| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-30页 |
| ·南极低温微生物的研究现状 | 第12-15页 |
| ·适冷机制的研究 | 第13-14页 |
| ·产冷适应性酶的研究 | 第14-15页 |
| ·乳糖酶简介 | 第15-16页 |
| ·结构及催化机理 | 第15-16页 |
| ·活力测定方法 | 第16页 |
| ·乳糖酶的国内外研究现状及进展 | 第16-24页 |
| ·微生物来源 | 第16-19页 |
| ·发酵生产 | 第19-20页 |
| ·分离纯化及性质研究 | 第20-23页 |
| ·分子生物学研究 | 第23-24页 |
| ·微生物乳糖酶的应用 | 第24-28页 |
| ·满足乳糖不耐症患者的需要 | 第25-26页 |
| ·在浓缩乳制品及发酵乳制品中的应用 | 第26页 |
| ·乳清糖浆和半乳果葡糖浆的制造及应用 | 第26-27页 |
| ·在制药工业中的应用 | 第27页 |
| ·生产低聚半乳糖 | 第27-28页 |
| ·本论文的研究目的与意义 | 第28-30页 |
| 第二章 产乳糖酶南极酵母菌株的筛选和鉴定 | 第30-41页 |
| ·引言 | 第30页 |
| ·实验材料 | 第30-31页 |
| ·菌株 | 第30-31页 |
| ·培养基 | 第31页 |
| ·D1/D2 26S rDNA的PCR扩增引物(Sugita et al.,2003) | 第31页 |
| ·实验方法 | 第31-35页 |
| ·乳糖酶活力的测定 | 第31-32页 |
| ·产乳糖酶菌株的初筛 | 第32页 |
| ·种子液的制备 | 第32页 |
| ·产乳糖酶菌株的复筛 | 第32页 |
| ·酵母菌的常规方法鉴定 | 第32-33页 |
| ·分子生物学方法鉴定 | 第33-35页 |
| ·细胞生长量的测定 | 第35页 |
| ·实验结果 | 第35-39页 |
| ·初筛结果 | 第35-36页 |
| ·复筛结果 | 第36-37页 |
| ·常规方法鉴定结果 | 第37-38页 |
| ·分子生物学鉴定结果 | 第38-39页 |
| ·讨论 | 第39-40页 |
| ·本章小结 | 第40-41页 |
| 第三章 耐冷酵母G.pullulans 17-1菌株乳糖酶的生产条件优化 | 第41-60页 |
| ·引言 | 第41页 |
| ·材料与方法 | 第41-46页 |
| ·菌株 | 第41-42页 |
| ·培养基 | 第42页 |
| ·培养方法 | 第42页 |
| ·胞外酶活力测定方法 | 第42页 |
| ·菌体生长量的测定 | 第42-43页 |
| ·发酵培养基优化 | 第43-45页 |
| ·薄层层析分析(TLC) | 第45-46页 |
| ·结果与讨论 | 第46-58页 |
| ·温度对产胞外乳糖酶及菌体生长的影响 | 第46-47页 |
| ·碳源优化结果 | 第47-49页 |
| ·氮源优化结果 | 第49-51页 |
| ·培养基初始pH的选择 | 第51-52页 |
| ·不同无机盐对产胞外酶及菌体生长的影响 | 第52-53页 |
| ·添加紫苏油对产酶的影响 | 第53-55页 |
| ·最适培养条件下的产酶及菌体生长曲线 | 第55-56页 |
| ·发酵罐高密度发酵产酶条件初探 | 第56-57页 |
| ·粗酶水解结果 | 第57-58页 |
| ·本章小结 | 第58-60页 |
| 第四章 耐冷酵母G.pullulans 17-1菌株胞外乳糖酶的分离纯化及性质研究 | 第60-85页 |
| ·引言 | 第60-61页 |
| ·材料与方法 | 第61-68页 |
| ·菌株 | 第61页 |
| ·培养基 | 第61页 |
| ·粗酶液的制备 | 第61页 |
| ·乳糖酶活力测定 | 第61页 |
| ·总蛋白含量的测定 | 第61-62页 |
| ·胞外乳糖酶的分离纯化 | 第62-65页 |
| ·纯化乳糖酶的酶学性质研究 | 第65-68页 |
| ·结果与讨论 | 第68-84页 |
| ·Sephadex~(TM)G-200凝胶过滤 | 第68-69页 |
| ·CM-Sepharose Fast Flow阳离子交换层析纯化 | 第69-70页 |
| ·酶纯化过程参数和不连续SDS-PAGE电泳 | 第70-72页 |
| ·凝胶层析法测分子量结果 | 第72-73页 |
| ·最适作用温度及温度稳定性 | 第73-75页 |
| ·最适作用pH及其稳定性 | 第75-77页 |
| ·金属离子对纯化酶的影响 | 第77-78页 |
| ·蛋白抑制剂的影响 | 第78-79页 |
| ·纯化酶的动力学参数 | 第79-80页 |
| ·纯化酶一级蛋白质谱分析结果 | 第80-82页 |
| ·纯化酶的水解结果 | 第82-84页 |
| ·本章小结 | 第84-85页 |
| 参考文献 | 第85-100页 |
| 总结与创新点 | 第100-102页 |
| 附录 | 第102-103页 |
| 致谢 | 第103-104页 |
| 个人简历及发表的学术论文 | 第104页 |
