英文缩略词 | 第8-9页 |
中文摘要 | 第9-11页 |
ABSTRACT | 第11-13页 |
前言 | 第14-16页 |
材料与方法 | 第16-42页 |
一、实验材料 | 第16-28页 |
1. 细胞培养 | 第16页 |
2. 免疫组化标本 | 第16-19页 |
3. 动物 | 第19页 |
4. 主要试剂 | 第19-23页 |
5. 主要仪器与设备 | 第23-24页 |
6. 计算机分析软件 | 第24页 |
7. 主要自配试剂及其配方 | 第24-28页 |
二、实验方法 | 第28-42页 |
1. 细胞培养及抗体纯化 | 第28-29页 |
2. ELISA酶联免疫吸附试验 | 第29-30页 |
3. 细胞免疫荧光 | 第30-31页 |
4. 流式细胞分选 | 第31-32页 |
5. RNA抽提及Real-Time PCR | 第32-33页 |
6. 胃癌干细胞亚群体外生物学特征的分析 | 第33-34页 |
7. ENO1过表达载体的构建及提取 | 第34-35页 |
8. 稳定干扰ENO1细胞的构建 | 第35页 |
9. 细胞转染pcDNA3.1-ENO1质粒和对照质粒 | 第35-36页 |
10. 胃癌干细胞亚群体内致瘤能力的分析 | 第36页 |
11. 基因表达谱芯片及相关分析 | 第36-38页 |
12. ENO1单抗对胃癌干细胞亚群生物学功能影响的分析 | 第38-39页 |
13. 动物实验 | 第39页 |
14. Western-Blotting实验 | 第39-40页 |
15. 免疫组织化学实验 | 第40-41页 |
16. 统计学分析 | 第41-42页 |
第一部分 人胃癌干细胞亚群的生物学特征 | 第42-59页 |
一、实验结果 | 第42-54页 |
(一) 人胃癌细干细胞亚群的分离 | 第42-44页 |
1. 人胃癌细胞系的spheroid培养 | 第42-43页 |
2. 人胃癌干细胞标志物的筛选 | 第43-44页 |
3. 人胃癌干细胞亚群CD44和CD90的分离 | 第44页 |
(二) 人胃癌干细胞亚群CD44和CD90的干性特征鉴定 | 第44-48页 |
1. 人胃癌干细胞亚群CD44和CD90高表达干性相关基因 | 第44-45页 |
2. 人胃癌干细胞亚群CD44和CD90自我更新能力分析 | 第45-46页 |
3. 人胃癌干细胞亚群CD44和CD90裸鼠致瘤能力分析 | 第46-48页 |
(三) 人胃癌干细胞亚群CD44和CD90的功能差异表达 | 第48-54页 |
1. 人胃癌干细胞亚群CD44和CD90侵袭能力分析 | 第48页 |
2. 人胃癌干细胞亚群CD44和CD90增殖能力分析 | 第48-49页 |
3. 人胃癌干细胞亚群CD44和CD90细胞周期分析 | 第49-50页 |
4. 人胃癌干细胞亚群CD44和CD90体内的增殖及其转移能力分析 | 第50-51页 |
5. 人胃癌干细胞亚群CD44侵袭转移特性与EMT表型关联 | 第51-52页 |
6. 人胃癌干细胞亚群CD90增殖能力与细胞周期蛋白表达的关联 | 第52-54页 |
二、讨论 | 第54-58页 |
三、小结 | 第58-59页 |
第二部分 人胃癌干细胞亚群差异基因检测与分析 | 第59-69页 |
一、实验结果 | 第59-67页 |
(一) 人胃癌干细胞亚群CD44的基因表达谱芯片分析 | 第59-61页 |
1. 人胃癌干细胞亚群CD44差异表达基因信号通路的分析 | 第59-60页 |
2. 人胃癌干细胞亚群CD44差异表达基因的分析 | 第60-61页 |
(二) 人胃癌干细胞亚群CD90的基因表达谱芯片分析 | 第61-64页 |
1. 人胃癌干细胞亚群CD90差异表达基因信号通路的分析 | 第61-62页 |
2. 人胃癌干细胞亚群CD90差异表达基因的分析 | 第62-64页 |
(三) 人胃癌干细胞亚群CD44和CD90的基因表达谱芯片分析 | 第64-65页 |
1. 人胃癌干细胞亚群CD44和CD90差异表达基因信号通路的分析 | 第64页 |
2. 人胃癌干细胞亚群CD44和CD90差异表达基因的分析 | 第64-65页 |
(四) 人胃癌干细胞亚群CD44和CD90的基因表达谱芯片验证 | 第65-67页 |
二、讨论 | 第67-68页 |
三、小结 | 第68-69页 |
第三部分 ENO1对胃癌干细胞亚群生物学功能的作用及其分子机制 | 第69-89页 |
一、实验结果 | 第69-83页 |
(一) ENO1在人胃癌干细胞亚群干性特征的研究 | 第69-74页 |
1. ENO1在人胃癌干细胞亚群CD44阳性细胞中的表达 | 第69-70页 |
2. ENO1对人胃癌干细胞亚群CD44阳性细胞干性基因表达的影响 | 第70-72页 |
3. ENO1对人胃癌干细胞亚群CD44阳性细胞自我更新的影响 | 第72-73页 |
4. ENO1对人胃癌干细胞亚群CD44阳性细胞成瘤能力的影响 | 第73页 |
5. ENO1对人胃癌干细胞亚群CD44阳性细胞侵袭转移的影响 | 第73-74页 |
(二) 单抗21A3干预人胃癌干细胞亚群生物学功能的研究 | 第74-77页 |
1. 单抗21A3对人胃癌干细胞亚群CD44阳性细胞自我更新能力的影响 | 第74-76页 |
2. 单抗21A3对人胃癌干细胞亚群CD44阳性细胞侵袭转移的影响 | 第76-77页 |
(三) ENO1在调节人胃癌干细胞亚群信号通路的研究 | 第77-80页 |
1. ENO1在人胃癌干细胞亚群CD44阳性细胞中调节侵袭和转移的作用机制 | 第77-78页 |
2. ENO1在人胃癌干细胞亚群CD44阳性细胞中调节细胞周期的作用机制 | 第78页 |
3. ENO1在人胃癌干细胞亚群CD44阳性细胞中PI3K/AKT通路的作用机制 | 第78-80页 |
(四) ENO1表达水平与胃癌临床病理参数及预后的关系 | 第80-83页 |
1. 人胃癌组织细胞中ENO1的表达水平 | 第80-81页 |
2. ENO1与胃癌分期、分级、转移和预后相关性的分析 | 第81-83页 |
二、讨论 | 第83-88页 |
三、小结 | 第88-89页 |
全文总结 | 第89-90页 |
参考文献 | 第90-94页 |
论文综述 | 第94-102页 |
参考文献 | 第99-102页 |
致谢 | 第102-103页 |
附录 | 第103-104页 |
个人简历 | 第104-105页 |
基金资助情况 | 第105-106页 |