中文摘要 | 第9-11页 |
英文摘要 | 第11-13页 |
本论文主要创新点 | 第14-15页 |
第一章 绪论 | 第15-51页 |
1.1 引言 | 第15-16页 |
1.2 基于微流控的液滴技术 | 第16-26页 |
1.2.1 前言 | 第16页 |
1.2.2 液滴的形成 | 第16-19页 |
1.2.2.1 连续流相及表面活性剂 | 第17页 |
1.2.2.2 T型通道 | 第17-18页 |
1.2.2.3 十字聚焦 | 第18-19页 |
1.2.3 液滴操控和分选 | 第19-24页 |
1.2.3.1 液滴分裂 | 第19-20页 |
1.2.3.2 液滴融合 | 第20-21页 |
1.2.3.3 液滴内的混合 | 第21-22页 |
1.2.3.4 液滴分选 | 第22-23页 |
1.2.3.5 液滴的存储 | 第23-24页 |
1.2.4 基于液滴微流控的应用 | 第24-26页 |
1.2.4.1 微液滴在化学反应中的应用 | 第24-25页 |
1.2.4.2 微液滴在生物学中的应用 | 第25-26页 |
1.3 微流控平台上核酸适配体检测蛋白 | 第26-40页 |
1.3.1 核酸适配体与蛋白的相互作用 | 第26-29页 |
1.3.1.1 核酸适配体简介 | 第26-27页 |
1.3.1.2 凝血酶蛋白简介 | 第27-29页 |
1.3.1.3 适配体与凝血酶的相互作用 | 第29页 |
1.3.2 核酸适配体的分析应用 | 第29-36页 |
1.3.2.1 荧光分析 | 第30-33页 |
1.3.2.2 适配体免疫吸附分析 | 第33-34页 |
1.3.2.3 电化学分析 | 第34-36页 |
1.3.3 微流控平台上核酸适配体的应用 | 第36-40页 |
1.3.3.1 微流控芯片筛选适配体 | 第36-38页 |
1.3.3.2 微流控平台研究适配体与目标分析物 | 第38-40页 |
1.4 本论文的选题意义 | 第40-42页 |
1.4.1 微液滴中基因转导的研究 | 第40页 |
1.4.2 微流控芯片上适配体检测蛋白的研究 | 第40-42页 |
参考文献 | 第42-51页 |
第二章 细胞在皮升级液滴中的化学转染 | 第51-77页 |
2.1 前言 | 第51-52页 |
2.2 实验部分 | 第52-56页 |
2.2.1 仪器与试剂 | 第52-53页 |
2.2.2 芯片的制作 | 第53页 |
2.2.3 油相的选择 | 第53-54页 |
2.2.4 质粒DNA的制备 | 第54页 |
2.2.5 细胞的培养与转染 | 第54页 |
2.2.6 液滴中的基因转导 | 第54-56页 |
2.3 结果与讨论 | 第56-74页 |
2.3.1 液滴的制备 | 第56-62页 |
2.3.1.1 液滴的形成 | 第56-59页 |
2.3.1.2 液滴包裹反应物 | 第59-60页 |
2.3.1.3 流速对液滴的影响 | 第60-62页 |
2.3.2 油相对液滴稳定性及细胞活性的影响 | 第62-66页 |
2.3.3 影响转染效率的各因素 | 第66-71页 |
2.3.3.1 细胞在液滴中的停留时间 | 第66-68页 |
2.3.3.2 DNA与转染试剂浓度对转染效率的影响 | 第68-70页 |
2.3.3.3 液滴大小对转染效率的影响 | 第70-71页 |
2.3.4 液滴分选 | 第71-74页 |
2.4 结论 | 第74页 |
参考文献 | 第74-77页 |
第三章 微流控芯片上适配体检测凝血酶蛋白 | 第77-101页 |
3.1 前言 | 第77-79页 |
3.2 实验部分 | 第79-86页 |
3.2.1 仪器与试剂 | 第79-80页 |
3.2.2 芯片设计和制作 | 第80-82页 |
3.2.2.1 掩膜及模板制作 | 第80-81页 |
3.2.2.2 PDMS芯片的制作 | 第81-82页 |
3.2.3 磁珠与适配体的结合 | 第82-83页 |
3.2.4 适配体Ⅱ与凝血酶连接 | 第83页 |
3.2.5 芯片实验 | 第83-84页 |
3.2.6 清洗 | 第84-85页 |
3.2.7 检测及分析 | 第85-86页 |
3.3 结果与讨论 | 第86-98页 |
3.3.1 实验条件的优化 | 第86-92页 |
3.3.1.1 磁珠与适配体之间相互作用条件的优化 | 第86-88页 |
3.3.1.2 适配体Ⅰ链长及高温变性 | 第88-89页 |
3.3.1.3 适配体Ⅰ与凝血酶反应条件的优化 | 第89-90页 |
3.3.1.4 清洗条件的优化 | 第90-91页 |
3.3.1.5 检测系统的选择 | 第91-92页 |
3.3.2 实验数据及分析 | 第92-98页 |
3.3.2.1 凝血酶的荧光响应 | 第92-95页 |
3.3.2.2 干扰蛋白和干扰适配体的分析 | 第95-97页 |
3.3.2.3 凝血酶在血清中的测定 | 第97-98页 |
3.4 结论 | 第98页 |
参考文献 | 第98-101页 |
第四章 芯片电泳-激光诱导荧光分离检测磺胺类药物 | 第101-111页 |
4.1 前言 | 第101-102页 |
4.2 实验部分 | 第102-104页 |
4.2.1 仪器和试剂 | 第102-104页 |
4.2.2 衍生化反应 | 第104页 |
4.2.3 芯片实验 | 第104页 |
4.3 结果与讨论 | 第104-108页 |
4.3.1 衍生介质的选择 | 第104页 |
4.3.2 进样和分离电压的影响 | 第104-105页 |
4.3.3 进样时间的影响 | 第105页 |
4.3.4 运行缓冲液浓度和pH的影响 | 第105-106页 |
4.3.5 乙醇浓度的影响 | 第106-107页 |
4.3.6 线性关系,检测限,定量限和重现性 | 第107-108页 |
4.4 结论 | 第108页 |
参考文献 | 第108-111页 |
附录 | 第111-113页 |
致谢 | 第113-114页 |