符号说明 | 第4-8页 |
摘要 | 第8-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
1 前言 | 第11-28页 |
1.1 Rubisco 活化酶的发现 | 第11-12页 |
1.2 Rubisco 活化酶的分子结构与功能 | 第12-15页 |
1.2.1 Rubisco 活化酶的分子结构 | 第12-13页 |
1.2.2 Rubisco 活化酶的功能 | 第13-15页 |
1.2.2.1 Rubisco 活化酶对 Rubisco 的活化作用 | 第13-14页 |
1.2.2.2 其他功能 | 第14-15页 |
1.3 Rubisco 活化酶的表达特性研究 | 第15-16页 |
1.4 启动子的结构特点 | 第16-17页 |
1.4.1 TATA box | 第16页 |
1.4.2 转录起始子 | 第16页 |
1.4.3 CAAT box | 第16-17页 |
1.4.4 GC box | 第17页 |
1.4.5 特有的上游元件 | 第17页 |
1.5 启动子的类型 | 第17-22页 |
1.5.1 组成型启动子 | 第18-19页 |
1.5.1.1 CaMV35S 启动子 | 第18页 |
1.5.1.2 泛素蛋白基因启动子 | 第18-19页 |
1.5.2 组织特异性启动子 | 第19-20页 |
1.5.2.1 种子特异性启动子 | 第19页 |
1.5.2.2 根特异性启动子 | 第19页 |
1.5.2.3 叶片特异性启动子 | 第19-20页 |
1.5.2.4 花药特异性启动子 | 第20页 |
1.5.2.5 果实特异性表达启动子 | 第20页 |
1.5.2.6 维管束特异性表达启动子 | 第20页 |
1.5.3 诱导型启动子 | 第20-22页 |
1.5.3.1 光诱导表达启动子 | 第21页 |
1.5.3.2 温度诱导启动子 | 第21页 |
1.5.3.3 化学物质诱导启动子 | 第21-22页 |
1.5.3.4 创伤诱导表达启动子 | 第22页 |
1.6 启动子的研究方法 | 第22-26页 |
1.6.1 启动子的分离方法 | 第22-24页 |
1.6.1.1 启动子探针质粒载体筛选启动子 | 第22-23页 |
1.6.1.2 启动子陷阱法分离启动子 | 第23页 |
1.6.1.3 反向 PCR | 第23页 |
1.6.1.4 连接介导 PCR | 第23页 |
1.6.1.5 热不对称交错 PCR | 第23-24页 |
1.6.2 启动子结构和功能的研究方法 | 第24-26页 |
1.6.2.1 启动子相关的数据库 | 第24-25页 |
1.6.2.2 启动子功能的分析方法 | 第25-26页 |
1.7 本研究的立题依据与研究意义 | 第26-28页 |
2 材料与方法 | 第28-38页 |
2.1 材料与试剂 | 第28-29页 |
2.1.1 植物材料 | 第28页 |
2.1.2 菌株与质粒 | 第28页 |
2.1.3 主要试剂 | 第28页 |
2.1.4 主要仪器 | 第28页 |
2.1.5 试验用的引物 | 第28-29页 |
2.2 试验方法 | 第29-38页 |
2.2.1 棉花基因组 DNA 的提取 | 第29-30页 |
2.2.2 RCA1 基因启动子序列的扩增 | 第30-31页 |
2.2.3 凝胶电泳中 DNA 片段的回收 | 第31页 |
2.2.4 DNA 片段与克隆载体的连接 | 第31-32页 |
2.2.5 大肠杆菌感受态细胞的制备及转化 | 第32页 |
2.2.6 质粒 DNA 的提取 | 第32-33页 |
2.2.7 克隆片段的序列测定 | 第33页 |
2.2.8 RCA1 基因启动子序列分析 | 第33页 |
2.2.9 植物表达载体的构建 | 第33-35页 |
2.2.10 农杆菌感受态细胞的制备及转化 | 第35-36页 |
2.2.10.1 农杆菌感受态细胞的制备 | 第35页 |
2.2.10.2 表达载体转化农杆菌(冻融法) | 第35-36页 |
2.2.11 拟南芥的遗传转化及转基因植株的鉴定 | 第36-38页 |
2.2.11.1 拟南芥植株的培养 | 第36页 |
2.2.11.2 拟南芥的遗传转化 | 第36页 |
2.2.11.3 抗性植株的筛选 | 第36-37页 |
2.2.11.4 拟南芥基因组 DNA 的提取 | 第37页 |
2.2.11.5 转基因植株的 GUS 组织化学染色分析 | 第37-38页 |
3 结果与分析 | 第38-50页 |
3.1 DNA 提取的质量检测 | 第38页 |
3.2 RCA1 基因启动子片段的克隆 | 第38-39页 |
3.3 RCA1 基因启动子片段的序列分析 | 第39-45页 |
3.3.1 RCA11 启动子的序列分析 | 第40-41页 |
3.3.2 RCA12 启动子的序列分析 | 第41-45页 |
3.4 植物表达载体构建 | 第45-47页 |
3.5 转基因拟南芥的获得 | 第47-48页 |
3.6 启动子的活性分析 | 第48-50页 |
4 讨论 | 第50-53页 |
4.1 棉花 DNA 的提取 | 第50页 |
4.2 RCA1 基因启动子的的扩增 | 第50页 |
4.3 RCA1 基因启动子的序列分析 | 第50-52页 |
4.4 RCA11 启动子的活性分析 | 第52页 |
4.5 进一步研究设想 | 第52-53页 |
5 结论 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-62页 |
附录 | 第62-67页 |
致谢 | 第67-68页 |
攻读学位期间发表论文情况 | 第68页 |