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固定化细胞催化制备亚氨基二乙酸的研究

摘要第3-5页
ABSTRACT第5-6页
第一章 绪论第11-38页
    1.1 亚氨基二乙酸的概况第11-13页
    1.2 亚氨基二乙酸的合成方法第13-20页
        1.2.1 亚氨基二乙酸的化学法合成第13-16页
            1.2.1.1 氯乙酸甘氨酸法第13页
            1.2.1.2 氨代氯乙酸法第13页
            1.2.1.3 氮川三乙酸法第13-14页
            1.2.1.4 二乙醇胺法第14页
            1.2.1.5 羟基乙腈法第14-15页
            1.2.1.6 氢氰酸法第15-16页
            1.2.1.7 亚氨基二乙腈水解生产亚氨基二乙酸新工艺第16页
        1.2.2 亚氨基二乙酸的生物法合成第16-18页
        1.2.3 亚氨基二乙酸的应用第18-20页
            1.2.3.1 农药第18-19页
            1.2.3.2 染料第19页
            1.2.3.3 水处理第19页
            1.2.3.4 精细化工中间体第19-20页
            1.2.3.5 其它第20页
    1.3 固定化细胞技术第20-28页
        1.3.1 概述第20页
        1.3.2 细胞固定化方法第20-24页
            1.3.2.1 载体表面结合法第21-22页
            1.3.2.2 凝胶包埋法第22页
            1.3.2.3 细胞聚集法第22-23页
            1.3.2.4 物理截留法第23页
            1.3.2.5 细胞固定化新方法第23-24页
        1.3.3 固定化方法的选择第24-25页
        1.3.4 固定化细胞的应用第25-27页
            1.3.4.1 固定化细胞在食品工业中的应用第25页
            1.3.4.2 固定化细胞在发酵工业中的应用第25-26页
            1.3.4.3 固定化细胞在三废处理中的应用第26-27页
        1.3.5 细胞固定化技术的发展趋势第27-28页
    1.4 固定化细胞反应器第28-32页
        1.4.1 概述第28页
        1.4.2 固定化细胞常用的反应器第28-31页
            1.4.2.1 填充床反应器第28-29页
            1.4.2.2 流化床反应器第29-30页
            1.4.2.3 搅拌罐反应器第30页
            1.4.2.3 气升式反应器第30-31页
            1.4.2.5 膜反应器第31页
        1.4.3 固定化细胞反应器的发展方向第31-32页
            1.4.3.1 生物催化剂的改造第31-32页
            1.4.3.2 生物反应器的优化设计第32页
    1.5 本论文的研究意义第32-33页
    1.6 本课题的主要研究内容第33-34页
    参考文献第34-38页
第二章 检测方法的建立第38-52页
    2.1 引言第38-40页
    2.2 材料与方法第40-42页
        2.2.1 仪器与试剂第40-41页
        2.2.2 方法第41-42页
            2.2.2.1 RP-HPLC检测方法第41页
                2.2.2.1.1 样品准备第41页
                2.2.2.1.2 色谱条件第41页
            2.2.2.2 HPLC检测方法第41-42页
                2.2.2.2.1 样品准备第41页
                2.2.2.2.2 色谱条件第41-42页
    2.3 结果与讨论第42-50页
        2.3.1 检测方法的建立第42-44页
            2.3.1.1 流动相的选择第42-43页
            2.3.1.2 pH的选择第43-44页
        2.3.2 检测方法评价第44-48页
            2.3.2.1 标准曲线的制作第44-46页
            2.3.2.2 线性关系及检测限第46-47页
            2.3.2.3 稳定性和重现性实验第47-48页
            2.3.2.4 回收率实验第48页
        2.3.3 HPLC方法与RP-HPLC方法的比较第48-50页
    2.4 小结第50-51页
    参考文献第51-52页
第三章 细胞固定化方法的选择及固定化条件优化第52-78页
    3.1 引言第52页
    3.2 材料与方法第52-57页
