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陆地棉GhPHOT2-1调节植物叶绿体运动的功能分析

摘要第4-6页
ABSTRACT第6-7页
缩写词第11-12页
1 引言第12-22页
    1.1 棉花转基因的现状第12页
    1.2 棉花新品种的获得和转基因技术第12-15页
        1.2.1 农杆菌介导的组织培养法第13页
        1.2.2 基因枪轰击法第13-14页
        1.2.3 花粉管通道注射法第14-15页
    1.3 病毒诱导的基因沉默第15-16页
    1.4 模式植物拟南芥第16-17页
    1.5 模式植物拟南芥向光素2基因的结构与功能第17-18页
    1.6 拟南芥中向光素2基因的研究进展第18页
    1.7 向光素2基因调节叶绿体运动第18-19页
    1.8 拟南芥的下胚轴弯曲第19页
    1.9 立题依据第19-22页
2 材料与方法第22-36页
    2.1 本实验常用试剂盒和材料第22页
    2.2 常用实验溶液配制方法第22-26页
    2.3 实验方法第26-29页
        2.3.1 陆地棉GhPHOT2的生物信息学分析第26页
        2.3.2 陆地棉GhPHOT2基因的克隆第26-29页
    2.4 转基因材料的获得第29-30页
        2.4.1 拟南芥的培养与转化方法第29-30页
        2.4.2 棉花的转化方法第30页
    2.5 瞬转烟草叶肉细胞第30-31页
        2.5.1 烟草的种植第30页
        2.5.2 烟草叶片的转化第30-31页
    2.6 转基因材料的鉴定第31-34页
        2.6.1 提取DNA方法第31页
        2.6.2 提取蛋白方法第31页
        2.6.3 转GhPHOT2棉花的Southern杂交第31-33页
        2.6.4 转GhPHOT2拟南芥材料的Western杂交第33-34页
    2.7 病毒介导的基因沉默技术第34-36页
        2.7.1 VIGS技术的实施方法第34-36页
3 结果与分析第36-52页
    3.1 GhPHOT2的生物学分析第36-38页
        3.1.1 GhPHOT2基因的亚家族以及Gh PHOT2-1 基因的选定第36-37页
        3.1.2 GhPHOT2-1 基因结构以及该基因与其他植物中的PHOT2比对第37-38页
    3.2 PHOT2在棉花与拟南芥中的表型与表达差异第38-40页
        3.2.1 PHOT2在棉花与拟南芥中的表型差异第38-39页
        3.2.2 PHOT2在棉花与拟南芥中的表达差异第39-40页
    3.3 棉花GhPHOT2-1 回补拟南芥突变体的表型分析第40-46页
        3.3.1 棉花GhPHOT2-1 回补单突变体phot2第40-44页
        3.3.2 棉花GhPHOT2-1 回补双突变体phot1 phot2第44-46页
    3.4 陆地棉GhPHOT2-1 的亚细胞定位与膜-质转移第46-48页
        3.4.1 拟南芥原生质体与烟草叶肉细胞的瞬时转化第46页
        3.4.2 烟草叶肉细胞的亚细胞定位与PI染色第46-48页
    3.5 VIGS基因沉默实验第48-49页
        3.5.1 GhPHOT2-1 基因沉默叶片表型第48页
        3.5.2 GhPHOT2-1 基因沉默植株的强光伤害与分子鉴定第48-49页
    3.6 转GhPHOT2-1 棉花的田间表现第49-52页
        3.6.1 三种材料的叶片透光率第49-50页
        3.6.2 GhPHOT2-1 超表达棉花材料的收获情况第50页
        3.6.3 GhPHOT2-1 超表达棉花材料的的分子鉴定第50-52页
4 讨论第52-54页
    4.1 PHOT2的生物信息学分析第52页
    4.2 陆地棉GhPHOT2-1 基因在拟南芥中的功能第52-53页
    4.3 陆地棉GhPHOT2-1 基因在棉花中的功能第53-54页
5 结论第54-55页
参考文献第55-58页
致谢第58-59页

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