| 摘要 | 第1-11页 |
| 缩略词表 | 第11-12页 |
| Abstract | 第12-13页 |
| 引言 | 第13-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-29页 |
| 前言 | 第14页 |
| 第一节 麻疯树概述 | 第14-21页 |
| ·麻疯树形态特征 | 第14页 |
| ·麻疯树生境及地理分布 | 第14-15页 |
| ·麻疯树化学成分 | 第15-18页 |
| ·麻疯树主要用途 | 第18-21页 |
| 第二节 佛波醇酯 | 第21-22页 |
| ·概述 | 第21页 |
| ·毒性与药理活性 | 第21-22页 |
| 第三节 佛波醇酯生物合成途径 | 第22-27页 |
| ·萜类合成途径——IPP生成 | 第22-24页 |
| ·法呢基焦磷酸合酶 | 第24-25页 |
| ·支路途径 | 第25-27页 |
| 第四节 麻疯树生物工程调控策略及前景 | 第27-29页 |
| 第二章 麻疯树佛波醇酯生物合成途径FPS基因的克隆与分析 | 第29-59页 |
| 引言 | 第29页 |
| 第一节 实验材料(为避免重复,还包括本文其他章节涉及的实验材料) | 第29-33页 |
| ·植物材料 | 第29页 |
| ·菌株和载体 | 第29页 |
| ·仪器和设备 | 第29-30页 |
| ·试剂盒及购买的试剂 | 第30-31页 |
| ·自配的主要标准试剂 | 第31-32页 |
| ·自配的其它试剂 | 第32-33页 |
| 第二节 实验方法与步骤 | 第33-49页 |
| ·麻疯树材料的准备 | 第33页 |
| ·麻疯树叶片总RNA的抽提与质量检测 | 第33-34页 |
| ·麻疯树叶片基因组DNA的提取 | 第34-35页 |
| ·从麻疯树总RNA合成第一链3’cDNA | 第35-36页 |
| ·JcFPS基因核心片段的获得 | 第36-38页 |
| ·麻疯树RACE-Ready 5’-cDNA的合成 | 第38-39页 |
| ·JcFPS的5’RACE | 第39-40页 |
| ·JcFPS全长cDNA的克隆 | 第40-41页 |
| ·本章涉及的DNA片段的回收、连接、克隆和测序 | 第41-44页 |
| ·生物信息学分析 | 第44-45页 |
| ·JcFPS的原核表达 | 第45-47页 |
| ·JcFPS原核功能验证 | 第47-49页 |
| 第三节 结果与讨论 | 第49-58页 |
| ·JcFPS cDNA的全长克隆和性质分析 | 第49页 |
| ·推导的JcFPS蛋白质序列的性质分析 | 第49-53页 |
| ·JcFPS蛋白的二级结构 | 第53页 |
| ·JcFPS蛋白的三级结构预测 | 第53-54页 |
| ·JcFPS蛋白的保守区预测 | 第54-55页 |
| ·JcFPS蛋白的跨膜分析 | 第55页 |
| ·JcFPS蛋白的原核表达 | 第55-58页 |
| ·JcFPS的原核功能验证 | 第58页 |
| 第四节 讨论与小结 | 第58-59页 |
| 第三章 麻疯树类胡萝卜素生物合成途径PSY基因的克隆与分析 | 第59-77页 |
| 引言 | 第59页 |
| 第一节 实验材料 | 第59页 |
| 第二节 实验方法与步骤 | 第59-65页 |
| ·麻疯树材料的准备 | 第59页 |
| ·麻疯树叶片总RNA的抽提、检测与浓度测定 | 第59页 |
| ·从麻疯树总RNA合成第一链3’-cDNA | 第59页 |
| ·JcPSY基因核心片段的获得 | 第59-62页 |
| ·麻疯树RACE-Ready 5’-cDNA的合成 | 第62页 |
