摘要 | 第4-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
符号说明 | 第12-14页 |
第一章 前言 | 第14-21页 |
1.1 ESCs及其应用 | 第14-15页 |
1.2 Na(?)ve与Primed多能性 | 第15-16页 |
1.3 LIF通过JAK/STAT3信号通路诱导和维持Na(?)ve多能性 | 第16-19页 |
1.4 LIF/STAT3信号通路转录调控机制 | 第19-20页 |
1.5 LIF-STAT3-Gbx2 Axis下游调控机制研究现状 | 第20-21页 |
第二章 材料与方法 | 第21-49页 |
2.1 实验材料 | 第21-24页 |
2.1.1 材料 | 第21-24页 |
2.1.2 实验细胞株 | 第24页 |
2.2 实验方法 | 第24-49页 |
2.2.1 细胞的传代培养、冻存和复苏 | 第24-27页 |
2.2.2 Gbx2/Klf4基因过表达和敲低质粒的构建 | 第27-33页 |
2.2.3 稳定的过表达及敲低细胞系建立和鉴定 | 第33-39页 |
2.2.4 碱性磷酸酶染色 | 第39-40页 |
2.2.5 免疫荧光染色 | 第40-41页 |
2.2.6 RNA-Seq及数据分析 | 第41-42页 |
2.2.7 染色质免疫共沉淀(ChP) | 第42-43页 |
2.2.8 双荧光素酶报告系统分析 | 第43-45页 |
2.2.9 mESCs的分化实验 | 第45-46页 |
2.2.10 mEpiSCs的重编程实验 | 第46-47页 |
2.2.11 Co-IP实验 | 第47-49页 |
第三章 实验结果 | 第49-60页 |
3.1 46C mESCs中筛选鉴定Gbx2的直接下游靶基因 | 第49-51页 |
3.2 mESCs中,Klf4是Gbx2的下游靶基因 | 第51-55页 |
3.2.1 Gbx2激活下游基因Klf4的表达 | 第51-53页 |
3.2.2 Klf4是Gbx2的直接靶基因 | 第53-55页 |
3.3 Klf4介导Gbx2维持mESC naive多能性的功能 | 第55-57页 |
3.4 Klf4对Gbx2促进mEpiSCs重编程为Na(?)ve多能性状态的能力至关重要 | 第57-60页 |
第四章 讨论及展望 | 第60-63页 |
参考文献 | 第63-71页 |
附录 (附图、附表) | 第71-77页 |
致谢 | 第77-78页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第78页 |