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棉花GhRCA1基因启动子的克隆及功能分析

符号说明第4-8页
摘要第8-9页
Abstract第9-10页
1 前言第11-28页
    1.1 Rubisco 活化酶的发现第11-12页
    1.2 Rubisco 活化酶的分子结构与功能第12-15页
        1.2.1 Rubisco 活化酶的分子结构第12-13页
        1.2.2 Rubisco 活化酶的功能第13-15页
            1.2.2.1 Rubisco 活化酶对 Rubisco 的活化作用第13-14页
            1.2.2.2 其他功能第14-15页
    1.3 Rubisco 活化酶的表达特性研究第15-16页
    1.4 启动子的结构特点第16-17页
        1.4.1 TATA box第16页
        1.4.2 转录起始子第16页
        1.4.3 CAAT box第16-17页
        1.4.4 GC box第17页
        1.4.5 特有的上游元件第17页
    1.5 启动子的类型第17-22页
        1.5.1 组成型启动子第18-19页
            1.5.1.1 CaMV35S 启动子第18页
            1.5.1.2 泛素蛋白基因启动子第18-19页
        1.5.2 组织特异性启动子第19-20页
            1.5.2.1 种子特异性启动子第19页
            1.5.2.2 根特异性启动子第19页
            1.5.2.3 叶片特异性启动子第19-20页
            1.5.2.4 花药特异性启动子第20页
            1.5.2.5 果实特异性表达启动子第20页
            1.5.2.6 维管束特异性表达启动子第20页
        1.5.3 诱导型启动子第20-22页
            1.5.3.1 光诱导表达启动子第21页
            1.5.3.2 温度诱导启动子第21页
            1.5.3.3 化学物质诱导启动子第21-22页
            1.5.3.4 创伤诱导表达启动子第22页
    1.6 启动子的研究方法第22-26页
        1.6.1 启动子的分离方法第22-24页
            1.6.1.1 启动子探针质粒载体筛选启动子第22-23页
            1.6.1.2 启动子陷阱法分离启动子第23页
            1.6.1.3 反向 PCR第23页
            1.6.1.4 连接介导 PCR第23页
            1.6.1.5 热不对称交错 PCR第23-24页
        1.6.2 启动子结构和功能的研究方法第24-26页
            1.6.2.1 启动子相关的数据库第24-25页
            1.6.2.2 启动子功能的分析方法第25-26页
    1.7 本研究的立题依据与研究意义第26-28页
2 材料与方法第28-38页
    2.1 材料与试剂第28-29页
        2.1.1 植物材料第28页
        2.1.2 菌株与质粒第28页
        2.1.3 主要试剂第28页
        2.1.4 主要仪器第28页
        2.1.5 试验用的引物第28-29页
    2.2 试验方法第29-38页
        2.2.1 棉花基因组 DNA 的提取第29-30页
        2.2.2 RCA1 基因启动子序列的扩增第30-31页
        2.2.3 凝胶电泳中 DNA 片段的回收第31页
        2.2.4 DNA 片段与克隆载体的连接第31-32页
        2.2.5 大肠杆菌感受态细胞的制备及转化第32页
        2.2.6 质粒 DNA 的提取第32-33页
        2.2.7 克隆片段的序列测定第33页
        2.2.8 RCA1 基因启动子序列分析第33页
        2.2.9 植物表达载体的构建第33-35页
        2.2.10 农杆菌感受态细胞的制备及转化第35-36页
            2.2.10.1 农杆菌感受态细胞的制备第35页
            2.2.10.2 表达载体转化农杆菌(冻融法)第35-36页
        2.2.11 拟南芥的遗传转化及转基因植株的鉴定第36-38页
            2.2.11.1 拟南芥植株的培养第36页
            2.2.11.2 拟南芥的遗传转化第36页
            2.2.11.3 抗性植株的筛选第36-37页
            2.2.11.4 拟南芥基因组 DNA 的提取第37页
            2.2.11.5 转基因植株的 GUS 组织化学染色分析第37-38页
3 结果与分析第38-50页
    3.1 DNA 提取的质量检测第38页
    3.2 RCA1 基因启动子片段的克隆第38-39页
    3.3 RCA1 基因启动子片段的序列分析第39-45页
        3.3.1 RCA11 启动子的序列分析第40-41页
        3.3.2 RCA12 启动子的序列分析第41-45页
    3.4 植物表达载体构建第45-47页
    3.5 转基因拟南芥的获得第47-48页
    3.6 启动子的活性分析第48-50页
4 讨论第50-53页
    4.1 棉花 DNA 的提取第50页
    4.2 RCA1 基因启动子的的扩增第50页
    4.3 RCA1 基因启动子的序列分析第50-52页
    4.4 RCA11 启动子的活性分析第52页
    4.5 进一步研究设想第52-53页
5 结论第53-54页
参考文献第54-62页
附录第62-67页
致谢第67-68页
攻读学位期间发表论文情况第68页

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