中文摘要 | 第3-7页 |
Abstract | 第7-11页 |
英文缩写一览表 | 第15-17页 |
前言 | 第17-25页 |
参考文献 | 第19-25页 |
第一部分 Galectin-1和EMT标志物在胃腺癌组织中的表达、相关性及临床意义和Galectin-1在胃腺癌细胞系中的表达研究 | 第25-51页 |
1 材料与方法 | 第25-36页 |
1.1 病例资料 | 第25页 |
1.2 细胞来源 | 第25-26页 |
1.3 主要仪器 | 第26页 |
1.4 耗材和试剂 | 第26-28页 |
1.5 主要溶液配制 | 第28-29页 |
1.6 免疫组化方法 | 第29-30页 |
1.7 细胞培养 | 第30-31页 |
1.8 细胞总蛋白的提取 | 第31页 |
1.9 制作标准曲线 | 第31页 |
1.10 细胞总蛋白定量 | 第31-32页 |
1.11 细胞总蛋白变性 | 第32页 |
1.12 Western blot方法 | 第32-33页 |
1.13 实时荧光定量PCR(real time RT PCR)方法 | 第33-36页 |
1.14 统计学方法 | 第36页 |
2. 结果 | 第36-41页 |
2.1 Gal-1、E-cadherin和vimentin蛋白在胃腺癌组织和正常胃粘膜中的表达 | 第36-40页 |
2.2 Gal-1,E-cadherin和vimentin蛋白表达与胃腺癌患者临床病理特征之间的关系 | 第40页 |
2.3 胃腺癌组织中Gal-1表达与E-cadherin,vimentin表达的相关性 | 第40-41页 |
2.4 Western blot和实时荧光定量PCR检测Gal-1表达水平在胃腺癌细胞系中的表达情况 | 第41页 |
3. 讨论 | 第41-45页 |
4 小结 | 第45页 |
参考文献 | 第45-51页 |
第二部分 Galectin-1通过Hedgehog通路调控胃腺癌细胞上皮间质转化的作用研究 | 第51-98页 |
1 材料与方法 | 第52-80页 |
1.1 细胞来源 | 第52页 |
1.2 主要仪器 | 第52-53页 |
1.3 耗材和试剂 | 第53-55页 |
1.4 Galectin-1过表达慢病毒载体构建 | 第55-69页 |
1.5 构建Galectin-1 shRNA慢病毒 | 第69-77页 |
1.6 慢病毒感染细胞 | 第77-78页 |
1.7 细胞培养 | 第78页 |
1.8 Western blot方法 | 第78页 |
1.9 实时荧光定量PCR(real time RT PCR)方法 | 第78-79页 |
1.10 Matrigel invasion实验 | 第79页 |
1.11 酶联免疫吸附试验(ELISA)检测LV-Gal-1细胞上清液中Galectin-1蛋白含量 | 第79-80页 |
1.12 统计学方法 | 第80页 |
2 结果 | 第80-87页 |
2.1 构建LV-Gall-shRNA,LV-Gal-1及其相应对照载体稳定感染的MGC-803和MKN-74细胞系 | 第80-81页 |
2.2 Gal-1表达水平影响胃腺癌细胞的体外侵袭转移能力 | 第81-82页 |
2.3 Gal-1诱导胃腺癌细胞发生EMT | 第82-84页 |
2.4 Gal-1通过激活胃腺癌细胞中的Hedgehog信号通路调节EMT表达变化的影响 | 第84-85页 |
2.5 内源性Gal-1通过激活Gli-1诱导胃腺癌细胞发生EMT | 第85-87页 |
3 讨论 | 第87-90页 |
4 小结 | 第90页 |
参考文献 | 第90-98页 |
第三部分 双氢青蒿素对Galectin-1诱导的人胃腺癌细胞上皮间质转化影响 | 第98-113页 |
1 材料与方法 | 第99-103页 |
1.1 药品 | 第99页 |
1.2 细胞 | 第99页 |
1.3 仪器 | 第99-100页 |
1.4 耗材和试剂 | 第100-102页 |
1.5 细胞培养 | 第102页 |
1.6 细胞活力实验(MTT法) | 第102页 |
1.7 伤口愈合实验 | 第102-103页 |
1.8 Matrigel invasion实验 | 第103页 |
1.9 Western blot实验 | 第103页 |
1.10 real time RT PCR实验 | 第103页 |
2 结果 | 第103-106页 |
2.1 DHA抑制了胃腺癌细胞的活性 | 第103-104页 |
2.2 DHA作用下MGC-803细胞形态的变化 | 第104页 |
2.3 DHA抑制Gal-1诱导的MGC-803细胞的侵袭和迁移 | 第104-106页 |
2.4 DHA抑制Gal-1诱导的MGC-803细胞EMT | 第106页 |
3 讨论 | 第106-108页 |
4 小结 | 第108-109页 |
参考文献 | 第109-113页 |
附录 综述 Galectin-1在恶性肿瘤中的研究进展 | 第113-133页 |
参考文献 | 第123-133页 |
致谢 | 第133-134页 |
攻读博士期间以第一作者发表论文目录 | 第134-135页 |