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MicroRNA-190对人大肠癌细胞中DPC4基因转录后调控作用的初步研究

中文摘要第4-6页
英文摘要第6-7页
符号说明第10-11页
1 前言第11-14页
2 材料与方法第14-28页
    2.1 实验材料第14-15页
        2.1.1 细胞系第14页
        2.1.2 主要试剂第14-15页
        2.1.3 主要仪器设备第15页
    2.2 实验方法第15-28页
        2.2.1 细胞培养第15-16页
        2.2.2 贴壁细胞总RNA的提取第16页
        2.2.3 总RNA的鉴定第16-17页
        2.2.4 cDNA第一链的生成第17-19页
        2.2.5 实时荧光定量PCR第19-20页
        2.2.6 Western-blot实验第20-22页
        2.2.7 转染第22-23页
        2.2.8 双荧光素酶报告基因实验第23-27页
        2.2.9 统计学处理第27-28页
3 结果及分析第28-38页
    3.1 靶基因的生物信息学方法分析第28-30页
        3.1.1 TargetScan查询第28-29页
        3.1.2 microRNA.org查询第29页
        3.1.3 mIRecords软件分析第29-30页
    3.2 五种不同大肠癌细胞系miR-190和DPC4的表达第30-33页
        3.2.1 RNA提取以及质量检测第30-31页
        3.2.2 Real-time PCR检测miR-190和DPC4 mRNA的表达第31-33页
        3.2.3 Western-blot检测DPC4蛋白的表达第33页
    3.3 Mimics和inhibitor细胞转染实验第33-36页
        3.3.1 Real-time PCR检测miR-190、DPC4 mRNA表达的改变第34-35页
        3.3.2 Western-blot检测DPC4蛋白表达的改变第35-36页
    3.4 靶基因的双荧光素酶报告基因实验验证第36-38页
4 讨论第38-41页
5 结论第41-42页
参考文献第42-44页
综述第44-50页
    参考文献第48-50页
致谢第50页

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