| 中文摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 前言 | 第8-12页 |
| 第一部分 SPATA5L1重组过表达质粒的构建、转染及稳转株筛选 | 第12-23页 |
| 一、实验材料与仪器 | 第12-13页 |
| 1.1 主要材料 | 第12页 |
| 1.2 主要试剂 | 第12-13页 |
| 1.3 主要仪器 | 第13页 |
| 二、实验过程 | 第13-18页 |
| 2.1 细胞准备 | 第13-14页 |
| 2.2 细菌准备 | 第14页 |
| 2.3 SPATA5L1全基因序列的合成 | 第14-15页 |
| 2.4 目的基因SPATA5L1克隆到载体pEX-1中 | 第15-17页 |
| 2.5 G418最佳作用浓度 | 第17页 |
| 2.6 细胞转染 | 第17页 |
| 2.7 稳定转染细胞株中SPATA5L1蛋白表达的鉴定 | 第17-18页 |
| 三、结果 | 第18-21页 |
| 3.1 鉴定PCR扩增产物大小 | 第18-19页 |
| 3.2 重组过表达质粒酶切鉴定 | 第19页 |
| 3.3 菌液测序 | 第19-20页 |
| 3.4 G418最佳作用浓度 | 第20-21页 |
| 3.5 转染效率 | 第21页 |
| 3.6 稳定转染细胞株的建立 | 第21页 |
| 3.7 KB细胞及稳定转染细胞株中SPATA5L1蛋白表达的鉴定 | 第21页 |
| 四、讨论 | 第21-23页 |
| 第二部分 SPATA5L1基因对KB细胞增殖与迁移的影响 | 第23-30页 |
| 一、实验材料与仪器 | 第23-24页 |
| 1.1 细胞系 | 第23页 |
| 1.2 主要试剂 | 第23页 |
| 1.3 主要材料 | 第23页 |
| 1.4 主要设备 | 第23-24页 |
| 二、实验方法 | 第24-25页 |
| 2.1 细胞准备 | 第24页 |
| 2.2 SPATA5L1基因对细胞形态的影响 | 第24页 |
| 2.3 SPATA5L1基因对细胞增殖的影响 | 第24-25页 |
| 2.4 SPATA5L1基因对细胞迁移能力的影响 | 第25页 |
| 三、实验结果 | 第25-29页 |
| 3.1 SPATA5L1基因对细胞形态的影响 | 第25-26页 |
| 3.2 SPATA5L1基因对细胞增殖的影响 | 第26-27页 |
| 3.3 SPATA5L1基因对细胞迁移能力的影响 | 第27-29页 |
| 四、讨论 | 第29-30页 |
| 第三部分 SPATA5L1基因对KB细胞E2F1、β-catenin、c-myc基因表达量的影响 | 第30-37页 |
| 一、实验材料 | 第30页 |
| 1.1 细胞系 | 第30页 |
| 1.2 主要试剂 | 第30页 |
| 1.3 主要仪器 | 第30页 |
| 二、实验方法 | 第30-32页 |
| 2.1 细胞准备 | 第30-31页 |
| 2.2 Real-time PCR | 第31-32页 |
| 三、实验结果 | 第32-34页 |
| 3.1 目的基因的特异性表达验证 | 第32-34页 |
| 3.2 目的基因的mRNA表达水平 | 第34页 |
| 四、讨论 | 第34-37页 |
| 第四部分 SPATA5L1基因对KB细胞内E2F1、β-catenin、c-myc蛋白含量的影响 | 第37-42页 |
| 一、实验材料 | 第37-38页 |
| 1.1 细胞系 | 第37页 |
| 1.2 主要试剂 | 第37-38页 |
| 1.3 主要仪器设备 | 第38页 |
| 二、实验方法 | 第38-39页 |
| 2.1 细胞准备 | 第38页 |
| 2.2 Western blot检测细胞内蛋白含量 | 第38-39页 |
| 三、实验结果 | 第39-41页 |
| 3.1 细胞内E2F1、β-catenin、c-myc蛋白含量 | 第39-41页 |
| 四、讨论 | 第41-42页 |
| 结论 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-45页 |
| 综述 | 第45-75页 |
| 参考文献 | 第61-75页 |
| 致谢 | 第75页 |
