| 内容提要 | 第5-6页 |
| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 英文缩写词表 | 第14-15页 |
| 前言 | 第15-17页 |
| 第一篇 综述部分 | 第17-37页 |
| 第1章 细胞重编程的研究进展 | 第17-27页 |
| 1.1 细胞重编程的研究 | 第17-18页 |
| 1.1.1 细胞核重编程 | 第17页 |
| 1.1.2 细胞融合 | 第17-18页 |
| 1.2 IPSCS 技术的研究进展 | 第18-27页 |
| 1.2.1 iPSCs 诱导方法 | 第18-22页 |
| 1.2.2 iPSCs 的应用 | 第22-27页 |
| 第2章 MICRORNA 对于多能干细胞调控的研究进展 | 第27-37页 |
| 2.1 MIRNA 的作用机制 | 第27-28页 |
| 2.2 MIRNA 在 IPSCS 中的作用 | 第28-32页 |
| 2.2.1 miRNA 在 ESCs 中的表达 | 第28-29页 |
| 2.2.2 miRNA 调控 ESCs 关键转录因子的表达 | 第29-30页 |
| 2.2.3 miRNA 调控 ESCs 细胞周期 | 第30页 |
| 2.2.4 miRNAs 调控 ESCs 表观重编程 | 第30-31页 |
| 2.2.5 miRNAs 控制 iPSCs 的生长 | 第31-32页 |
| 2.3 MIRNA 在成体干细胞中的作用 | 第32-35页 |
| 2.3.1 miRNA 促进生殖系发育 | 第32页 |
| 2.3.2 miRNA 调节造血作用 | 第32-34页 |
| 2.3.3 miRNAs 调节骨骼和肌肉发育 | 第34-35页 |
| 2.4 MIRNAS 的临床作用 | 第35-37页 |
| 第二篇 实验研究 | 第37-77页 |
| 第1章 猪胎儿成纤维细胞的诱导及鉴定 | 第37-55页 |
| 1.1 材料与方法 | 第37-40页 |
| 1.1.1 实验动物 | 第37-38页 |
| 1.1.2 主要实验仪器及耗材 | 第38-39页 |
| 1.1.3 主要试剂 | 第39-40页 |
| 1.2 实验方法 | 第40-48页 |
| 1.2.1 原代小鼠成纤维（MEF）细胞的制备 | 第40-41页 |
| 1.2.2 饲养层细胞的制备 | 第41-42页 |
| 1.2.3 猪胎儿成纤维（PFF）细胞的制备 | 第42页 |
| 1.2.4 质粒准备 | 第42-43页 |
| 1.2.5 逆转录病毒制备 | 第43页 |
| 1.2.6 猪 iPSCs 诱导 | 第43页 |
| 1.2.7 猪 iPSCs 传代培养、冻存及复苏 | 第43-44页 |
| 1.2.8 猪 iPSCs 鉴定 | 第44-48页 |
| 1.2.9 数据统计学分析 | 第48页 |
| 1.3 实验结果 | 第48-53页 |
| 1.3.1 PFF 细胞重编程为猪 iPSCs | 第48-50页 |
| 1.3.2 猪 iPSCs 鉴定 | 第50-52页 |
| 1.3.3 对猪 iPSCs 体内体外分化发育能力的鉴定 | 第52-53页 |
| 1.4 讨论 | 第53-54页 |
| 1.5 小结 | 第54-55页 |
| 第2章 利用化学方法诱导猪 IPSCS 分化为脂肪细胞 | 第55-65页 |
| 2.1 材料与方法 | 第55-56页 |
| 2.1.1 实验动物 | 第55页 |
| 2.1.2 主要仪器及耗材 | 第55-56页 |
| 2.1.3 实验试剂 | 第56页 |
| 2.1.4 主要试剂的配制（其它试剂见第一章） | 第56页 |
| 2.2 实验方法 | 第56-58页 |
| 2.2.1 microRNA mimics 合成 | 第56-57页 |
| 2.2.2 诱导 piPSCs 成脂分化 | 第57页 |
| 2.2.3 miR-FAM 转染 piPSCs | 第57页 |
| 2.2.4 脂肪细胞鉴定 | 第57页 |
| 2.2.5 脂肪细胞标志基因检测 | 第57-58页 |
| 2.2.6 miRNA 芯片检测前处理 | 第58页 |
| 2.3 实验结果 | 第58-63页 |
| 2.3.1 piPSCs 成脂分化 | 第58-59页 |
| 2.3.2 脂肪细胞鉴定 | 第59-60页 |
| 2.3.3 piPSCs 成脂分化前后 miRNA 表达差异分析 | 第60-63页 |
| 2.4 讨论 | 第63-64页 |
| 2.5 小结 | 第64-65页 |
| 第3章 MIRNAS 对猪 BMSC 成脂分化效率的影响 | 第65-77页 |
| 3.1 材料与方法 | 第65-67页 |
| 3.1.1 实验动物 | 第65页 |
| 3.1.2 主要仪器及耗材 | 第65-66页 |
| 3.1.3 实验试剂 | 第66页 |
| 3.1.4 主要试剂的配制 | 第66-67页 |
| 3.2 实验方法 | 第67-69页 |
| 3.2.1 microRNA mimics 合成 | 第67页 |
| 3.2.2 BMSC 分离与培养 | 第67页 |
| 3.2.3 诱导 BMSC 成脂分化 | 第67-68页 |
| 3.2.4 miRNA 转染 BMSC | 第68页 |
| 3.2.5 脂肪细胞油红鉴定及 PCR 检测 | 第68页 |
| 3.2.6 Realtime PCR | 第68页 |
| 3.2.7 脂肪细胞蛋白鉴定 | 第68-69页 |
| 3.3 实验结果 | 第69-74页 |
| 3.3.1 诱导 BMSC 分化成为脂肪细胞 | 第69-71页 |
| 3.3.2 脂肪细胞基因表达 | 第71-73页 |
| 3.3.3 高表达 miRNAs 对成脂诱导效率的影响 | 第73-74页 |
| 3.4 讨论 | 第74-76页 |
| 3.5 小结 | 第76-77页 |
| 结论 | 第77-79页 |
| 参考文献 | 第79-95页 |
| 导师简介 | 第95-99页 |
| 作者简介 | 第99-100页 |
| 学术成果 | 第100-101页 |
| 附录 | 第101-103页 |
| 致谢 | 第103页 |
