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锌指转录因子ZEB1促进子宫内膜EMT在胚胎着床的功能及机制

摘要第3-11页
ABSTRACT第11-19页
第一章 前言第23-32页
    1. 胚胎着床第23-25页
        1.1. 概述第23页
        1.2. 子宫内膜容受性第23-24页
        1.3. 胚胎着床的细胞生物学基础第24-25页
    2. 上皮细胞-间充质转化第25-28页
        2.1. EMT概述第25-26页
        2.2. EMT与肿瘤第26页
        2.3. EMT与胚胎植入第26页
        2.4. EMT的细胞因子调控网络第26-28页
    3. 锌指转录因子ZEB1第28-32页
        3.1. ZEB1的结构和生理功能第28-29页
        3.2. ZEB1在EMT中的调控作用第29-30页
        3.3. ZEB1与胚胎着床第30-32页
第二章 材料与方法第32-49页
    2.1. 研究材料第32-37页
        2.1.1. 研究对象及样本采集第32-33页
        2.1.2. 主要试剂第33-35页
        2.1.3. 主要溶液配方第35-36页
        2.1.4. 实验主要仪器第36-37页
    2.2. 研究方法第37-47页
        2.2.1. 细胞实验第37-38页
        2.2.2. RNAi干扰实验第38-39页
        2.2.3. 细胞划痕实验(scratch assay)第39页
        2.2.4. MTT法测定细胞生长情况第39-40页
        2.2.5. EdU法测细胞增殖率第40-41页
        2.2.6. 体外胚泡植入实验第41-42页
        2.2.7. 免疫组织化学第42-43页
        2.2.8. Real Time PCR检测相关基因的表达第43-47页
    2.3. 小鼠胚胎着床干扰实验第47-48页
        2.3.1. ZEB1反义寡核苷酸设计第47页
        2.3.2. 小鼠子宫角注射ZEB1反义寡核苷酸第47页
        2.3.3. 计数胚泡着床数量第47-48页
    2.4. 统计学分析第48-49页
第三章 结果第49-83页
    3.1. 不同月经周期中ZEB1在子宫内膜中的表达情况第49-53页
        3.1.1. Q-PCR实验中ZEB1的PCR扩增的溶解曲线第49-50页
        3.1.2. 检测月经周期子宫内膜ZEB1 mRNA的表达情况第50-53页
    3.2. RL95-2细胞ZEB1-shRNA重组体构建及功能研究第53-64页
        3.2.1. RL95-2细胞和正常子宫内膜上皮细胞的形态第53-54页
        3.2.2. RL95-2细胞中ZEB1蛋白的表达第54-55页
        3.2.3. ZEB1-ShRNA慢病毒的构建第55-64页
    3.3. EMT标记物ZEB1、E-钙粘蛋白和波形蛋白在妊娠小鼠子宫内膜的表达第64-78页
        3.3.1. ZEB1在未孕和妊娠小鼠ZEB1的子宫内膜的表达第64-69页
        3.3.2. E-Cadherin在未孕小鼠和妊娠早期小鼠子宫内膜的表达第69-74页
        3.3.3. Vimentin在未孕小鼠和妊娠早期小鼠子宫内膜的表达第74-78页
    3.4. 体外胚胎植入第78-80页
        3.4.1. 体外胚胎植入模型的建立第78-79页
        3.4.2. 模型胚胎JAR Spheroid的粘附率第79-80页
    3.5. RNA干扰后的ZEB1在小鼠胚胎植入中功能的初步研究第80-83页
        3.5.1. ZEB1-shRNA和ZEB1-shCtrl阴性对照注射小鼠模型构建第80-81页
        3.5.2. ZEB1-shRNA对小鼠胚胎着床的影响第81-83页
第四章 讨论第83-90页
参考文献第90-98页
文献综述第98-114页
    一、EMT在胚胎着床和胎盘中的作用第99-101页
    二、E-cadherin、ZEB1与ZEB2调控EMT第101-111页
        (一) E-cadherin、miRNA调控EMT第101-104页
        (二) ZEB1与ZEB2调控EMT第104-111页
    参考文献第111-114页
攻读学位期间成果第114-115页
附录主要缩略语表第115-116页
致谢第116-117页

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