| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 第1章 文献综述 | 第11-27页 |
| 1.1 植物热激蛋白 | 第11-13页 |
| 1.1.1 热激蛋白研究的历史及现状 | 第11-12页 |
| 1.1.2 热激蛋白的分类及功能 | 第12页 |
| 1.1.3 蜡梅热激蛋白基因 | 第12-13页 |
| 1.2 植物启动子 | 第13-27页 |
| 1.2.1 启动子的概念、结构特征及其分类 | 第13-17页 |
| 1.2.2 植物基因启动子的克隆方法 | 第17-24页 |
| 1.2.3 启动子功能的研究方法 | 第24-27页 |
| 第2章 引言 | 第27-29页 |
| 第3章 实验材料与方法 | 第29-43页 |
| 3.1 实验材料 | 第29-32页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第29页 |
| 3.1.2 菌株和载体 | 第29页 |
| 3.1.3 购买的主要试剂 | 第29页 |
| 3.1.4 主要设备 | 第29页 |
| 3.1.5 自配试剂 | 第29-32页 |
| 3.2 实验方法 | 第32-43页 |
| 3.2.1 CTAB法提取和纯化蜡梅DNA | 第32-33页 |
| 3.2.2 hiTAIL-PCR法扩增蜡梅热激蛋白基因CpHSP1上游启动子序列 | 第33-36页 |
| 3.2.3 CpHSP1启动子的元件分析 | 第36页 |
| 3.2.4 CpH5P1启动子植物达载体的构建 | 第36-38页 |
| 3.2.5 农杆菌介导法转化烟草 | 第38-40页 |
| 3.2.6 CpHSP1pro启动子在转基因烟草不同组织中的活性分析 | 第40-43页 |
| 第4章 实验结果与分析 | 第43-55页 |
| 4.1 蜡梅CpHSP1基因启动子序列克隆 | 第43-45页 |
| 4.1.1 蜡梅基因组DNA提取和纯化 | 第43页 |
| 4.1.2 hiTAIL-PCR法扩增得到启动子序列 | 第43-45页 |
| 4.2 CPHSP1基因启动子的元件分析 | 第45-48页 |
| 4.3 植物表达载体的构建 | 第48-52页 |
| 4.3.1 克隆载体pMD-CpHSP1pro的构建 | 第48-49页 |
| 4.3.2 植物表达载体pCAMBIA-1300-221-CpHSP1pro的构建 | 第49-51页 |
| 4.3.3 含植物表达载体pCAMBIA-1300-221-CpHSP1pro质粒农杆菌GV3101的获得 | 第51-52页 |
| 4.4 CPHSP1PRO启动子活性初步分析 | 第52-55页 |
| 4.4.1 CpHSP1pro启动子在烟草愈伤组织中的启动活性 | 第52页 |
| 4.4.2 CpHSP1pro启动子在转基因烟草不同组织中的活性分析 | 第52-55页 |
| 第5章 讨论 | 第55-57页 |
| 5.1 HITAIL-PCR在克隆侧翼未知序列中的应用 | 第55页 |
| 5.2 CPHSP1PRO启动子的活性特异性 | 第55页 |
| 5.3 下一步的研究设想 | 第55-57页 |
| 第6章 结论 | 第57-59页 |
| 参考文献 | 第59-65页 |
| 缩略词表 | 第65-67页 |
| 致谢 | 第67-69页 |
| 在校期间发表论文和参与项目 | 第69页 |
