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白菜花粉发育和授粉受精相关长链非编码RNA的鉴定方法

致谢第9-13页
缩写词第13-16页
摘要第16-18页
Abstract第18-19页
前言第20-22页
1 文献综述:植物长链非编码RNA的研究进展第22-33页
    1.1 植物lncRNA的种类第22-24页
        1.1.1 与其在基因组所处位置相关的分类第22-23页
        1.1.2 按其作用的分子机制进行的分类第23-24页
    1.2 植物lncRNA相关转录酶第24-25页
    1.3 植物lncRNA参与的生物学过程第25-27页
        1.3.1 成花转变第25页
        1.3.2 花粉发育第25-26页
        1.3.3 逆境胁迫第26-27页
        1.3.4 其它生物学过程第27页
    1.4 植物lncRNA发挥功能的分子机制第27-30页
        1.4.1 信号分子第27-28页
        1.4.2 诱饵分子第28页
        1.4.3 引导分子第28-29页
        1.4.4 骨架分子第29页
        1.4.5 小RNA生物合成的前体第29-30页
    1.5 lncRNA在近缘物种间的保守性和进化研究第30-31页
    1.6 lncRNA的鉴定和表达的高通量分析第31页
    1.7 展望第31-33页
2 白菜lncRNA-BcMF11基因的序列和表达分析第33-43页
    2.1 材料与方法第33-35页
        2.1.1 植物材料第33页
        2.1.2 基因组DNA的提取第33-34页
        2.1.3 RNA的提取及cDNA的合成第34页
        2.1.4 同源序列的克隆和进化树构建第34-35页
    2.2 结果与分析第35-42页
        2.2.1 在白菜、甘蓝和黑芥的基因组中均存在多个BcMF11的同源相似序列第35-36页
        2.2.2 BcMF11同源相似序列的进化分析第36-37页
        2.2.3 BcMF11同源相似序列在白菜根中偏向性表达第37-41页
        2.2.4 在数据库中搜索相似序列的表达数据第41-42页
    2.3 讨论第42-43页
        2.3.1 BcMF11以多拷贝或基因家族的形式存在于芸薹属基本种中第42页
        2.3.2 BcMF11及其同源序列的表达可能受环境条件的影响较大第42-43页
3 白菜花粉发育和授粉受精相关lncRNA的全基因组鉴定第43-56页
    3.1 材料与方法第43-48页
        3.1.1 植物材料第43页
        3.1.2 植物组织RNA的提取第43-44页
        3.1.3 转录组测序第44页
        3.1.4 RNA-seq构建的Unigenes库里检索BcMF11及其同源相似序列第44页
        3.1.5 利用生物信息学方法进行lncRNA的筛选第44-45页
        3.1.6 白菜lncRNA的特点分析第45页
        3.1.7 cDNA的合成及半定量RT-PCR验证第45-48页
    3.2 结果与分析第48-52页
        3.2.1 RNA-seq和白菜lncRNA的筛选第48-49页
        3.2.2 在RNA-seq数据库里未检测到BcMF11及同源序列的表达第49页
        3.2.3 白菜lncRNA的长度分布第49页
        3.2.4 白菜lncRNA在染色体上的分布第49-50页
        3.2.5 白菜lncRNA的表达特点第50-51页
        3.2.6 RT-PCR验证结果第51-52页
    3.3 讨论第52-56页
        3.3.1 RNA-seq进一步验证BcMF11及同源相似序列非花蕾特异表达第52-53页
        3.3.2 基于普通转录组测序进行lncRNA鉴定是可行的第53页
        3.3.3 测序获得的lncRNA的可信度较高第53-54页
        3.3.4 白菜lncRNA的长度分布情况与其它植物类似第54页
        3.3.5 白菜各染色体均匀产生lncRNA第54页
        3.3.6 白菜lncRNA的表达具有组织及发育进程特异性第54-55页
        3.3.7 利用RT-PCR验证RNA-seq结果的可行性探讨第55-56页
4 白菜‘Bcajh97-01A/B’不育株系和可育株系花蕾不同发育阶段lncRNA的表达及差异分析第56-62页
    4.1 材料与方法第56页
    4.2 结果与分析第56-60页
        4.2.1 不育株系花蕾不同发育阶段lncRNA的表达第56-57页
        4.2.2 可育株系花蕾不同发育阶段lncRNA的表达第57-58页
        4.2.3 不育株系和可育株系花蕾lncRNA的表达差异第58-60页
    4.3 讨论第60-62页
5 白菜授粉受精过程lncRNA的表达分析第62-68页
    5.1 材料与方法第62页
    5.2 结果与分析第62-66页
        5.2.1 授粉后不同时间的雌蕊中lncRNA的表达第62-65页
        5.2.2 lncRNA在花蕾形成到授粉受精整个过程中的持续表达分析第65-66页
    5.3 讨论第66-68页
        5.3.1 花粉管在花柱道中生长时lncRNA的表达最多第66页
        5.3.2 部分lncRNA在授粉后1h时的雌蕊中的表达受抑制第66页
        5.3.3 在花粉发育和授粉受精过程持续表达的lncRNA具有重要的挖掘意义第66-68页
6 白菜lncRNA的作用机制和生物学功能预测第68-79页
    6.1 材料与方法第68-69页
        6.1.1 miRNA内源伪靶基因的预测第68-69页
        6.1.2 lncRNA靶基因预测及其共表达分析第69页
    6.2 结果与分析第69-77页
        6.2.1 可能作为miRNA内源伪靶基因其作用的lncRNA第69-72页
        6.2.2 作为miRNA内源伪靶基因的lncRNA的表达分析第72页
        6.2.3 部分lncRNA能预测出Trans类靶基因第72页
        6.2.4 lncRNA及其靶基因的表达协同性分析第72-73页
        6.2.5 从靶基因的功能注释筛选花粉发育相关的lncRNA第73-77页
    6.3 讨论第77-79页
        6.3.1 lncRNA作为miRNA内源伪靶基因起作用在植物中可能具有普遍性第77页
        6.3.2 在花粉发育过程中与靶基因协同地表达的lncRNA可能起着重要的调控作用第77-79页
7 白菜hicRNA与拟南芥IncRNA相似性比对及保守性分析第79-81页
    7.1 材料与方法第79页
    7.2 结果与分析第79-80页
    7.3 讨论第80-81页
结论第81-82页
参考文献第82-94页
附录第94-125页
作者简介第125页
硕士在读期间发表的论文第125页
硕士在读期间获得的奖励第125页

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