| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 缩略词表 | 第10-11页 |
| 第一章 引言 | 第11-34页 |
| 1.1 PGCs的起源和迁移 | 第11-16页 |
| 1.1.1 斑马鱼PGCs的起源和迁移 | 第11-13页 |
| 1.1.2 果蝇PGCs的起源和迁移 | 第13-14页 |
| 1.1.3 小鼠PGCs的起源和迁移 | 第14页 |
| 1.1.4 人类PGCs的起源 | 第14-15页 |
| 1.1.5 鸡PGCs的起源和迁移 | 第15-16页 |
| 1.2 PGCs迁移的调控因素 | 第16-22页 |
| 1.2.1 SDF1和CXCR4 | 第17页 |
| 1.2.2 Nanos | 第17-19页 |
| 1.2.3 Vasa | 第19页 |
| 1.2.4 Dead end | 第19-20页 |
| 1.2.5 DAZL | 第20页 |
| 1.2.6 其他影响PGCs迁移的因子 | 第20-22页 |
| 1.3 Reticulons家族的研究进展 | 第22-28页 |
| 1.3.1 RTNs家族成员和结构 | 第22-24页 |
| 1.3.2 RTNs的分布和功能 | 第24-26页 |
| 1.3.3 与RTNs相互作用的蛋白 | 第26-28页 |
| 1.4 CXCR4的研究进展 | 第28-32页 |
| 1.4.1 CXCR4的发现 | 第29-30页 |
| 1.4.2 CXCR4的信号转导 | 第30-31页 |
| 1.4.3 CXCR4的生物学功能 | 第31-32页 |
| 1.5 本研究的目的和意义 | 第32-34页 |
| 第二章 材料与方法 | 第34-58页 |
| 2.1 实验材料 | 第34-40页 |
| 2.1.1 菌株和细胞 | 第34页 |
| 2.1.2 斑马鱼品系及饲养 | 第34页 |
| 2.1.3 质粒载体 | 第34页 |
| 2.1.4 试剂、试剂盒及抗体 | 第34-35页 |
| 2.1.5 实验仪器 | 第35-36页 |
| 2.1.6 主要试剂的配制方法 | 第36-39页 |
| 2.1.7 实验数据分析相关软件 | 第39-40页 |
| 2.2 实验方法 | 第40-58页 |
| 2.2.1 表达和转录载体的构建 | 第40-46页 |
| 2.2.2 酵母双杂交筛选 | 第46-49页 |
| 2.2.3 细胞培养技术 | 第49-50页 |
| 2.2.4 荧光定量PCR检测 | 第50-52页 |
| 2.2.5 Western blot检测 | 第52-54页 |
| 2.2.6 免疫共沉淀分析 | 第54-55页 |
| 2.2.7 免疫荧光染色 | 第55-56页 |
| 2.2.8 Capped RNA的体外转录和纯化 | 第56-57页 |
| 2.2.9 胚胎的显微注射 | 第57页 |
| 2.2.10 实验数据的分析与图片处理 | 第57-58页 |
| 第三章 结果与分析 | 第58-85页 |
| 3.1 酵母双杂交筛选与hCXCR4相互作用的蛋白 | 第58-64页 |
| 3.1.1 酵母双杂交载体的构建 | 第59页 |
| 3.1.2 Western blot检测BD-hCXCR4融合蛋白的表达 | 第59-60页 |
| 3.1.3 诱饵蛋白的自激活检测 | 第60-62页 |
| 3.1.4 酵母双杂交筛选与hCXCR4相互作用蛋白 | 第62页 |
| 3.1.5 阳性克隆的重复验证和自激活验证 | 第62-63页 |
| 3.1.6 阳性克隆的测序及序列比对结果 | 第63-64页 |
| 3.2 RTN3的生物信息学分析 | 第64-67页 |
| 3.2.1 RTN3蛋白的进化过程分析 | 第64页 |
| 3.2.2 RTN3的结构域保守性分析 | 第64-67页 |
| 3.3 CXCR4与RTN3的相互作用分析 | 第67-72页 |
| 3.3.1 真核表达载体的构建和蛋白表达检测 | 第68-69页 |
| 3.3.2 CXCR4与RTN3相互作用分析 | 第69-71页 |
| 3.3.3 RTN3-RHD缺失突变体的载体构建和蛋白表达检测 | 第71页 |
| 3.3.4 CXCR4与RTN3-RHD相互作用分析 | 第71-72页 |
| 3.4 RTN3对CXCR4表达的调控 | 第72-76页 |
| 3.4.1 过表达RTN3对CXCR4表达的影响 | 第72-75页 |
| 3.4.2 敲低RTN3对CXCR4表达的影响 | 第75-76页 |
| 3.5 RTN3对CXCR4亚细胞定位的影响 | 第76-78页 |
| 3.6 RTN3对斑马鱼PGCs迁移的影响 | 第78-85页 |
| 3.6.1 斑马鱼PGCs的鉴定 | 第78-79页 |
| 3.6.2 mRNA的体外合成 | 第79-80页 |
| 3.6.3 mRNA最适工作浓度筛选 | 第80-81页 |
| 3.6.4 zRTN3对PGCs迁移的影响 | 第81-83页 |
| 3.6.5 部分靶蛋白在PGCs迁移中的功能验证 | 第83-85页 |
| 第四章 讨论 | 第85-89页 |
| 第五章 结论与展望 | 第89-90页 |
| 5.1 结论 | 第89页 |
| 5.2 展望 | 第89-90页 |
| 参考文献 | 第90-103页 |
| 致谢 | 第103-104页 |
| 个人简历 | 第104页 |
