| 目录 | 第5-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-11页 |
| 1 文献综述 | 第12-22页 |
| 1.1 膝关节的概述 | 第12-13页 |
| 1.2 膝关节韧带的修复现状 | 第13-14页 |
| 1.2.1 保守治疗 | 第13页 |
| 1.2.2 手术治疗 | 第13-14页 |
| 1.3 支撑研究 | 第14-18页 |
| 1.3.1 细胞共培养技术 | 第14-15页 |
| 1.3.2 基质金属蛋白酶和赖氨酰氧化酶 | 第15-17页 |
| 1.3.3 前列腺素E_2 | 第17-18页 |
| 1.3.4 细胞应力加载系统 | 第18页 |
| 1.4 本课题的研究目的意义及内容 | 第18-22页 |
| 1.4.1 研究目的意义 | 第18-20页 |
| 1.4.2 研究内容 | 第20页 |
| 1.4.3 创新点 | 第20-22页 |
| 2 PGE_2对ACL成纤维细胞迁移能力的影响 | 第22-28页 |
| 2.1 引言 | 第22页 |
| 2.2 实验材料与试剂 | 第22-24页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第22页 |
| 2.2.2 主要实验仪器及耗材 | 第22-23页 |
| 2.2.3 主要试剂 | 第23页 |
| 2.2.4 试剂的配制 | 第23-24页 |
| 2.2.5 实验分组及处理 | 第24页 |
| 2.3 实验方法 | 第24-25页 |
| 2.3.1 细胞培养 | 第24页 |
| 2.3.2 滑膜细胞上清液的收集 | 第24-25页 |
| 2.3.3 细胞划痕愈合实验检测细胞的迁移 | 第25页 |
| 2.4 结果与分析 | 第25-26页 |
| 2.5 讨论 | 第26-28页 |
| 3 损伤滑膜细胞上清液作用下,应力损伤和PGE_2对前交叉韧带成纤维细胞中LOX家族及MMP-1,2,3基因表达的影响 | 第28-42页 |
| 3.1 引言 | 第28页 |
| 3.2 实验材料与试剂 | 第28-31页 |
| 3.2.1 实验细胞 | 第28-29页 |
| 3.2.2 主要实验仪器及耗材 | 第29页 |
| 3.2.3 主要试剂 | 第29-30页 |
| 3.2.4 试剂的配制 | 第30页 |
| 3.2.5 实验分组及处理 | 第30-31页 |
| 3.3 实验方法 | 第31-35页 |
| 3.3.1 细胞培养 | 第31页 |
| 3.3.2 滑膜细胞上清液的收集 | 第31页 |
| 3.3.3 细胞总RNA提取,定量和反转录 | 第31-33页 |
| 3.3.4 Real-time PCR法检测损伤滑膜细胞上清液作用下,应力损伤和PGE_2对前交叉韧带成纤维细胞中LOX家族及MMP-1,2,3基因表达的影响 | 第33-35页 |
| 3.3.5 LOXs和MMP-1,2,3基因表达量的相对定量分析 | 第35页 |
| 3.4 结果与分析 | 第35-40页 |
| 3.4.1 损伤滑膜细胞上清液作用下,应力损伤和PGE_2对前交叉韧带成纤维细胞中MMP-1,2,3基因表达的影响 | 第35-38页 |
| 3.4.2 损伤滑膜细胞上清液作用下,应力损伤和PGE_2对前交叉韧带成纤维细胞中LOX家族基因表达的影响 | 第38-40页 |
| 3.5 讨论 | 第40-42页 |
| 4 不同处理滑膜细胞上清液与PGE_2对ACL成纤维细胞中MMP-2活性的影响 | 第42-50页 |
| 4.1 引言 | 第42页 |
| 4.2 实验材料与试剂 | 第42-45页 |
| 4.2.1 实验细胞 | 第42页 |
| 4.2.2 主要实验仪器及耗材 | 第42-43页 |
| 4.2.3 主要试剂 | 第43页 |
| 4.2.4 试剂的配制 | 第43-44页 |
| 4.2.5 实验分组及处理 | 第44-45页 |
| 4.3 实验方法 | 第45-47页 |
| 4.3.1 细胞培养 | 第45页 |
| 4.3.2 滑膜细胞上清液的收集 | 第45页 |
| 4.3.3 明胶酶谱 | 第45-47页 |
| 4.3.4 数据分析 | 第47页 |
| 4.4 结果与分析 | 第47-48页 |
| 4.5 讨论 | 第48-50页 |
| 5 动态共培养下前交叉韧带成纤维细胞活性及MMP-2蛋白表达 | 第50-58页 |
| 5.1 引言 | 第50页 |
| 5.2 实验材料与试剂 | 第50-52页 |
| 5.2.1 实验细胞 | 第50页 |
| 5.2.2 主要实验仪器及耗材 | 第50-51页 |
| 5.2.3 主要试剂 | 第51-52页 |
| 5.2.4 试剂的配制 | 第52页 |
| 5.2.5 实验分组及处理 | 第52页 |
| 5.3 实验方法 | 第52-53页 |
| 5.3.1 细胞培养 | 第52页 |
| 5.3.2 用6%周期性机械拉伸,体外体外模拟正常ACL的受力情况 | 第52-53页 |
| 5.3.3 明胶酶谱 | 第53页 |
| 5.3.4 用MTS法检测细胞活性 | 第53页 |
| 5.3.5 数据分析 | 第53页 |
| 5.4 结果与分析 | 第53-56页 |
| 5.4.1 ACL成纤维细胞形态结果 | 第53-54页 |
| 5.4.2 ACL成纤维细胞活性检测 | 第54-55页 |
| 5.4.3 明胶酶谱结果 | 第55-56页 |
| 5.5 讨论 | 第56-58页 |
| 6 结论与展望 | 第58-60页 |
| 6.1 主要结论 | 第58页 |
| 6.2 后续工作展望 | 第58-60页 |
| 参考文献 | 第60-64页 |
| 致谢 | 第64-66页 |
| 附录A：发表论著 | 第66-68页 |
| 在校期间发表的文章 | 第66页 |
| 在校期间受到基金项目支持 | 第66-68页 |
| 附录B：缩略语表 | 第68页 |
