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烟粉虱MEAM1隐种诱导的烟草抗蚜防御基因筛选

中文摘要第9-11页
Abstract第11-13页
1 前言第14-30页
    1.1 昆虫诱导植物抗性综述第14-15页
    1.2 刺吸式口器昆虫取食诱导寄主防御反应间的差异第15-16页
    1.3 诱导防御在刺吸式口器昆虫种间竞争中的作用第16-22页
    1.4 B型烟粉虱诱导的寄主植物防御反应第22-27页
    1.5 组学技术和新一代测序技术的应用第27-28页
    1.6 立项依据和研究的目的意义第28-30页
2 材料和方法第30-46页
    2.1 试验材料第30页
    2.2 测序样本制备及文库测序第30-32页
    2.3 转录组测序数据处理第32-34页
    2.4 目的抗蚜基因沉默及对烟蚜的防御反应测定第34-37页
        2.4.1 差异表达基因的荧光定量PCR验证第34-35页
        2.4.2 病毒诱导基因沉默技术第35-37页
        2.4.3 烟蚜生物活性测定第37页
    2.5 外源喷施SA、B型烟粉虱若虫诱导烟草对烟蚜防御差异测定第37-38页
        2.5.1 外源诱导方法第37页
        2.5.2 对烟蚜生物活性测定第37-38页
    2.6 NPR1沉默及对烟蚜的防御反应测定第38-39页
        2.6.1 NPR1表达特性定量测定第38页
        2.6.2 NPR1沉默载体构建第38-39页
        2.6.3 沉默植株生测方法第39页
    2.7 烟草防御酶活性测定第39-40页
    2.8 烟草NPR1亚细胞定位检测第40-42页
        2.8.1 NPR1绿色荧光蛋白融合表达载体构建第40-41页
        2.8.2 烟草叶片瞬时侵染与激光共聚焦观察方法第41-42页
    2.9 烟草抗氧化物质及ROS水平测定第42-44页
    2.10 Cat1沉默及外源注射CAT对烟蚜的防御反应测定第44-45页
        2.10.1 Cat1沉默载体构建第44页
        2.10.2 外源注射CAT的方法第44-45页
        2.10.3 PR-1,PR-2基因定量PCR第45页
    2.11 数据处理第45-46页
3 结果与分析第46-74页
    3.1 B型烟粉虱若虫为害后烟草整体转录测序质量评价及分析第46-50页
        3.1.1 样品总RNA检测结果第46-47页
        3.1.2 转录组测序原始数据的质量评估第47-48页
        3.1.3 测序数据比对统计第48-49页
        3.1.4 基因覆盖度分析第49-50页
    3.2 B型烟粉虱若虫为害烟草特异表达差异基因分析第50-55页
        3.2.1 B型烟粉虱若虫为害后烟草差异表达基因筛选第50-51页
        3.2.2 差异基因功能注释及代谢通路分析第51-55页
    3.3 B型烟粉虱若虫为害诱导的烟草抗蚜基因筛选和功能验证第55-60页
        3.3.1 备选抗蚜基因的筛选第55-56页
        3.3.2 备选目的基因的荧光定量PCR验证第56-57页
        3.3.3 沉默抗蚜目的基因对抗蚜活性的影响第57-60页
    3.4 NPR1与烟粉虱若虫诱导烟草抗蚜系统性差异的关系第60-64页
        3.4.1 B型烟粉虱若虫为害的烟草局部叶特异性抑制了SA下游对烟蚜的防御第60-61页
        3.4.2 B型烟粉虱若虫为害对不同叶位NPR1基因表达水平影响第61页
        3.4.3 沉默NPR1对B型烟粉虱若虫诱导烟草抗蚜活性的影响第61-62页
        3.4.4 B型烟粉虱若虫为害NPR1沉默植株后不同叶位防御酶活性变化第62-63页
        3.4.5 B型烟粉虱若虫为害烟草对不同叶位NPR1亚细胞定位影响第63-64页
            3.4.5.1 NPR1基因克隆及融合载体构建第63页
            3.4.5.2 B型烟粉虱若虫为害烟草后不同叶位NPR1亚细胞定位情况第63-64页
    3.5 B型烟粉虱若虫为害引起叶片氧化还原环境变化与抗蚜防御第64-74页
        3.5.1 B型烟粉虱取食及喷施水杨酸对不同叶位氧化还原环境影响第64-69页
        3.5.2 CAT与B型烟粉虱若虫诱导烟草抗蚜活性探究第69-74页
4 讨论第74-80页
    4.1 B型烟粉虱为害诱导寄主转录组变化的特异性和研究的意义第74-75页
    4.2 B型烟粉虱为害诱导抗蚜防御基因分析第75-76页
    4.3 B型烟粉虱若虫为害后烟草不同叶位叶片抗蚜反应差异的原因分析第76-80页
        4.3.1 NPR1在B型烟粉虱诱导烟草抗蚜防御中的作用和机制第76-77页
        4.3.2 B型烟粉虱若虫为害烟草导致不同叶位的氧化还原状态和NPR1蛋白细胞定位改变的原因第77-80页
5 结论第80页
创新点第80-81页
参考文献第81-99页
英文缩略表第99-101页
致谢第101-102页
攻读学位期间发表论文情况第102页

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