        3.2.1 试剂与材料第52-53页
            3.2.1.1 试剂第52-53页
            3.2.1.2 不同缓冲体系的配置(具体方法见附录1)第53页
        3.2.2 仪器设备第53页
        3.2.3 微生物培养第53-54页
            3.2.3.1 微生物菌种第53页
            3.2.3.2 微生物培养基第53-54页
            3.2.3.3 微生物培养条件第54页
        3.2.4 细胞的固定化方法第54-56页
            3.2.4.1 海藻酸钠包埋法第54页
            3.2.4.2 卡拉胶包埋法第54-55页
            3.2.4.3 琼脂凝胶包埋法第55页
            3.2.4.4 明胶包埋法第55页
            3.2.4.5 聚乙烯醇包埋法第55页
            3.2.4.6 壳聚糖包埋法第55-56页
            3.2.4.7 聚乙烯醇-海藻酸钠复合包埋法第56页
            3.2.4.8 壳聚糖-海藻酸钠第56页
        3.2.5 细胞转化方法第56-57页
            3.2.5.1 底物溶液的配置第56页
            3.2.5.2 游离细胞酶活力的测定第56页
            3.2.5.3 固定化细胞酶活力的测定第56-57页
            3.2.5.4 固定化细胞机械强度的测定第57页
        3.2.6 分析方法第57页
            3.2.6.1 IDA与IDAN的HPLC测定第57页
            3.6.2.2 产物得率的计算方法第57页
    3.3 结果与讨论第57-76页
        3.3.1 固定化方法的选择第57-58页
        3.3.2 海藻酸钠固定化方法的条件优化第58-60页
            3.3.2.1 海藻酸钠浓度的选择第58-59页
            3.3.2.2 氯化钙浓度的选择第59-60页
        3.3.3 海藻酸钠固定化细胞的转化进程曲线第60页
        3.3.4 复合式包埋法的选择第60-62页
        3.3.5 聚乙烯醇-海藻酸钠固定化方法的条件优化第62-66页
            3.3.5.1 海藻酸钠浓度的选择第62-63页
            3.3.5.2 聚乙烯醇浓度的选择第63页
            3.3.5.3 氯化钙浓度的选择第63-64页
            3.3.5.4 包埋量的选择第64-66页
        3.3.6 固定化细胞转化条件的优化第66-72页
            3.3.6.1 底物浓度的选择第66-67页
            3.3.6.2 底物和产物对催化过程的抑制第67-69页
            3.3.6.3 转化pH的选择和固定化细胞的pH稳定性第69-70页
            3.3.6.4 转化温度的选择和固定化细胞的温度稳定性第70-72页
        3.3.7 PVA-SA固定化细胞的转化时间曲线第72-73页
        3.3.8 固定化细胞的转化批次和储存稳定性第73-76页
            3.3.8.1 固定化细胞的转化批次第73-75页
            3.3.8.2 固定化细胞的储存稳定性第75-76页
    3.4 小结第76-77页
    参考文献第77-78页
第四章 固定化细胞反应器的初步研究第78-88页
    4.1 引言第78-79页
    4.2 材料与方法第79-81页
        4.2.1 试剂与材料第79页
        4.2.2 仪器设备第79页
        4.2.3 微生物培养第79页
        4.2.4 固定化方法第79页
        4.2.5 固定化细胞反应器的构建第79-81页
            4.2.5.1 流化床反应器第80页
            4.2.5.2 固定床反应器第80-81页
        4.2.6 分析方法第81页
    4.3 结果与讨论第81-86页
        4.3.1 流化床反应器第81-82页
        4.3.2 填充床反应器的操作条件优化第82-85页
            4.3.2.1 最佳转化温度的确定第82-83页
            4.3.2.2 最佳底物浓度的确定第83-84页
            4.3.2.3 最佳流速的确定第84-85页
        4.3.3 固定床反应器的操作稳定性第85-86页
    4.4 小结第86-87页
    参考文献第87-88页
总结与展望第88-90页
致谢第90-91页
硕士在读期间已发表的论文第91-92页
附录1 本论文所用到的缓冲液的配置第92-93页

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