摘要 | 第3-11页 |
ABSTRACT | 第11-19页 |
第一章 前言 | 第23-32页 |
1. 胚胎着床 | 第23-25页 |
1.1. 概述 | 第23页 |
1.2. 子宫内膜容受性 | 第23-24页 |
1.3. 胚胎着床的细胞生物学基础 | 第24-25页 |
2. 上皮细胞-间充质转化 | 第25-28页 |
2.1. EMT概述 | 第25-26页 |
2.2. EMT与肿瘤 | 第26页 |
2.3. EMT与胚胎植入 | 第26页 |
2.4. EMT的细胞因子调控网络 | 第26-28页 |
3. 锌指转录因子ZEB1 | 第28-32页 |
3.1. ZEB1的结构和生理功能 | 第28-29页 |
3.2. ZEB1在EMT中的调控作用 | 第29-30页 |
3.3. ZEB1与胚胎着床 | 第30-32页 |
第二章 材料与方法 | 第32-49页 |
2.1. 研究材料 | 第32-37页 |
2.1.1. 研究对象及样本采集 | 第32-33页 |
2.1.2. 主要试剂 | 第33-35页 |
2.1.3. 主要溶液配方 | 第35-36页 |
2.1.4. 实验主要仪器 | 第36-37页 |
2.2. 研究方法 | 第37-47页 |
2.2.1. 细胞实验 | 第37-38页 |
2.2.2. RNAi干扰实验 | 第38-39页 |
2.2.3. 细胞划痕实验(scratch assay) | 第39页 |
2.2.4. MTT法测定细胞生长情况 | 第39-40页 |
2.2.5. EdU法测细胞增殖率 | 第40-41页 |
2.2.6. 体外胚泡植入实验 | 第41-42页 |
2.2.7. 免疫组织化学 | 第42-43页 |
2.2.8. Real Time PCR检测相关基因的表达 | 第43-47页 |
2.3. 小鼠胚胎着床干扰实验 | 第47-48页 |
2.3.1. ZEB1反义寡核苷酸设计 | 第47页 |
2.3.2. 小鼠子宫角注射ZEB1反义寡核苷酸 | 第47页 |
2.3.3. 计数胚泡着床数量 | 第47-48页 |
2.4. 统计学分析 | 第48-49页 |
第三章 结果 | 第49-83页 |
3.1. 不同月经周期中ZEB1在子宫内膜中的表达情况 | 第49-53页 |
3.1.1. Q-PCR实验中ZEB1的PCR扩增的溶解曲线 | 第49-50页 |
3.1.2. 检测月经周期子宫内膜ZEB1 mRNA的表达情况 | 第50-53页 |
3.2. RL95-2细胞ZEB1-shRNA重组体构建及功能研究 | 第53-64页 |
3.2.1. RL95-2细胞和正常子宫内膜上皮细胞的形态 | 第53-54页 |
3.2.2. RL95-2细胞中ZEB1蛋白的表达 | 第54-55页 |
3.2.3. ZEB1-ShRNA慢病毒的构建 | 第55-64页 |
3.3. EMT标记物ZEB1、E-钙粘蛋白和波形蛋白在妊娠小鼠子宫内膜的表达 | 第64-78页 |
3.3.1. ZEB1在未孕和妊娠小鼠ZEB1的子宫内膜的表达 | 第64-69页 |
3.3.2. E-Cadherin在未孕小鼠和妊娠早期小鼠子宫内膜的表达 | 第69-74页 |
3.3.3. Vimentin在未孕小鼠和妊娠早期小鼠子宫内膜的表达 | 第74-78页 |
3.4. 体外胚胎植入 | 第78-80页 |
3.4.1. 体外胚胎植入模型的建立 | 第78-79页 |
3.4.2. 模型胚胎JAR Spheroid的粘附率 | 第79-80页 |
3.5. RNA干扰后的ZEB1在小鼠胚胎植入中功能的初步研究 | 第80-83页 |
3.5.1. ZEB1-shRNA和ZEB1-shCtrl阴性对照注射小鼠模型构建 | 第80-81页 |
3.5.2. ZEB1-shRNA对小鼠胚胎着床的影响 | 第81-83页 |
第四章 讨论 | 第83-90页 |
参考文献 | 第90-98页 |
文献综述 | 第98-114页 |
一、EMT在胚胎着床和胎盘中的作用 | 第99-101页 |
二、E-cadherin、ZEB1与ZEB2调控EMT | 第101-111页 |
(一) E-cadherin、miRNA调控EMT | 第101-104页 |
(二) ZEB1与ZEB2调控EMT | 第104-111页 |
参考文献 | 第111-114页 |
攻读学位期间成果 | 第114-115页 |
附录主要缩略语表 | 第115-116页 |
致谢 | 第116-117页 |