| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 第一章 绪论 | 第12-24页 |
| 1.1 汞的概述 | 第12页 |
| 1.2 重金属汞污染与对人类的危害 | 第12-16页 |
| 1.2.1 重金属汞污染来源 | 第12-14页 |
| 1.2.2 重金属汞污染现状 | 第14-15页 |
| 1.2.3 重金属汞污染对人类的危害 | 第15-16页 |
| 1.3 微生物抗汞机理 | 第16-19页 |
| 1.3.1 细胞外的阻隔、沉淀作用 | 第16-17页 |
| 1.3.2 细胞内的隔离、解毒作用 | 第17页 |
| 1.3.3 金属的转化作用 | 第17-18页 |
| 1.3.4 微生物内部汞抗性分子机制 | 第18-19页 |
| 1.4 海洋微生物的资源多样性及抗重金属研究现状 | 第19-21页 |
| 1.4.1 海洋微生物资源的多样性及应用 | 第19-20页 |
| 1.4.2 海洋微生物抗重金属的研究现状 | 第20-21页 |
| 1.5 课题的研究意义与内容 | 第21-24页 |
| 1.5.1 立题依据、研究意义及目的 | 第21-22页 |
| 1.5.2 主要研究内容 | 第22页 |
| 1.5.3 主要技术路线 | 第22-24页 |
| 第二章 P.stutzeri273全基因组分析以及耐受和脱除汞的测定 | 第24-31页 |
| 2.1 材料与仪器 | 第24-25页 |
| 2.1.1 实验菌株 | 第24页 |
| 2.1.2 实验试剂及主要培养基 | 第24页 |
| 2.1.3 主要实验仪器 | 第24-25页 |
| 2.2 实验方法 | 第25-27页 |
| 2.2.1 P.stutzeri273中汞抗性基因分析 | 第25页 |
| 2.2.2 菌种活化 | 第25-26页 |
| 2.2.3 MIC的测定 | 第26页 |
| 2.2.4 P.stutzeri273在不同Hg2+浓度下的生长曲线的测定 | 第26页 |
| 2.2.5 测定P.stutzeri273对重金属汞的脱除率 | 第26-27页 |
| 2.2.6 统计分析 | 第27页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第27-30页 |
| 2.3.1 P.stutzeri273汞抗性基因序列分析 | 第27-28页 |
| 2.3.2 汞对P.stutzeri273的最小抑制浓度MIC | 第28-29页 |
| 2.3.3 不同Hg2+浓度下P.stutzeri273的生长曲线 | 第29页 |
| 2.3.4 P.stutzeri273对重金属汞的脱除率 | 第29-30页 |
| 2.4 小结 | 第30-31页 |
| 第三章 构建P.stutzeri273中汞抗性基因的突变株 | 第31-45页 |
| 3.1 材料与仪器 | 第31-32页 |
| 3.1.1 实验菌株 | 第31页 |
| 3.1.2 主要试剂及培养基 | 第31-32页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第32页 |
| 3.2 实验方法 | 第32-42页 |
| 3.2.1 大肠杆菌DH5α、SY327和S17-1感受态细胞的制备 | 第32-33页 |
| 3.2.2 细胞转化 | 第33页 |
| 3.2.3 同源重组敲除汞抗性基因 | 第33-41页 |
| 3.2.4 突变菌株回补实验 | 第41-42页 |
| 3.2.5 统计分析 | 第42页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第42-43页 |
| 3.4 小结 | 第43-45页 |
| 第四章 汞胁迫下相关突变株的汞抗性基因的表达差异 | 第45-75页 |
| 4.1 材料与仪器 | 第45-47页 |
| 4.1.1 实验菌株 | 第45页 |
| 4.1.2 主要试剂及培养基 | 第45-47页 |
| 4.1.3 主要仪器 | 第47页 |
| 4.2 实验方法 | 第47-55页 |
| 4.2.1 菌株的培养 | 第47页 |
| 4.2.2 检测汞胁迫下的野生型菌株、突变株以及回补菌株的生长状况 | 第47-48页 |
| 4.2.3 汞胁迫下相关突变株的汞抗性基因的表达差异 | 第48-51页 |
| 4.2.4 检测汞胁迫下菌株的运动能力和趋化性 | 第51-52页 |
| 4.2.5 检测野生型P.stutzeri273、突变体ΔmerF和回补菌株ΔmerF/cmerF的生物膜 | 第52页 |
| 4.2.6 透射电镜(TEM)观察形态 | 第52-53页 |
| 4.2.7 Westernblotting分析 | 第53-54页 |
| 4.2.8 转录组分析 | 第54-55页 |
| 4.2.9 蛋白组分析 | 第55页 |
| 4.2.10 统计分析 | 第55页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第55-73页 |
| 4.3.1 汞胁迫下的野生型菌株、突变株以及回补菌株的生长状况 | 第55-57页 |
| 4.3.2 突变体ΔmerR和ΔmerD中汞抗性基因的表达量 | 第57-59页 |
| 4.3.3 转录组分析不同浓度Hg~(2+)对P.stutzeri273基因表达的影响 | 第59-62页 |
| 4.3.4 不同Hg2+浓度对P.stutzeri273生理发育的影响 | 第62-66页 |
| 4.3.5 野生型P.stutzeri273和突变体的鞭毛形态以及运动能力分析 | 第66-67页 |
| 4.3.6 MerF对P.stutzeri273的运动能力、鞭毛和生物膜形成的重要性 | 第67-69页 |
| 4.3.7 不同致病细菌中MerF的同源性分析 | 第69-70页 |
| 4.3.8 野生型菌株P.stutzeri273和突变体ΔmerF的转录组分析 | 第70-71页 |
| 4.3.9 野生型菌株P.stutzeri273和突变体ΔmerF的蛋白质组分析 | 第71-72页 |
| 4.3.10 P.stutzeri273适应汞的生活模式图 | 第72-73页 |
| 4.4 小结 | 第73-75页 |
| 第五章 结论 | 第75-76页 |
| 参考文献 | 第76-84页 |
| 致谢 | 第84-87页 |
| 作者简历及攻读学位期间发表的学术论文 | 第87页 |
