| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 引言 | 第8页 |
| 1 背景概述 | 第8-12页 |
| 1.1 辽宁绒山羊 | 第8页 |
| 1.2 BMP及BMP信号通路 | 第8-9页 |
| 1.3 PLP基因和PLP2基因及其研究进展 | 第9-10页 |
| 1.4 研究的目的及意义 | 第10-12页 |
| 2 PLP2基因的序列分析 | 第12-24页 |
| 2.1 PLP2全长序列测定 | 第12-13页 |
| 2.1.1 primer walking测序方法 | 第12页 |
| 2.1.2 结果 | 第12-13页 |
| 2.2 PLP2生物信息学分析 | 第13-24页 |
| 2.2.1 方法 | 第13-14页 |
| 2.2.2 结果 | 第14-22页 |
| 2.2.3 讨论 | 第22-24页 |
| 3 PLP2基因在辽宁绒山羊毛囊不同生长时期的表达研究 | 第24-41页 |
| 3.1 实验材料 | 第24页 |
| 3.2 试剂及仪器 | 第24-25页 |
| 3.2.1 实验试剂 | 第24页 |
| 3.2.2 实验仪器 | 第24-25页 |
| 3.3 方法 | 第25-32页 |
| 3.3.1 初、次级毛囊的分离 | 第25页 |
| 3.3.2 初、次级毛囊总RNA提取 | 第25-26页 |
| 3.3.3 总RNA的检测 | 第26页 |
| 3.3.4 反转录PCR反应 | 第26-27页 |
| 3.3.5 半定量RT-PCR检测 | 第27-29页 |
| 3.3.6 荧光定量PCR反应 | 第29-30页 |
| 3.3.7 原位杂交 | 第30-32页 |
| 3.4 实验结果 | 第32-39页 |
| 3.4.1 RNA提取 | 第32-33页 |
| 3.4.2 RT-PCR | 第33-36页 |
| 3.4.3 实时荧光定量PCR实验结果 | 第36-38页 |
| 3.4.4 原位杂交实验结果 | 第38-39页 |
| 3.5 讨论 | 第39-41页 |
| 4 Noggin基因干扰后PLP2基因的表达检测 | 第41-50页 |
| 4.1 实验材料及主要实验仪器 | 第41-42页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第41页 |
| 4.1.2 主要实验仪器 | 第41-42页 |
| 4.2 实验步骤 | 第42-44页 |
| 4.2.1 细胞培养 | 第42页 |
| 4.2.2 Noggin基因干扰病毒及阴性对照腺病毒感染目的细胞 | 第42页 |
| 4.2.3 总RNA的抽提 | 第42页 |
| 4.2.4 RNA反转录成cDNA | 第42-43页 |
| 4.2.5 qPCR引物设计 | 第43页 |
| 4.2.6 qPCR实验 | 第43-44页 |
| 4.3 实验结果 | 第44-49页 |
| 4.3.1 病毒感染前后细胞图片 | 第44-45页 |
| 4.3.2 预实验qPCR产物电泳图 | 第45-46页 |
| 4.3.3 正式实验qPCR产物电泳图 | 第46-47页 |
| 4.3.4 qPCR数据分析 | 第47-49页 |
| 4.4 讨论 | 第49-50页 |
| 结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-56页 |
| 附录A 原位杂交实验试剂配制方法 | 第56-57页 |
| 附录B 不同时期 β-actin、PLP2基因的扩增曲线和溶解曲线图 | 第57-61页 |
| 附录C Noggin基因干扰后PLP2基因及内参基因的PCR扩增曲线和溶解曲线 | 第61-62页 |
| 攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第62-63页 |
| 致谢 | 第63页 |
