| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 第一章 前言 | 第10-17页 |
| 第一节 肺炎及肺炎链球菌 | 第10-11页 |
| 第二节 肺炎链球菌疫苗简史与现状 | 第11-13页 |
| 第三节 PsaA蛋白简介 | 第13-14页 |
| 第四节 PcpA蛋白简介 | 第14-15页 |
| 第五节 论文设计 | 第15-17页 |
| 第二章 PsaA-PcpA融合蛋白的制备 | 第17-33页 |
| 第一节 材料与仪器 | 第17-20页 |
| 1. 质粒与菌株 | 第17页 |
| 2. 限制性内切酶及试剂盒 | 第17页 |
| 3. 主要试剂 | 第17-18页 |
| 4. 主要仪器 | 第18页 |
| 5. 主要溶液的配制 | 第18-20页 |
| 第二节 实验方法 | 第20-26页 |
| 1. 目的基因与引物设计 | 第20-21页 |
| 2. PCR | 第21页 |
| 3. 琼脂糖凝胶回收目的基因片段 | 第21-22页 |
| 4. 目的基因连接至质粒载体 | 第22页 |
| 5. 转化入原核菌株 | 第22-23页 |
| 6. 碱裂解法小提质粒 | 第23-24页 |
| 7. 限制性内切酶进行质粒的酶切 | 第24页 |
| 8. 融合蛋白PsaA-PcpA的表达 | 第24-25页 |
| 9. SDS-PAGE | 第25页 |
| 10. Western Blot | 第25页 |
| 11. 镍离子亲和层析纯化融合蛋白 | 第25-26页 |
| 第三节 实验结果 | 第26-32页 |
| 1. Overlap PCR制备PsaA-PcpA基因片段 | 第26-27页 |
| 2. pET20b-PsaA-PcpA表达质粒的构建 | 第27-29页 |
| 3. PsaA-PcpA融合蛋白的表达 | 第29-31页 |
| 4. PsaA-PcpA融合蛋白的纯化 | 第31-32页 |
| 第四节 小结 | 第32-33页 |
| 第三章 PsaA-PcpA融合蛋白的保护性研究 | 第33-38页 |
| 第一节 材料与动物 | 第33页 |
| 1. 蛋白、菌株与动物 | 第33页 |
| 2. 主要试剂 | 第33页 |
| 第二节 实验方法 | 第33-35页 |
| 1. PsaA-PcpA融合蛋白免疫原性检测 | 第33-34页 |
| 2. PsaA-PcpA攻毒保护性实验 | 第34-35页 |
| 第三节 实验结果 | 第35-37页 |
| 1. PsaA-PcpA融合蛋白免疫原性测定 | 第35-36页 |
| 2. PsaA-PcpA融合蛋白攻毒保护性实验 | 第36-37页 |
| 第四节 小结 | 第37-38页 |
| 本文结论 | 第38-40页 |
| 参考文献 | 第40-42页 |
| 致谢 | 第42页 |