摘要 | 第5-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
目录 | 第12-17页 |
第1章 绪论 | 第17-36页 |
1.1 引言 | 第17页 |
1.2 几种典型的核酸探针 | 第17-20页 |
1.2.1 TaqMan探针 | 第17-18页 |
1.2.2 相邻探针 | 第18-19页 |
1.2.3 Padlock探针 | 第19页 |
1.2.4 阴阳探针 | 第19-20页 |
1.2.5 分子信标 | 第20页 |
1.3 功能化核酸探针 | 第20-23页 |
1.3.1 核酸适体探针 | 第20-21页 |
1.3.2 核酶探针 | 第21-23页 |
1.3.3 基于“T-Hg~(2+)-T”和“C-Ag+-C”结构的核酸探针 | 第23页 |
1.4 常见的信号输出手段 | 第23-28页 |
1.4.1 荧光方法 | 第24-25页 |
1.4.2 比色方法 | 第25-26页 |
1.4.3 电化学方法 | 第26-27页 |
1.4.4 表面增强拉曼散射方法 | 第27-28页 |
1.5 核酸探针中的信号放大技术 | 第28-34页 |
1.5.1 基于核酸工具酶的信号放大 | 第28-32页 |
1.5.2 基于纳米材料的信号放大技术 | 第32-33页 |
1.5.3 基于DNA自组装的信号放大技术 | 第33-34页 |
1.6 本论文的构想 | 第34-36页 |
第2章 基于构象转换的核酸探针用于SNP免标记放大检测 | 第36-44页 |
2.1 引言 | 第36页 |
2.2 实验部分 | 第36-38页 |
2.2.1 试剂与仪器 | 第36-37页 |
2.2.2 实验方法 | 第37-38页 |
2.3 结果与讨论 | 第38-43页 |
2.3.1 核酸传感体系的构建 | 第38页 |
2.3.2 探针的设计 | 第38-39页 |
2.3.3 实验可行性的考察 | 第39-40页 |
2.3.4 探针的优化 | 第40页 |
2.3.5 聚合酶作用时间的优化 | 第40-41页 |
2.3.6 定量分析 | 第41-42页 |
2.3.7 单碱基错配的检测 | 第42-43页 |
2.4 小结 | 第43-44页 |
第3章 基于主客体作用的核酸探针用于生物分子检测 | 第44-53页 |
3.1 引言 | 第44页 |
3.2 实验部分 | 第44-45页 |
3.2.1 试剂和仪器 | 第44-45页 |
3.2.2 实验方法 | 第45页 |
3.3 结果与讨论 | 第45-52页 |
3.3.1 检测原理 | 第45-46页 |
3.3.2 环糊精种类的选择 | 第46页 |
3.3.3 环糊精浓度的优化 | 第46-47页 |
3.3.4 离子强度的优化 | 第47-48页 |
3.3.5 环糊精对分子信标热稳定性的调控 | 第48页 |
3.3.6 环糊精调控体系对目标DNA杂交过程的动力学扫描 | 第48-49页 |
3.3.7 环糊精调控体系对目标DNA的响应情况 | 第49-50页 |
3.3.8 单核苷多态性测定和响应特异性 | 第50-51页 |
3.3.9 凝血酶的检测 | 第51-52页 |
3.4 小结 | 第52-53页 |
第4章 基于三链结构的核酸探针用于生物分子的稳态荧光检测 | 第53-61页 |
4.1 引言 | 第53页 |
4.2 实验部分 | 第53-54页 |
4.2.1 试剂和仪器 | 第53-54页 |
4.2.2 实验方法 | 第54页 |
4.3 结果与讨论 | 第54-60页 |
4.3.1 检测机理 | 第54-55页 |
4.3.2 三链分子信标的形成 | 第55-56页 |
4.3.3 pH的优化 | 第56-57页 |
4.3.4 捕获探针序列的优化 | 第57页 |
4.3.5 捕获探针与目标物结合能力的测定 | 第57-58页 |
4.3.6 凝血酶的检测 | 第58-59页 |
4.3.7 通用性检测 | 第59-60页 |
4.4 小结 | 第60-61页 |
第5章 通用型三链分子开关结合时间分辨技术实现复杂体系中汞离子的检测 | 第61-70页 |
5.1 前言 | 第61页 |
