中文摘要 | 第9-11页 |
Abstract | 第11-13页 |
1 前言 | 第14-30页 |
1.1 昆虫诱导植物抗性综述 | 第14-15页 |
1.2 刺吸式口器昆虫取食诱导寄主防御反应间的差异 | 第15-16页 |
1.3 诱导防御在刺吸式口器昆虫种间竞争中的作用 | 第16-22页 |
1.4 B型烟粉虱诱导的寄主植物防御反应 | 第22-27页 |
1.5 组学技术和新一代测序技术的应用 | 第27-28页 |
1.6 立项依据和研究的目的意义 | 第28-30页 |
2 材料和方法 | 第30-46页 |
2.1 试验材料 | 第30页 |
2.2 测序样本制备及文库测序 | 第30-32页 |
2.3 转录组测序数据处理 | 第32-34页 |
2.4 目的抗蚜基因沉默及对烟蚜的防御反应测定 | 第34-37页 |
2.4.1 差异表达基因的荧光定量PCR验证 | 第34-35页 |
2.4.2 病毒诱导基因沉默技术 | 第35-37页 |
2.4.3 烟蚜生物活性测定 | 第37页 |
2.5 外源喷施SA、B型烟粉虱若虫诱导烟草对烟蚜防御差异测定 | 第37-38页 |
2.5.1 外源诱导方法 | 第37页 |
2.5.2 对烟蚜生物活性测定 | 第37-38页 |
2.6 NPR1沉默及对烟蚜的防御反应测定 | 第38-39页 |
2.6.1 NPR1表达特性定量测定 | 第38页 |
2.6.2 NPR1沉默载体构建 | 第38-39页 |
2.6.3 沉默植株生测方法 | 第39页 |
2.7 烟草防御酶活性测定 | 第39-40页 |
2.8 烟草NPR1亚细胞定位检测 | 第40-42页 |
2.8.1 NPR1绿色荧光蛋白融合表达载体构建 | 第40-41页 |
2.8.2 烟草叶片瞬时侵染与激光共聚焦观察方法 | 第41-42页 |
2.9 烟草抗氧化物质及ROS水平测定 | 第42-44页 |
2.10 Cat1沉默及外源注射CAT对烟蚜的防御反应测定 | 第44-45页 |
2.10.1 Cat1沉默载体构建 | 第44页 |
2.10.2 外源注射CAT的方法 | 第44-45页 |
2.10.3 PR-1,PR-2基因定量PCR | 第45页 |
2.11 数据处理 | 第45-46页 |
3 结果与分析 | 第46-74页 |
3.1 B型烟粉虱若虫为害后烟草整体转录测序质量评价及分析 | 第46-50页 |
3.1.1 样品总RNA检测结果 | 第46-47页 |
3.1.2 转录组测序原始数据的质量评估 | 第47-48页 |
3.1.3 测序数据比对统计 | 第48-49页 |
3.1.4 基因覆盖度分析 | 第49-50页 |
3.2 B型烟粉虱若虫为害烟草特异表达差异基因分析 | 第50-55页 |
3.2.1 B型烟粉虱若虫为害后烟草差异表达基因筛选 | 第50-51页 |
3.2.2 差异基因功能注释及代谢通路分析 | 第51-55页 |
3.3 B型烟粉虱若虫为害诱导的烟草抗蚜基因筛选和功能验证 | 第55-60页 |
3.3.1 备选抗蚜基因的筛选 | 第55-56页 |
3.3.2 备选目的基因的荧光定量PCR验证 | 第56-57页 |
3.3.3 沉默抗蚜目的基因对抗蚜活性的影响 | 第57-60页 |
3.4 NPR1与烟粉虱若虫诱导烟草抗蚜系统性差异的关系 | 第60-64页 |
3.4.1 B型烟粉虱若虫为害的烟草局部叶特异性抑制了SA下游对烟蚜的防御 | 第60-61页 |
3.4.2 B型烟粉虱若虫为害对不同叶位NPR1基因表达水平影响 | 第61页 |
3.4.3 沉默NPR1对B型烟粉虱若虫诱导烟草抗蚜活性的影响 | 第61-62页 |
3.4.4 B型烟粉虱若虫为害NPR1沉默植株后不同叶位防御酶活性变化 | 第62-63页 |
3.4.5 B型烟粉虱若虫为害烟草对不同叶位NPR1亚细胞定位影响 | 第63-64页 |
3.4.5.1 NPR1基因克隆及融合载体构建 | 第63页 |
3.4.5.2 B型烟粉虱若虫为害烟草后不同叶位NPR1亚细胞定位情况 | 第63-64页 |
3.5 B型烟粉虱若虫为害引起叶片氧化还原环境变化与抗蚜防御 | 第64-74页 |
3.5.1 B型烟粉虱取食及喷施水杨酸对不同叶位氧化还原环境影响 | 第64-69页 |
3.5.2 CAT与B型烟粉虱若虫诱导烟草抗蚜活性探究 | 第69-74页 |
4 讨论 | 第74-80页 |
4.1 B型烟粉虱为害诱导寄主转录组变化的特异性和研究的意义 | 第74-75页 |
4.2 B型烟粉虱为害诱导抗蚜防御基因分析 | 第75-76页 |
4.3 B型烟粉虱若虫为害后烟草不同叶位叶片抗蚜反应差异的原因分析 | 第76-80页 |
4.3.1 NPR1在B型烟粉虱诱导烟草抗蚜防御中的作用和机制 | 第76-77页 |
4.3.2 B型烟粉虱若虫为害烟草导致不同叶位的氧化还原状态和NPR1蛋白细胞定位改变的原因 | 第77-80页 |
5 结论 | 第80页 |
创新点 | 第80-81页 |
参考文献 | 第81-99页 |
英文缩略表 | 第99-101页 |
致谢 | 第101-102页 |
攻读学位期间发表论文情况 | 第102页 |