| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-17页 |
| 1 绪论 | 第17-36页 |
| ·课题背景 | 第17-18页 |
| ·课题来源 | 第17页 |
| ·课题的目的和意义 | 第17-18页 |
| ·国内外研究进展 | 第18-35页 |
| ·桑黄的研究概况 | 第18-21页 |
| ·灵芝的研究概况 | 第21-26页 |
| ·黑木耳研究概况 | 第26-28页 |
| ·药用真菌与癌症治疗 | 第28-30页 |
| ·线粒体凋亡通路 | 第30-35页 |
| ·研究的主要内容 | 第35-36页 |
| 2 桑黄多糖抑制肝癌细胞增殖以及诱导细胞凋亡的作用 | 第36-52页 |
| ·实验材料与仪器 | 第36-39页 |
| ·材料 | 第36页 |
| ·试剂 | 第36-37页 |
| ·仪器 | 第37页 |
| ·试剂配制及培养基 | 第37-39页 |
| ·实验方法 | 第39-42页 |
| ·细胞培养 | 第39页 |
| ·桑黄多糖的提取及含量测定 | 第39-40页 |
| ·小鼠淋巴细胞增值率测定 | 第40-41页 |
| ·桑黄多糖分离与纯化 | 第41页 |
| ·细胞增殖试验 | 第41页 |
| ·细胞活力试验 | 第41页 |
| ·软琼脂克隆试验 | 第41页 |
| ·细胞粘附试验 | 第41-42页 |
| ·细胞侵袭试验 | 第42页 |
| ·细胞周期检测试验 | 第42页 |
| ·数据统计学分析 | 第42页 |
| ·结果与分析 | 第42-49页 |
| ·桑黄粗多糖的提取分离 | 第42-44页 |
| ·小鼠淋巴细胞增值率测定 | 第44页 |
| ·粗多糖PLP60的纯化 | 第44-45页 |
| ·PLP60-B1组分对HepG2细胞增殖的抑制作用 | 第45-47页 |
| ·软琼脂克隆试验 | 第47页 |
| ·多糖PLP60-B1组分对HepG2细胞粘附和侵袭的抑制作用 | 第47-48页 |
| ·流式细胞术检测HepG2细胞周期分布 | 第48-49页 |
| ·讨论 | 第49-50页 |
| ·本章小结 | 第50-52页 |
| 3 桑黄多糖对EHV-1疫苗免疫Balb/c鼠的免疫调节作用 | 第52-66页 |
| ·实验材料与仪器 | 第53-54页 |
| ·材料 | 第53页 |
| ·试剂与培养基 | 第53-54页 |
| ·仪器 | 第54页 |
| ·实验方法 | 第54-60页 |
| ·桑黄多糖的提取 | 第54页 |
| ·疫苗EHV-1的制备 | 第54-56页 |
| ·病毒TCID_(50)测定 | 第56-57页 |
| ·动物分组及处理 | 第57页 |
| ·抗体效价的测定 | 第57-59页 |
| ·T淋巴细胞亚群的检测 | 第59页 |
| ·肺脏的病理观察 | 第59页 |
| ·人工感染Balb/c小鼠病毒检测 | 第59-60页 |
| ·结果与分析 | 第60-64页 |
| ·桑黄多糖(PL)对EHV-1抗体效价的影响 | 第60-61页 |
| ·桑黄多糖(PL)对外周血CD3~+淋巴细胞的影响 | 第61页 |
| ·桑黄多糖(PL)对外周血CD4~+/CD8~+比值的影响 | 第61-62页 |
| ·病理切片HE染色结果分析 | 第62-63页 |
| ·攻毒后病毒检测情况 | 第63-64页 |
| ·讨论 | 第64-65页 |
| ·本章小结 | 第65-66页 |
| 4 真菌多糖抑制肝癌细胞增殖信号通路的初探 | 第66-84页 |
| ·实验材料 | 第67-68页 |
| ·试验材料 | 第67页 |
| ·试验试剂 | 第67页 |
| ·抗体 | 第67-68页 |
| ·实验仪器 | 第68页 |
| ·试剂配制及培养基 | 第68页 |
| ·实验方法 | 第68-72页 |
| ·细胞培养 | 第68-69页 |
| ·桑黄、灵芝和黑木耳多糖提取及含量测定 | 第69页 |
| ·细胞增殖试验 | 第69页 |
| ·细胞软琼脂克隆试验 | 第69页 |
| ·电镜(TEM)试验 | 第69页 |
| ·流式细胞术分析 | 第69-70页 |
| ·细胞周期检测 | 第70页 |
| ·蛋白质免疫印迹 | 第70-72页 |
| ·结果与分析 | 第72-80页 |
| ·真菌多糖对HepG2细胞增殖的抑制作用 | 第72-73页 |
| ·真菌多糖对HepG2和Bel-7404细胞增殖的软琼脂试验 | 第73-74页 |
| ·真菌多糖诱导HepG2和Bel-7404细胞凋亡试验 | 第74-75页 |
| ·电镜观察真菌多糖诱导HepG2和Bel-7404细胞凋亡 | 第75页 |
| ·细胞周期试验 | 第75-77页 |
| ·HepG2和Bel-7404细胞中p21~(Cip1),p27~(Kip1)和cyclin/CDK的水平 | 第77-78页 |
| ·HepG2和Bel-7404细胞中P13K/PTEN/AKT途径的表达水平 | 第78-79页 |
| ·HepG2和Bel-7404细胞中线粒体途径的表达水平 | 第79-80页 |
| ·讨论 | 第80-82页 |
| ·本章小结 | 第82-84页 |
| 5 真菌多糖调控HepG2细胞差异表达蛋白的鉴定与分析 | 第84-102页 |
| ·实验材料与仪器 | 第84-85页 |
| ·试验材料 | 第84页 |
| ·试验试剂 | 第84页 |
| ·实验仪器 | 第84-85页 |
| ·实验方法 | 第85-87页 |
| ·双向电泳的样品制备 | 第85页 |
| ·跑胶 | 第85页 |
| ·蛋白点分析 | 第85-86页 |
| ·质谱的分析和鉴定 | 第86页 |
| ·Western blot鉴定 | 第86页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第86-87页 |
| ·结果与分析 | 第87-99页 |
| ·总蛋白质的表达谱 | 第87-88页 |
| ·Imaging Master 2D凝胶图像分析 | 第88-89页 |
| ·蛋白差异点的质谱鉴定 | 第89-93页 |
| ·差异表达蛋白质细胞定位 | 第93页 |
| ·验证试验 | 第93-99页 |
| ·讨论 | 第99-100页 |
| ·本章小结 | 第100-102页 |
| 结论 | 第102-104页 |
| 参考文献 | 第104-118页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第118-119页 |
| 致谢 | 第119-120页 |