5.2 实验部分 | 第61-62页 |
5.2.1 试剂和仪器 | 第61-62页 |
5.2.2 实验方法 | 第62页 |
5.3 结果与讨论 | 第62-69页 |
5.3.1 Hg~(2)+对芘二聚体荧光影响 | 第62-63页 |
5.3.2 设计机理 | 第63-64页 |
5.3.3 捕获探针序列长度的优化 | 第64-65页 |
5.3.4 检测条件的优化 | 第65页 |
5.3.5 缓冲溶液中Hg~(2+)的检测 | 第65页 |
5.3.6 选择性的考察 | 第65-66页 |
5.3.7 复杂体系中Hg~(2+)的检测 | 第66-68页 |
5.3.8 尿样中Hg~(2+)的检测 | 第68-69页 |
5.4 小结 | 第69-70页 |
第6章 基于通用型三链分子探针构建可再生拉曼增强基底 | 第70-80页 |
6.1 引言 | 第70页 |
6.2 实验部分 | 第70-72页 |
6.2.1 试剂与仪器 | 第70-71页 |
6.2.2 实验方法 | 第71-72页 |
6.3 结果与讨论 | 第72-79页 |
6.3.1 设计机理 | 第72-73页 |
6.3.2 功能化银纳米颗粒的表征 | 第73-74页 |
6.3.3 AFM表征三链分子开关在基底上的形成 | 第74-75页 |
6.3.4 实验条件优化 | 第75-76页 |
6.3.5 可行性分析 | 第76-77页 |
6.3.6 可再生性分析 | 第77-78页 |
6.3.7 ATP检测分析 | 第78-79页 |
6.4 小结 | 第79-80页 |
第7章 基于三链分子开关结合HCR反应构建通用型拉曼检测平台 | 第80-94页 |
7.1 前言 | 第80-81页 |
7.2 实验部分 | 第81-83页 |
7.2.1 试剂与仪器 | 第81页 |
7.2.2 实验方法 | 第81-83页 |
7.2.3 细胞流式测定 | 第83页 |
7.3 结果与讨论 | 第83-93页 |
7.3.1 设计机理 | 第83-84页 |
7.3.2 HCR反应的验证 | 第84-85页 |
7.3.3 金纳米颗粒的表征及表面功能化 | 第85-86页 |
7.3.4 基于HCR反应构建SERS基底 | 第86-87页 |
7.3.5 实验可行性的考察 | 第87-89页 |
7.3.6 凝血酶的检测 | 第89-90页 |
7.3.7 腺苷的检测 | 第90-91页 |
7.3.8 肿瘤细胞的检测 | 第91-93页 |
7.4 小结 | 第93-94页 |
第8章 基于HCR构建核酸传感平台用于药物的输送及肿瘤的高效治疗 | 第94-109页 |
8.1 前言 | 第94-95页 |
8.2 实验部分 | 第95-96页 |
8.2.1 试剂及仪器 | 第95页 |
8.2.2 金纳米颗粒的合成 | 第95页 |
8.2.3 琼脂糖凝胶电泳 | 第95页 |
8.2.4 细胞培养及处理 | 第95页 |
8.2.5 流式细胞术表征 | 第95-96页 |
8.2.6 细胞内在化的考察 | 第96页 |
8.2.7 细胞毒性实验 | 第96页 |
8.3 结果与讨论 | 第96-107页 |
8.3.1 设计机理 | 第96-97页 |
8.3.2 金纳米颗粒修饰DNA前后UV-vis吸收光谱 | 第97页 |
8.3.3 尺寸可控的金纳米颗粒/SNA的表征 | 第97-99页 |
8.3.4 AS1411/磁纳米颗粒/SNA的构建 | 第99-101页 |
8.3.5 AS1411/磁纳米颗粒/SNA稳定性的考察 | 第101页 |
8.3.6 TMPyP_4的装载及释放 | 第101-102页 |
8.3.7 细胞的靶向识别 | 第102-103页 |
8.3.8 AS1411/磁纳米颗粒/SNA的内在化 | 第103-104页 |
8.3.9 TMPyP_4/AS1411/磁纳米颗粒/SNA的靶向肿瘤治疗 | 第104-105页 |
8.3.10 通用性验证 | 第105-107页 |
8.4 小结 | 第107-109页 |
结论 | 第109-111页 |
参考文献 | 第111-132页 |
附录A 攻读学位期间发表学术论文 | 第132-135页 |
致谢 | 第135-136页 |