| ·JcPSY的5’RACE | 第62-63页 |
| ·JcPSY全长cDNA的克隆 | 第63-64页 |
| ·JcPSY基因组全长的克隆 | 第64页 |
| ·本章涉及的DNA片段的回收、连接、克隆和测序 | 第64页 |
| ·生物信息学分析 | 第64页 |
| ·JcPSY的原核表达 | 第64-65页 |
| 第三节 结果与讨论 | 第65-76页 |
| ·JcPSY cDNA的全长克隆和性质分析 | 第65-66页 |
| ·推导的JcPSY蛋白质序列的性质分析 | 第66页 |
| ·JcPSY基因组序列 | 第66页 |
| ·JcPSY蛋白的叶绿体前导肽预测 | 第66-73页 |
| ·JcSQS蛋白的二级结构 | 第73页 |
| ·JcPSY蛋白的三级结构预测 | 第73-74页 |
| ·JcPSY蛋白的保守区预测 | 第74页 |
| ·JcPSY蛋白的跨膜分析 | 第74-75页 |
| ·JcPSY蛋白的原核表达 | 第75-76页 |
| 第四节 讨论与小结 | 第76-77页 |
| 第四章 麻疯树甾醇生物合成途径SQS基因的克隆与分析 | 第77-91页 |
| 引言 | 第77页 |
| 第一节 实验材料 | 第77页 |
| 第二节 实验方法与步骤 | 第77-82页 |
| ·麻疯树材料的准备 | 第77页 |
| ·麻疯树叶片总RNA的抽提、检测与浓度测定 | 第77页 |
| ·从麻疯树总RNA合成第一链3’-cDNA | 第77页 |
| ·JcSQS基因核心片段的获得 | 第77-79页 |
| ·麻疯树RACE-Ready 5’-cDNA的合成 | 第79-80页 |
| ·JcSQS的5’RACE | 第80-81页 |
| ·JcSQS全长cDNA的克隆 | 第81-82页 |
| 第三节 结果与讨论 | 第82-90页 |
| ·JcSQS cDNA的全长克隆和性质分析 | 第82页 |
| ·推导的JcSQS蛋白质序列的性质分析 | 第82-83页 |
| ·JcSQS蛋白的分子进化分析 | 第83-88页 |
| ·JcSQS蛋白的二级结构 | 第88页 |
| ·JcSQS蛋白的三级结构预测 | 第88-89页 |
| ·JcSQS蛋白的保守区预测 | 第89-90页 |
| ·JcSQS蛋白的跨膜分析 | 第90页 |
| 第四节 讨论与小结 | 第90-91页 |
| 第五章 麻疯树FPS、PSY、SQS基因表达与佛波醇酯含量分析 | 第91-97页 |
| 第一节 实验材料 | 第91页 |
| 第二节 实验方法与步骤 | 第91-93页 |
| ·麻疯树组织表达分析取材 | 第91页 |
| ·麻疯树叶片总RNA的抽提、检测与浓度测定 | 第91页 |
| ·麻疯树JcFPS、JcPSY、JcSQS基因表达分析 | 第91-92页 |
| ·麻疯树叶片脱落酸处理 | 第92-93页 |
| ·麻疯树材料佛波醇酯的提取 | 第93页 |
| ·佛波醇酯HPLC测定条件 | 第93页 |
| ·标准曲线绘制 | 第93页 |
| ·样品测定 | 第93页 |
| 第三节 结果与讨论 | 第93-96页 |
| ·各基因表达情况 | 第93页 |
| ·佛波醇酯标准曲线 | 第93-94页 |
| ·佛波醇酯在植物中的分布 | 第94页 |
| ·ABA对佛波醇酯的诱导作用 | 第94-96页 |
| 第四节 小结与讨论 | 第96-97页 |
| 参考文献 | 第97-101页 |
| 参考书 | 第101-102页 |
| 附录 | 第102-103页 |
| 本文创新点 | 第103-104页 |
| 论文发表 | 第104-105页 |
| 申请专利 | 第105-106页 |
| 致谢 | 第106-108页 |
