中文摘要 | 第6-8页 |
英文摘要 | 第8-10页 |
常用缩写词中英文对照表 | 第11-12页 |
前言 | 第12-14页 |
第一部分 构建pGPU6-GFP-GPR4shRNA干扰载体 | 第14-16页 |
1 主要试剂及溶液配制 | 第14页 |
1.1 主要试剂 | 第14页 |
1.2 主要仪器 | 第14页 |
2 pGPU6-GFP-GPR4shRNA干扰载体构建实验方法 | 第14-16页 |
2.1 靶向GPR4基因的寡核苷酸设计与合成 | 第14-15页 |
2.2 GPR4shRNA干扰载体质粒、pMSCVvector空载质粒构建以及鉴定 | 第15-16页 |
第二部分 材料和方法 | 第16-24页 |
1 材料 | 第16-18页 |
1.1 质粒和宫颈癌HeLa细胞 | 第16页 |
1.2 主要试剂和酶 | 第16页 |
1.3 主要仪器 | 第16-17页 |
1.4 主要液体配制 | 第17-18页 |
2 实验方法 | 第18-24页 |
2.1 细胞培养 | 第18-19页 |
2.2 质粒提取及转染 | 第19-21页 |
2.3 MTT法测定细胞生长曲线 | 第21-22页 |
2.4 流式细胞仪检测细胞周期 | 第22页 |
2.5 检测细胞凋亡率 | 第22页 |
2.6 免疫印迹法(Westernblot)检测测定细胞GPR4蛋白及VEGF蛋白表达 | 第22-23页 |
2.7 统计学方法 | 第23-24页 |
第三部分 结果 | 第24-28页 |
3.1 GPR4基因转染效率 | 第24页 |
3.2 MTT法检测细胞增殖 | 第24-25页 |
3.3 流式细胞仪检测细胞周期 | 第25-26页 |
3.4 细胞凋亡检测结果 | 第26-27页 |
3.5 Westernblot检测GPR4及VEGF的表达 | 第27-28页 |
讨论 | 第28-30页 |
结论 | 第30-31页 |
参考文献 | 第31-33页 |
综述 | 第33-37页 |
参考文献 | 第36-37页 |
致谢 | 第37-38页 |
个人简历 | 第38-39页 |