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核酸探针信号转换及放大新方法研究

摘要第5-8页
Abstract第8-10页
目录第12-17页
第1章 绪论第17-36页
    1.1 引言第17页
    1.2 几种典型的核酸探针第17-20页
        1.2.1 TaqMan探针第17-18页
        1.2.2 相邻探针第18-19页
        1.2.3 Padlock探针第19页
        1.2.4 阴阳探针第19-20页
        1.2.5 分子信标第20页
    1.3 功能化核酸探针第20-23页
        1.3.1 核酸适体探针第20-21页
        1.3.2 核酶探针第21-23页
        1.3.3 基于“T-Hg~(2+)-T”和“C-Ag+-C”结构的核酸探针第23页
    1.4 常见的信号输出手段第23-28页
        1.4.1 荧光方法第24-25页
        1.4.2 比色方法第25-26页
        1.4.3 电化学方法第26-27页
        1.4.4 表面增强拉曼散射方法第27-28页
    1.5 核酸探针中的信号放大技术第28-34页
        1.5.1 基于核酸工具酶的信号放大第28-32页
        1.5.2 基于纳米材料的信号放大技术第32-33页
        1.5.3 基于DNA自组装的信号放大技术第33-34页
    1.6 本论文的构想第34-36页
第2章 基于构象转换的核酸探针用于SNP免标记放大检测第36-44页
    2.1 引言第36页
    2.2 实验部分第36-38页
        2.2.1 试剂与仪器第36-37页
        2.2.2 实验方法第37-38页
    2.3 结果与讨论第38-43页
        2.3.1 核酸传感体系的构建第38页
        2.3.2 探针的设计第38-39页
        2.3.3 实验可行性的考察第39-40页
        2.3.4 探针的优化第40页
        2.3.5 聚合酶作用时间的优化第40-41页
        2.3.6 定量分析第41-42页
        2.3.7 单碱基错配的检测第42-43页
    2.4 小结第43-44页
第3章 基于主客体作用的核酸探针用于生物分子检测第44-53页
    3.1 引言第44页
    3.2 实验部分第44-45页
        3.2.1 试剂和仪器第44-45页
        3.2.2 实验方法第45页
    3.3 结果与讨论第45-52页
        3.3.1 检测原理第45-46页
        3.3.2 环糊精种类的选择第46页
        3.3.3 环糊精浓度的优化第46-47页
        3.3.4 离子强度的优化第47-48页
        3.3.5 环糊精对分子信标热稳定性的调控第48页
        3.3.6 环糊精调控体系对目标DNA杂交过程的动力学扫描第48-49页
        3.3.7 环糊精调控体系对目标DNA的响应情况第49-50页
        3.3.8 单核苷多态性测定和响应特异性第50-51页
        3.3.9 凝血酶的检测第51-52页
    3.4 小结第52-53页
第4章 基于三链结构的核酸探针用于生物分子的稳态荧光检测第53-61页
    4.1 引言第53页
    4.2 实验部分第53-54页
        4.2.1 试剂和仪器第53-54页
        4.2.2 实验方法第54页
    4.3 结果与讨论第54-60页
        4.3.1 检测机理第54-55页
        4.3.2 三链分子信标的形成第55-56页
        4.3.3 pH的优化第56-57页
        4.3.4 捕获探针序列的优化第57页
        4.3.5 捕获探针与目标物结合能力的测定第57-58页
        4.3.6 凝血酶的检测第58-59页
        4.3.7 通用性检测第59-60页
    4.4 小结第60-61页
第5章 通用型三链分子开关结合时间分辨技术实现复杂体系中汞离子的检测第61-70页
    5.1 前言第61页
    5.2 实验部分第61-62页
        5.2.1 试剂和仪器第61-62页
        5.2.2 实验方法第62页
    5.3 结果与讨论第62-69页
        5.3.1 Hg~(2)+对芘二聚体荧光影响第62-63页
        5.3.2 设计机理第63-64页
        5.3.3 捕获探针序列长度的优化第64-65页
        5.3.4 检测条件的优化第65页
        5.3.5 缓冲溶液中Hg~(2+)的检测第65页
        5.3.6 选择性的考察第65-66页
        5.3.7 复杂体系中Hg~(2+)的检测第66-68页
        5.3.8 尿样中Hg~(2+)的检测第68-69页
    5.4 小结第69-70页
第6章 基于通用型三链分子探针构建可再生拉曼增强基底第70-80页
    6.1 引言第70页
    6.2 实验部分第70-72页
        6.2.1 试剂与仪器第70-71页
        6.2.2 实验方法第71-72页
    6.3 结果与讨论第72-79页
        6.3.1 设计机理第72-73页
        6.3.2 功能化银纳米颗粒的表征第73-74页
        6.3.3 AFM表征三链分子开关在基底上的形成第74-75页
        6.3.4 实验条件优化第75-76页
        6.3.5 可行性分析第76-77页
        6.3.6 可再生性分析第77-78页
        6.3.7 ATP检测分析第78-79页
    6.4 小结第79-80页
第7章 基于三链分子开关结合HCR反应构建通用型拉曼检测平台第80-94页
    7.1 前言第80-81页
    7.2 实验部分第81-83页
        7.2.1 试剂与仪器第81页
        7.2.2 实验方法第81-83页
        7.2.3 细胞流式测定第83页
    7.3 结果与讨论第83-93页
        7.3.1 设计机理第83-84页
        7.3.2 HCR反应的验证第84-85页
        7.3.3 金纳米颗粒的表征及表面功能化第85-86页
        7.3.4 基于HCR反应构建SERS基底第86-87页
        7.3.5 实验可行性的考察第87-89页
        7.3.6 凝血酶的检测第89-90页
        7.3.7 腺苷的检测第90-91页
        7.3.8 肿瘤细胞的检测第91-93页
    7.4 小结第93-94页
第8章 基于HCR构建核酸传感平台用于药物的输送及肿瘤的高效治疗第94-109页
    8.1 前言第94-95页
    8.2 实验部分第95-96页
        8.2.1 试剂及仪器第95页
        8.2.2 金纳米颗粒的合成第95页
        8.2.3 琼脂糖凝胶电泳第95页
        8.2.4 细胞培养及处理第95页
        8.2.5 流式细胞术表征第95-96页
        8.2.6 细胞内在化的考察第96页
        8.2.7 细胞毒性实验第96页
    8.3 结果与讨论第96-107页
        8.3.1 设计机理第96-97页
        8.3.2 金纳米颗粒修饰DNA前后UV-vis吸收光谱第97页
        8.3.3 尺寸可控的金纳米颗粒/SNA的表征第97-99页
        8.3.4 AS1411/磁纳米颗粒/SNA的构建第99-101页
        8.3.5 AS1411/磁纳米颗粒/SNA稳定性的考察第101页
        8.3.6 TMPyP_4的装载及释放第101-102页
        8.3.7 细胞的靶向识别第102-103页
        8.3.8 AS1411/磁纳米颗粒/SNA的内在化第103-104页
        8.3.9 TMPyP_4/AS1411/磁纳米颗粒/SNA的靶向肿瘤治疗第104-105页
        8.3.10 通用性验证第105-107页
    8.4 小结第107-109页
结论第109-111页
参考文献第111-132页
附录A 攻读学位期间发表学术论文第132-135页
致谢第135-136页

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