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酿酒酵母三个耐盐相关基因克隆及其在棉花中转化

摘要第4-6页
ABSTRACT第6-7页
缩写词第12-13页
1 前言第13-23页
    1.1 植物的耐盐性第13-15页
        1.1.1 离子毒害及其调节第13-14页
        1.1.2 渗透调节及其抗性第14页
        1.1.3 抗氧化酶和植物激素调节第14-15页
    1.2 植物转基因技术第15-16页
        1.2.1 载体介导法第15页
        1.2.2 DNA直接导入法第15-16页
        1.2.3 花粉管通道法第16页
    1.3 外源基因转化棉花研究现状第16-17页
    1.4 酿酒酵母耐盐基因研究进展第17-20页
        1.4.1 ENA1基因研究进展第18-19页
        1.4.2 HAL1基因研究进展第19-20页
        1.4.3 YCF1基因研究进展第20页
    1.5 立题依据及技术路线第20-23页
2 材料与方法第23-31页
    2.1 实验材料第23-24页
        2.1.1 实验棉花材料第23页
        2.1.2 实验仪器第23-24页
        2.1.3 实验菌株与载体质粒第24页
    2.2 实验方法第24-31页
        2.2.1 酵母RNA的提取第24页
        2.2.2 反转录制备cDNA第24-25页
        2.2.3 酵母耐盐相关基因的克隆第25-26页
        2.2.4 序列分析第26页
        2.2.5 表达载体的构建第26页
        2.2.6 洋葱表皮亚细胞定位第26-27页
        2.2.7 棉花花粉的瞬时表达分析第27页
        2.2.8 基因枪活体转化棉花第27-28页
        2.2.9 转基因棉花T1代种子耐盐性分析及分子检测第28-31页
3 结果与分析第31-49页
    3.1 酵母耐盐相关基因的克隆第31-32页
        3.1.1 酵母RNA提取结果分析第31页
        3.1.2 酵母耐盐相关基因的克隆第31-32页
    3.2 生物信息学分析第32-39页
        3.2.1 ENA1基因的生物信息学分析第32-33页
        3.2.2 HAL1基因的生物信息学分析第33-36页
        3.2.3 YCF1基因的生物信息学分析第36-39页
    3.3 荧光表达载体的构建第39页
    3.4 基因瞬时表达分析第39-40页
        3.4.1 洋葱内表皮细胞的亚细胞定位第39-40页
        3.4.2 棉花花粉的瞬时表达分析第40页
    3.5 转基因棉花T1代种子耐盐性分析及分子检测第40-49页
        3.5.1 转基因棉花T1代种子的获得第40-41页
        3.5.2 转基因种子耐盐性分析第41-43页
        3.5.3 转基因种子分子检测第43-49页
4 讨论第49-53页
    4.1 酿酒酵母耐盐基因转化植物的研究现状第49-50页
    4.2 基因瞬时表达分析第50页
    4.3 基因枪活体转化技术分析第50-51页
    4.4 转基因棉花分子检测第51-53页
5 结论第53-54页
参考文献第54-64页
硕士期间发表论文第64-65页
致谢第65-66页

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