摘 要 | 第5-6页 |
ABSTRACT | 第6页 |
缩 略 语 | 第8-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-27页 |
1.1 Cre/loxP位点特异性重组系统概述 | 第11-23页 |
1.1.1 位点特异性重组系统 | 第11页 |
1.1.2 Cre/loxP位点特异性重组系统 | 第11-14页 |
1.1.3 Cre重组酶结构与功能的研究 | 第14-15页 |
1.1.4 Cre重组酶的突变分析与改造 | 第15-16页 |
1.1.5 Cre重组酶的识别位点--loxP位点的研究 | 第16-17页 |
1.1.6 Cre/loxP位点特异性重组系统的应用 | 第17-22页 |
1.1.7 Cre/loxP系统安全性分析 | 第22-23页 |
1.2 绿色荧光蛋白报告基因简介 | 第23-25页 |
1.3 本论文的目的及实验研究路线 | 第25-27页 |
1.3.1 本论文的目的 | 第25-26页 |
1.3.2 实验研究路线 | 第26-27页 |
第二章 大肠杆菌中CRE酶重组活性的检测 | 第27-34页 |
引言 | 第27页 |
2.1 材料与方法 | 第27-30页 |
2.1.1 实验材料 | 第27-28页 |
2.1.2 实验方法 | 第28-30页 |
2.2 结果与讨论 | 第30-33页 |
2.2.1 转化子绿色荧光的观察 | 第30-32页 |
2.2.2 共转化子中GFP和Cre蛋白的分析 | 第32页 |
2.2.3 提取质粒的酶切鉴定 | 第32-33页 |
2.3 结论 | 第33-34页 |
第三章 农杆菌二次转化法消除植物中的标记基因 | 第34-50页 |
引言 | 第34页 |
3.1 材料与方法 | 第34-42页 |
3.1.1 实验材料 | 第34-35页 |
3.1.2 实验方法 | 第35-42页 |
3.2 结果与分析 | 第42-48页 |
3.2.1 植物转化载体结构及选择标记基因被消除后的序列分析 | 第42页 |
3.2.2 pGNG转化体的GFP绿色荧光观察 | 第42-43页 |
3.2.3 pGNG转化体的分子检测 | 第43-45页 |
3.2.4 PCR检测二次转化体中nptⅡ和gfp的消除 | 第45页 |
3.2.5 二次转化体的T1代幼苗中GFP表达的消失和GUS的表达 | 第45-46页 |
3.2.6 不含任何选择标记基因的转基因植物的获得 | 第46页 |
3.2.7 用病毒载体表达Cre消除标记基因的尝试 | 第46-48页 |
3.3 结论与展望 | 第48-50页 |
参 考 文 献 | 第50-58页 |
致 谢 | 第58-59页 |
作 者 简 介 | 第59页 |
论文发表情况 | 第59页 |