英文缩略词表 | 第1-9页 |
中文摘要 | 第9-12页 |
英文摘要 | 第12-15页 |
前言 | 第15-19页 |
技术路线图 | 第19-21页 |
第一部分 滇南小耳猪骨髓间质干细胞的分离、培养和不同代次细胞生物学特性的研究 | 第21-66页 |
引言 | 第21-23页 |
材料与方法 | 第23-33页 |
1.材料 | 第23-26页 |
·实验动物 | 第23页 |
·主要试剂 | 第23-25页 |
·主要耗材 | 第25页 |
·主要仪器与设备 | 第25-26页 |
2.方法与步骤 | 第26-33页 |
·pBMSCs分离、培养扩增 | 第26-28页 |
·pBMSCs的鉴定 | 第28-32页 |
·统计学分析 | 第32-33页 |
结果 | 第33-54页 |
1.pBMSCs分离、培养 | 第33-34页 |
·分离及原代培养 | 第33页 |
·传代培养 | 第33-34页 |
·细胞冻存与复苏 | 第34页 |
2.pBMSCs的鉴定 | 第34-54页 |
·形态学 | 第34-39页 |
·pBMSCs生长曲线绘制 | 第39页 |
·pBMSCs染色体核型分析 | 第39-42页 |
·pBMSCs细胞周期检测 | 第42-43页 |
·pBMSCs细胞凋亡检测 | 第43-45页 |
·pBMSCs表达CD29、CD44、CD105,不表达CD45、SLA-DR | 第45-52页 |
·pBMSCs具有多向分化潜能 | 第52-54页 |
讨论 | 第54-61页 |
1.pBMSCs的分离、纯化 | 第55-57页 |
2.pBMSCs的传代培养及生长特性 | 第57-59页 |
3.pBMSCs的表型 | 第59-60页 |
4.pBMSCs的多向分化潜能 | 第60-61页 |
小结 | 第61-62页 |
参考文献 | 第62-66页 |
第二部分 滇南小耳猪骨髓间质干细胞免疫原性及免疫调节机制的研究 | 第66-102页 |
引言 | 第66-69页 |
材料与方法 | 第69-78页 |
1.材料 | 第69-71页 |
·实验动物 | 第69页 |
·主要试剂 | 第69-70页 |
·主要耗材 | 第70页 |
·主要仪器设备 | 第70-71页 |
2.方法与步骤 | 第71-78页 |
·pBMSCs的培养扩增 | 第71-72页 |
·pBMSCs输入滇南小耳猪 | 第72页 |
·外周血的采集 | 第72页 |
·外周血淋巴细胞的分离纯化 | 第72-73页 |
·混合淋巴细胞培养 | 第73-74页 |
·流式细胞术检测T淋巴细胞亚群的变化 | 第74-75页 |
·目标基因的选取 | 第75页 |
·淋巴细胞总RNA提取 | 第75页 |
·RNA纯度、总量测定 | 第75-76页 |
·cDNA的合成 | 第76页 |
·RT-PCR检测Foxp3及TGF-β、IFN-γ的变化 | 第76-77页 |
·电泳鉴定RT-PCR产物 | 第77页 |
·统计分析 | 第77-78页 |
结果 | 第78-89页 |
1.输入pBMSCs后,外周血T淋巴细胞亚群的变化 | 第78-80页 |
2.混合淋巴细胞培养中,pBMSCs能抑制外周血淋巴细胞的增殖 | 第80-83页 |
3.混合淋巴细胞培养中,pBMSCs培养上清不能抑制外周血淋巴细胞的增殖 | 第83-85页 |
4.淋巴细胞RNA提取结果 | 第85页 |
5.混合培养后的淋巴细胞Foxp3、IFN-γ、TGF-β的变化 | 第85-86页 |
6.输入pBMSCs后的淋巴细胞Foxp3、IFN-γ、TGF-β的变化 | 第86-88页 |
7.RT-PCR产物的鉴定 | 第88-89页 |
讨论 | 第89-97页 |
1.pBMSCs具有低免疫原性 | 第90-92页 |
2.pBMSCs抑制PBLs的增殖及其机制 | 第92-97页 |
小结 | 第97-98页 |
参考文献 | 第98-102页 |
全文总结 | 第102-103页 |
文献综述 | 第103-117页 |
攻读学位期间发表文章情况 | 第117-118页 |
致谢 | 第118-119页 |