摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
符号说明 | 第11-13页 |
1 引言 | 第13-20页 |
1.1 胃癌概述 | 第13-14页 |
1.1.1 胃癌发病原因及诊断 | 第13-14页 |
1.2 代谢组学概况 | 第14-15页 |
1.2.1 代谢组学分析流程 | 第14-15页 |
1.3 UHPLC-MS/MS技术 | 第15-16页 |
1.4 细胞样品前处理研究进展 | 第16-19页 |
1.4.1 细胞样本淬灭方法 | 第16-17页 |
1.4.2 细胞收集方法 | 第17-18页 |
1.4.3 细胞清洗溶剂 | 第18页 |
1.4.4 提取溶剂 | 第18-19页 |
1.4.5 细胞破碎方法 | 第19页 |
1.5 课题研究的目的和意义 | 第19-20页 |
2 UHPLC-MS/MS技术分析胃癌细胞中氨基酸及糖类物质的代谢行为 | 第20-39页 |
2.1 实验材料 | 第20-22页 |
2.1.1 仪器与设备 | 第20-21页 |
2.1.2 试剂与药品 | 第21页 |
2.1.3 实验细胞 | 第21-22页 |
2.2 实验方法 | 第22-25页 |
2.2.1 细胞试验 | 第22-23页 |
2.2.2 分析条件 | 第23-24页 |
2.2.3 数据处理 | 第24-25页 |
2.3 实验结果 | 第25-30页 |
2.3.1 LC-MS总离子流图 | 第25页 |
2.3.2 仪器稳定性 | 第25-26页 |
2.3.3 主成分分析 | 第26-27页 |
2.3.4 t检验 | 第27页 |
2.3.5 层次聚类分析 | 第27-28页 |
2.3.6 代谢通路分析 | 第28-30页 |
2.4 讨论 | 第30-37页 |
2.4.1 高效液相色谱条件的优化 | 第30-33页 |
2.4.2 质谱条件的优化 | 第33-34页 |
2.4.3 细胞样品前处理的优化 | 第34-37页 |
2.5 小结 | 第37-39页 |
3 24种氨基酸的定量分析方法的建立及应用 | 第39-54页 |
3.1 实验材料 | 第39-40页 |
3.1.1 仪器与设备 | 第39页 |
3.1.2 试剂与药品 | 第39-40页 |
3.1.3 实验细胞 | 第40页 |
3.2 溶液配制 | 第40-41页 |
3.2.1 标准储备液的配制 | 第40页 |
3.2.2 混合标准工作溶液的配制 | 第40-41页 |
3.2.3 内标工作溶液的配制 | 第41页 |
3.2.4 PBS的配制 | 第41页 |
3.2.5 细胞培养液 | 第41页 |
3.3 分析方法的建立 | 第41-43页 |
3.3.1 液相方法 | 第41-42页 |
3.3.2 质谱方法 | 第42页 |
3.3.3 细胞样品前处理 | 第42-43页 |
3.3.4 模拟基质添加标准品前处理方法 | 第43页 |
3.4 方法学验证 | 第43-50页 |
3.4.1 专属性 | 第43页 |
3.4.2 定量下限 | 第43-44页 |
3.4.3 标曲与线性范围 | 第44-45页 |
3.4.4 准确度与精密度 | 第45-46页 |
3.4.5 绝对回收率 | 第46-47页 |
3.4.6 稳定性 | 第47-48页 |
3.4.7 基质效应 | 第48-50页 |
3.5 分析方法的优化 | 第50-52页 |
3.5.1 质谱条件的优化 | 第50页 |
3.5.2 液相条件的优化 | 第50-52页 |
3.6 细胞样品测定 | 第52-53页 |
3.7 小结 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-61页 |
附录 | 第61-110页 |
个人简介及论文发表情况 | 第110-111页 |
致谢 | 第111页 |