| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 中英文縮略词表 | 第11-12页 |
| 1 前言 | 第12-14页 |
| 2 材料与方法 | 第14-16页 |
| 2.1 实验动物及分组 | 第14页 |
| 2.2 细胞株 | 第14页 |
| 2.3 主要仪器和设备 | 第14-15页 |
| 2.4 主要实验试剂及耗材 | 第15-16页 |
| 3 实验方法 | 第16-24页 |
| 3.1 吗啡耐受模型建立 | 第16-17页 |
| 3.1.1 鞘内置管 | 第16-17页 |
| 3.1.2 鞘内置管验证 | 第17页 |
| 3.1.3 鞘内给药 | 第17页 |
| 3.2 行为学实验 | 第17页 |
| 3.3 动物标本取材及保存 | 第17-18页 |
| 3.3.1 大鼠灌注取材 | 第17-18页 |
| 3.3.2 大鼠脊髓及背根神经节取材 | 第18页 |
| 3.4 原位杂交 | 第18-20页 |
| 3.4.1 冰冻切片的制备 | 第18-19页 |
| 3.4.2 miR-365原位杂交DAB显色 | 第19页 |
| 3.4.3 miR-365原位杂交荧光显色及免疫荧光双标 | 第19-20页 |
| 3.5 MIRNA靶基因预测 | 第20页 |
| 3.6 双荧光素酶试验对MIRNA靶基因的验证 | 第20-23页 |
| 3.6.1 细胞培养 | 第20-21页 |
| 3.6.2 质粒准备 | 第21-22页 |
| 3.6.3 细胞转染 | 第22-23页 |
| 3.6.4 双荧光素酶检测实验 | 第23页 |
| 3.7 图像处理及统计分析 | 第23-24页 |
| 4 实验结果 | 第24-32页 |
| 4.1 吗啡耐受模型的建立 | 第24页 |
| 4.2 MIRNA原位杂交结果 | 第24-29页 |
| 4.3 生物信息学靶基因预测结果 | 第29-30页 |
| 4.4 双荧光素酶试验 | 第30-32页 |
| 5 讨论 | 第32-36页 |
| 6 结论 | 第36-37页 |
| 参考文献 | 第37-40页 |
| 综述 | 第40-54页 |
| 参考文献 | 第48-54页 |
| 致谢 | 第54页 |