 培养主要试剂第15页
        2.2.2 DCs 分离、纯化、培养、鉴定主要试剂第15-16页
        2.2.3 药物干预实验所需要的主要试剂第16页
        2.2.4 RT-PCR 所需要的主要试剂第16-17页
        2.2.5 免疫细胞化学染色所需要的主要试剂第17页
        2.2.6 实验主要试剂配制方法第17-19页
    2.3 实验方法第19-28页
        2.3.1 胃癌细胞株 MKN45 培养第19-20页
        2.3.2 实验流程图及分组第20-21页
        2.3.3 DCs 的分离、纯化、培养及鉴定第21-22页
        2.3.4 药物干预及 MKN45 共孵育试验第22页
        2.3.5 目的基因 mRNA 表达的检测(RT-PCR 方法)第22-26页
        2.3.6 检测目的基因的蛋白表达(免疫细胞化学方法)第26-28页
    2.4 图像处理及分析方法第28页
    2.5 统计学处理第28页
    2.6 伦理学问题第28-29页
第3章 结果第29-50页
    3.1 LPS 诱导 DCS 成熟实验结果第29-34页
        3.1.1 DCs 的形态学观察结果第29-30页
        3.1.2 LPS 诱导 DCs 成熟相关分子表达检测结果第30-34页
    3.2 药物干预及 MKN45 共孵育后 DCs 中目的基因 mRNA 及蛋白的表达第34-50页
        3.2.1 VIP、LY294002 干预及 MKN45 共孵育后 DCs 中β-actin mRNA 表达第34页
        3.2.2 VIP、LY294002 干预及 MKN45 共孵育后 DCs 中 CD80 mRNA 及蛋白的表达第34-37页
        3.2.3 VIP、LY294002 干预及 MKN45 共孵育后 DCs 中 CD86 mRNA 及蛋白的表达第37-39页
        3.2.4 VIP、LY294002 干预及 MKN45 共孵育后 DCs 中 CD40 mRNA 及蛋白的表达第39-41页
        3.2.5 VIP、LY294002 干预及 MKN45 共孵育后 DCs 中 MHC-ⅡmRNA 及蛋白的表达第41-44页
        3.2.6 VIP、LY294002 干预及 MKN45 共孵育后 DCs 中 PI3K p85 mRNA 及蛋白表达第44-46页
        3.2.7 VIP、LY294002 干预及 MKN45 共孵育后 DCs 中 Akt mRNA 及蛋白的表达第46-48页
        3.2.8 VIP、LY294002 干预及 MKN45 共孵育后 DCs 中 p-Akt(Ser473)蛋白的表达第48-50页
第4章 讨论第50-54页
    4.1 DCS 成熟过程中细胞内抗原提呈相关分子表达变化第50-51页
    4.2 VIP 干预及 MKN45 共孵育后 DCS 中抗原提呈相关分子变化第51-52页
    4.3 VIP、LY294002 干预及 MKN45 共孵育后 DCS 中 PI3K/AKT 信号通路变化第52-53页
    4.4 LY294002 干预 DCS 后抗原提呈相关分子变化第53-54页
第5章 结论第54-55页
致谢第55-56页
参考文献第56-59页
综述第59-68页
    参考文献第65-68页

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