缩略语表 | 第5-6页 |
中文摘要 | 第6-10页 |
英文摘要 | 第10-15页 |
前言 | 第16-17页 |
文献回顾 | 第17-29页 |
第一部分 阐述MST1是否参与动脉粥样硬化进展 | 第29-38页 |
1 材料 | 第29-30页 |
1.1 实验动物 | 第29页 |
1.2 实验试剂 | 第29-30页 |
2 方法 | 第30-33页 |
2.1 构建小鼠动脉粥样硬化模型 | 第30页 |
2.2 实验方案 | 第30页 |
2.3 动脉标本提取 | 第30-31页 |
2.4 小鼠血液标本提取并检测血脂水平 | 第31页 |
2.5 石蜡切片制备 | 第31-32页 |
2.6 HE 染色实验步骤 | 第32-33页 |
3 结果 | 第33-35页 |
3.1 成功构建小鼠动脉粥样硬化模型 | 第33页 |
3.2 Mst1敲除减小动脉粥样硬化斑块面积 | 第33-34页 |
3.3 Mst1敲除不影响血脂总水平,增大最小管腔直径 | 第34-35页 |
4 讨论 | 第35-38页 |
第二部分 阐述MST1敲除能稳定APOE-/-小鼠中的动脉粥样硬化斑块 | 第38-46页 |
1 材料 | 第38-39页 |
1.1 实验试剂 | 第38页 |
1.2 实验仪器与耗材 | 第38-39页 |
2 方法 | 第39-42页 |
2.1 血管标本提取如上 | 第39页 |
2.2 冰冻切片制片实验步骤 | 第39-40页 |
2.3 油红O染色步骤 | 第40页 |
2.4 ELISA试剂盒检测IL-6 和MCP-1 | 第40-41页 |
2.5 免疫荧光染色 CD68 | 第41-42页 |
3 结果 | 第42-44页 |
4 讨论 | 第44-46页 |
第三部分 阐述抑制MST1增强巨噬细胞中自噬流 | 第46-60页 |
1 材料 | 第46-48页 |
1.1 实验试剂 | 第46-47页 |
1.2 实验仪器与耗材 | 第47-48页 |
2 方法 | 第48-55页 |
2.1 巨噬细胞培养 | 第48页 |
2.2 诱导巨噬细胞形成泡沫细胞 | 第48-49页 |
2.3 实验方案 | 第49页 |
2.4 mRFP-GFP-LC3腺病毒感染巨噬细胞观察自噬流 | 第49-50页 |
2.5 巨噬细胞用 OX-LDL 干预后在投射电子显微镜下观察自噬小体 | 第50页 |
2.6 巨噬细胞蛋白样品的制备 | 第50-51页 |
2.7 SDS-聚丙烯酰胺凝胶配置 | 第51-52页 |
2.8 电泳装置组装 | 第52页 |
2.9 上样,电泳 | 第52-53页 |
2.10 转膜 | 第53页 |
2.11 抗体孵育 | 第53-54页 |
2.12 结果分析 | 第54页 |
2.13 统计学分析 | 第54-55页 |
3 结果 | 第55-58页 |
3.1 Mst1增强巨噬细胞中自噬流 | 第55-56页 |
3.2 抑制 Mst1 增强巨噬细胞自噬水平 | 第56-58页 |
4 讨论 | 第58-60页 |
第四部分 在OX-LDL干预的巨噬细胞中抑制MST1降低巨噬细胞凋亡 | 第60-65页 |
1 材料 | 第60-61页 |
1.1 实验试剂 | 第60页 |
1.2 实验仪器 | 第60-61页 |
2 方法 | 第61-62页 |
2.1 用Tunel试剂盒检测巨噬细胞凋亡 | 第61页 |
2.2 用Western blot检测Bcl-2,Bad,p136-Bad的表达含量 | 第61-62页 |
3 结果 | 第62-63页 |
3.1 抑制Mst1降低巨噬细胞凋亡指数 | 第62页 |
3.2 抑制Mst1降低巨噬细胞凋亡水平 | 第62-63页 |
4 讨论 | 第63-65页 |
小结 | 第65-66页 |
参考文献 | 第66-73页 |
个人简历和研究成果 | 第73-75页 |
致谢 | 第75页 |