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胃癌干细胞亚群生物学特性及分子基础研究

英文缩略词第8-9页
中文摘要第9-11页
ABSTRACT第11-13页
前言第14-16页
材料与方法第16-42页
    一、实验材料第16-28页
        1. 细胞培养第16页
        2. 免疫组化标本第16-19页
        3. 动物第19页
        4. 主要试剂第19-23页
        5. 主要仪器与设备第23-24页
        6. 计算机分析软件第24页
        7. 主要自配试剂及其配方第24-28页
    二、实验方法第28-42页
        1. 细胞培养及抗体纯化第28-29页
        2. ELISA酶联免疫吸附试验第29-30页
        3. 细胞免疫荧光第30-31页
        4. 流式细胞分选第31-32页
        5. RNA抽提及Real-Time PCR第32-33页
        6. 胃癌干细胞亚群体外生物学特征的分析第33-34页
        7. ENO1过表达载体的构建及提取第34-35页
        8. 稳定干扰ENO1细胞的构建第35页
        9. 细胞转染pcDNA3.1-ENO1质粒和对照质粒第35-36页
        10. 胃癌干细胞亚群体内致瘤能力的分析第36页
        11. 基因表达谱芯片及相关分析第36-38页
        12. ENO1单抗对胃癌干细胞亚群生物学功能影响的分析第38-39页
        13. 动物实验第39页
        14. Western-Blotting实验第39-40页
        15. 免疫组织化学实验第40-41页
        16. 统计学分析第41-42页
第一部分 人胃癌干细胞亚群的生物学特征第42-59页
    一、实验结果第42-54页
        (一) 人胃癌细干细胞亚群的分离第42-44页
            1. 人胃癌细胞系的spheroid培养第42-43页
            2. 人胃癌干细胞标志物的筛选第43-44页
            3. 人胃癌干细胞亚群CD44和CD90的分离第44页
        (二) 人胃癌干细胞亚群CD44和CD90的干性特征鉴定第44-48页
            1. 人胃癌干细胞亚群CD44和CD90高表达干性相关基因第44-45页
            2. 人胃癌干细胞亚群CD44和CD90自我更新能力分析第45-46页
            3. 人胃癌干细胞亚群CD44和CD90裸鼠致瘤能力分析第46-48页
        (三) 人胃癌干细胞亚群CD44和CD90的功能差异表达第48-54页
            1. 人胃癌干细胞亚群CD44和CD90侵袭能力分析第48页
            2. 人胃癌干细胞亚群CD44和CD90增殖能力分析第48-49页
            3. 人胃癌干细胞亚群CD44和CD90细胞周期分析第49-50页
            4. 人胃癌干细胞亚群CD44和CD90体内的增殖及其转移能力分析第50-51页
            5. 人胃癌干细胞亚群CD44侵袭转移特性与EMT表型关联第51-52页
            6. 人胃癌干细胞亚群CD90增殖能力与细胞周期蛋白表达的关联第52-54页
    二、讨论第54-58页
    三、小结第58-59页
第二部分 人胃癌干细胞亚群差异基因检测与分析第59-69页
    一、实验结果第59-67页
        (一) 人胃癌干细胞亚群CD44的基因表达谱芯片分析第59-61页
            1. 人胃癌干细胞亚群CD44差异表达基因信号通路的分析第59-60页
            2. 人胃癌干细胞亚群CD44差异表达基因的分析第60-61页
        (二) 人胃癌干细胞亚群CD90的基因表达谱芯片分析第61-64页
            1. 人胃癌干细胞亚群CD90差异表达基因信号通路的分析第61-62页
            2. 人胃癌干细胞亚群CD90差异表达基因的分析第62-64页
        (三) 人胃癌干细胞亚群CD44和CD90的基因表达谱芯片分析第64-65页
            1. 人胃癌干细胞亚群CD44和CD90差异表达基因信号通路的分析第64页
            2. 人胃癌干细胞亚群CD44和CD90差异表达基因的分析第64-65页
        (四) 人胃癌干细胞亚群CD44和CD90的基因表达谱芯片验证第65-67页
    二、讨论第67-68页
    三、小结第68-69页
第三部分 ENO1对胃癌干细胞亚群生物学功能的作用及其分子机制第69-89页
    一、实验结果第69-83页
        (一) ENO1在人胃癌干细胞亚群干性特征的研究第69-74页
            1. ENO1在人胃癌干细胞亚群CD44阳性细胞中的表达第69-70页
            2. ENO1对人胃癌干细胞亚群CD44阳性细胞干性基因表达的影响第70-72页
            3. ENO1对人胃癌干细胞亚群CD44阳性细胞自我更新的影响第72-73页
            4. ENO1对人胃癌干细胞亚群CD44阳性细胞成瘤能力的影响第73页
            5. ENO1对人胃癌干细胞亚群CD44阳性细胞侵袭转移的影响第73-74页
        (二) 单抗21A3干预人胃癌干细胞亚群生物学功能的研究第74-77页
            1. 单抗21A3对人胃癌干细胞亚群CD44阳性细胞自我更新能力的影响第74-76页
            2. 单抗21A3对人胃癌干细胞亚群CD44阳性细胞侵袭转移的影响第76-77页
        (三) ENO1在调节人胃癌干细胞亚群信号通路的研究第77-80页
            1. ENO1在人胃癌干细胞亚群CD44阳性细胞中调节侵袭和转移的作用机制第77-78页
            2. ENO1在人胃癌干细胞亚群CD44阳性细胞中调节细胞周期的作用机制第78页
            3. ENO1在人胃癌干细胞亚群CD44阳性细胞中PI3K/AKT通路的作用机制第78-80页
        (四) ENO1表达水平与胃癌临床病理参数及预后的关系第80-83页
            1. 人胃癌组织细胞中ENO1的表达水平第80-81页
            2. ENO1与胃癌分期、分级、转移和预后相关性的分析第81-83页
    二、讨论第83-88页
    三、小结第88-89页
全文总结第89-90页
参考文献第90-94页
论文综述第94-102页
    参考文献第99-102页
致谢第102-103页
附录第103-104页
个人简历第104-105页
基金资助情况第105-106页

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