摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4页 |
第1章 绪论 | 第7-17页 |
1.1 课题来源 | 第7页 |
1.2 研究目的和意义 | 第7-8页 |
1.3 课题相关研究的背景及成果的发展概况 | 第8-16页 |
1.3.1 生物农药的研究现状 | 第8-10页 |
1.3.2 毛壳菌的生物防治机理 | 第10-12页 |
1.3.3 毕赤酵母表达系统 | 第12-14页 |
1.3.4 β-葡聚糖和β-葡聚糖酶 | 第14-16页 |
1.4 技术路线图 | 第16-17页 |
第2章 实验材料与方法 | 第17-32页 |
2.1 实验材料 | 第17-19页 |
2.1.1 实验相关菌种及载体 | 第17页 |
2.1.2 实验设备和仪器 | 第17页 |
2.1.3 实验相关药品及引物 | 第17-19页 |
2.1.4 实验相关培养基配方 | 第19页 |
2.2 实验方法 | 第19-32页 |
2.2.1 研究内容 | 第19页 |
2.2.2 角毛壳葡聚糖酶基因cgc的寻找 | 第19-22页 |
2.2.3 角毛壳葡聚糖酶基因cgc的生物信息学分析 | 第22-23页 |
2.2.4 重组质粒pPIC9K-cgc的构建及鉴定 | 第23-25页 |
2.2.5 pPIC9K-cgc电转化毕赤酵母GS115 及转化子筛选 | 第25-29页 |
2.2.6 转化子的诱导表达与筛选与粗酶液制备 | 第29-30页 |
2.2.7 重组葡聚酶蛋白CGC的酶学性质测定 | 第30-31页 |
2.2.8 重组蛋白酶CGC对孢子萌发率的影响 | 第31-32页 |
第3章 实验结果 | 第32-45页 |
3.1 角毛壳葡聚糖酶基因的获得 | 第32-33页 |
3.2 生物信息学分析 | 第33-35页 |
3.2.1 葡聚糖酶cgc基因的内含子寻找 | 第33-34页 |
3.2.2 葡聚糖酶蛋白CGC基本信息 | 第34-35页 |
3.2.3 葡聚糖蛋白CGC的功能分析 | 第35页 |
3.3 重组质粒pPIC9K-cgc的构建 | 第35-36页 |
3.4 重组质粒电转化毕赤酵母GS115 及转化子的筛选 | 第36-39页 |
3.5 转化子的诱导表达及粗酶液的制备 | 第39-40页 |
3.6 重组蛋白酶CGC的酶学性质测定 | 第40-42页 |
3.6.1 葡萄糖标准曲线的测定 | 第40页 |
3.6.2 重组蛋白酶CGC最适温度的测定 | 第40-41页 |
3.6.3 重组蛋白酶CGC最适pH的测定 | 第41-42页 |
3.6.4 重组蛋白酶CGC的酶活力 | 第42页 |
3.7 重组蛋白酶CGC对孢子萌发率的影响 | 第42-43页 |
3.8 本章小结 | 第43-45页 |
结论 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-51页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第51-53页 |
致谢 | 第53页 |