| 附录 | 第6-8页 |
| 中文摘要 | 第8-10页 |
| 英文摘要 | 第10-11页 |
| 前言 | 第12-19页 |
| 1. 结直肠癌的研究进展 | 第12-15页 |
| 1.1 发病率和死亡率 | 第12-13页 |
| 1.2 结直肠癌发病机制 | 第13页 |
| 1.3 结直肠癌危险/预后因素 | 第13页 |
| 1.4 结直肠癌治疗手段 | 第13-15页 |
| 2. TIPE3的研究进展 | 第15-17页 |
| 2.1 TIPE家族简介 | 第15页 |
| 2.2 TIPE3在组织中的分布 | 第15页 |
| 2.3 TIPE3与肿瘤的发生发展 | 第15-16页 |
| 2.4 TIPE3与磷脂酰肌醇信号通路 | 第16页 |
| 2.5 TIPE3在肿瘤研究中的前景与展望 | 第16-17页 |
| 3. 实验方案设计 | 第17-19页 |
| 3.1 研究的目的和意义 | 第17页 |
| 3.2 研究内容 | 第17-19页 |
| 材料与方法 | 第19-33页 |
| 1. 材料 | 第19-24页 |
| 1.1 载体、菌种和细胞株 | 第19页 |
| 1.2 主要试剂及耗材 | 第19-21页 |
| 1.3 主要仪器和设备 | 第21页 |
| 1.4 主要溶液的配置 | 第21-24页 |
| 2. 方法 | 第24-33页 |
| 2.1 shRNA干扰片段的设计、合成 | 第24页 |
| 2.2 干扰片段与载体pSIREN-Retro Q的连接 | 第24-25页 |
| 2.3 干扰片段与pSIREN-Retro Q干扰质粒的转化 | 第25页 |
| 2.4 经PCR初筛、复筛鉴定，排除假阳性 | 第25-26页 |
| 2.5 细胞培养 | 第26页 |
| 2.6 检测人结肠癌细胞HT-29、人结肠腺癌细胞SW480细胞株TIPE3mRNA水平表达情况 | 第26-28页 |
| 2.7 检测人结肠癌细胞HT-29、人结肠腺癌细胞SW480细胞株TIPE3蛋白水平表达情况 | 第28-30页 |
| 2.8 人结肠腺癌细胞SW480细胞的转染及干扰效率的检测 | 第30页 |
| 2.9 293T细胞制备慢病毒转染SW480细胞 | 第30-31页 |
| 2.10 CCK-8检测转染TIPE3-sh RNA3干扰质粒SW480细胞的存活率 | 第31-32页 |
| 2.11 CCK检测转染干扰质粒SW480细胞的药物敏感性 | 第32页 |
| 2.12 用流式法检测aDR5ScFv诱导细胞凋亡情况 | 第32-33页 |
| 2.13 WB检测转染TIPE3干扰质粒的SW480细胞相关分子pro-caspase3、cleaved caspase3、AKT、p-AKT、PDK、p-PDK、PCNA等表达活化 | 第33页 |
| 统计学处理 | 第33-34页 |
| 结果与分析 | 第34-42页 |
| 1. TIPE3-shRNA-p SIREN-RetroQ干扰质粒阳性菌落初、复筛的鉴定 | 第34页 |
| 2. TIPE3-shRNA-pSIREN-RetroQ测序结果比对 | 第34-35页 |
| 3. 检测人结肠癌细胞HT-29、SW480细胞株TIPE3表达情况 | 第35页 |
| 4. 人结肠腺癌细胞SW480细胞的转染及干扰效率的检测 | 第35-36页 |
| 5. TIPE3-sh RNA质粒干扰效率的检测 | 第36-38页 |
| 6. CCK检测TIPE3-shRNA干扰质粒转染后SW480细胞的生长 | 第38-39页 |
| 7. CCK-8检测转染TIPE3-shRNA干扰质粒SW480细胞的5-FU化学药物敏感性 | 第39-40页 |
| 8. 流式检测TIPE3-sh RNA3干扰质粒对细胞凋亡的影响 | 第40-41页 |
| 9. WB检测细胞凋亡、增殖相关蛋白分子的表达情况 | 第41-42页 |
| 讨论 | 第42-45页 |
| 结论 | 第45页 |
| 成果 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-50页 |
| 综述 | 第50-60页 |
| 参考文献 | 第55-60页 |
| 致谢 | 第60页 |
