| 摘要 | 第2-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 本文缩略词及中英文对照 | 第9-15页 |
| 第1章 绪论 | 第15-25页 |
| 1.1 植物氮素营养概述 | 第15-18页 |
| 1.1.1 植物根系对氮素的吸收 | 第15-16页 |
| 1.1.2 植物对氮素的同化 | 第16-17页 |
| 1.1.3 不同铵硝配比对作物产量和品质的影响 | 第17-18页 |
| 1.2 植物铵离子转运蛋白（AMT）研究进展 | 第18-21页 |
| 1.2.1 植物铵离子转运蛋白（AMT）的分离与鉴定 | 第18页 |
| 1.2.2 植物铵离子转运蛋白基因的转录调控 | 第18-19页 |
| 1.2.3 植物NH4+信号研究进展 | 第19-21页 |
| 1.3 转录组学研究进展及其在氮素代谢研究中的应用 | 第21-22页 |
| 1.3.1 转录组学及其研究方法 | 第21-22页 |
| 1.3.2 高通量测序在植物氮素代谢上的应用 | 第22页 |
| 1.4 植物瞬时表达系统在基因功能研究中的应用 | 第22-23页 |
| 1.5 本研究的目的和意义 | 第23-25页 |
| 第2章 菜心铵转运蛋白基因Bc AMT1s的克隆及表达特性分析 | 第25-49页 |
| 2.1 引言 | 第25页 |
| 2.2 材料与方法 | 第25-39页 |
| 2.2.1 试验材料 | 第25-29页 |
| 2.2.2 实验方法 | 第29-33页 |
| 2.2.3 菜心Bc AMT1s蛋白的酵母功能互补实验 | 第33-36页 |
| 2.2.4 菜心Bc AMT1s基因洋葱表皮亚细胞定位 | 第36-38页 |
| 2.2.5 利用q RT-PCR分析菜心Bc AMT1s基因的器官表达特异性 | 第38页 |
| 2.2.6 利用q RT-PCR分析菜心Bc AMT1s基因表达的昼夜节律 | 第38-39页 |
| 2.3 结果与分析 | 第39-46页 |
| 2.3.1 菜心RNA样品的检测 | 第39页 |
| 2.3.2 菜心Bc AMT1s基因的克隆 | 第39-40页 |
| 2.3.3 菜心Bc AMT1s基因的生物信息学分析 | 第40-42页 |
| 2.3.4 菜心Bc AMT1s基因亚细胞定位 | 第42-43页 |
| 2.3.5 菜心Bc AMT1s酵母功能互补实验 | 第43-44页 |
| 2.3.6 菜心Bc AMT1s基因的器官特异性表达分析 | 第44-45页 |
| 2.3.7 菜心Bc AMT1s基因的昼夜周期表达特性分析 | 第45-46页 |
| 2.4 讨论 | 第46-48页 |
| 2.5 小结 | 第48-49页 |
| 第3章 不同氮素处理对菜心Bc AMT1s基因表达的影响 | 第49-61页 |
| 3.1 引言 | 第49页 |
| 3.2 实验材料与方法 | 第49-51页 |
| 3.2.1 试验材料及培养 | 第49页 |
| 3.2.2 实验处理 | 第49-51页 |
| 3.2.3 实验方法 | 第51页 |
| 3.3 结果与分析 | 第51-59页 |
| 3.3.1 缺氮对菜心Bc AMT1s基因表达的影响 | 第51-52页 |
| 3.3.2 外源供应NO_3~-对菜心Bc AMT1s基因表达的影响 | 第52-53页 |
| 3.3.3 外源供应NH_4~+对菜心Bc AMT1s基因表达的影响 | 第53-54页 |
| 3.3.4 不同铵硝配比对菜心Bc AMT1s基因表达的影响 | 第54-55页 |
| 3.3.5 不同铵硝比长期处理对菜心生长及Bc AMT1s基因表达的影响 | 第55-59页 |
| 3.4 讨论 | 第59-60页 |
| 3.5 小结 | 第60-61页 |
| 第4章 菜心瞬时表达系统的建立 | 第61-71页 |
| 4.1 前言 | 第61页 |
| 4.2 材料与方法 | 第61-65页 |
| 4.2.1 试验材料及培养 | 第61-62页 |
| 4.2.2 载体构建 | 第62页 |
| 4.2.3 转基因表达载体导入农杆菌细胞 | 第62页 |
| 4.2.4 菜心瞬时表达系统的基本转化过程 | 第62-63页 |
| 4.2.5 菜心根系吸收法瞬时表达系统在VIGS上的适用性 | 第63-64页 |
| 4.2.6 菜心总RNA的提取与检测 | 第64页 |
| 4.2.7 q RT-PCR实验及分析方法 | 第64页 |
| 4.2.8 15N同位素实验及分析方法 | 第64-65页 |
| 4.3 结果与分析 | 第65-69页 |
| 4.3.1 菜心瞬时表达系统的建立与优化 | 第65-68页 |
| 4.3.2 瞬时超表达Bc AMT1;3 对根系Bc AMT、Bc NRT基因表达及氮素吸收的影响 | 第68-69页 |
| 4.3.3 抑制Bc AMT1;3 表达对根系Bc AMT、Bc NRT基因表达及氮素吸收的影响 | 第69页 |
| 4.4 讨论 | 第69-70页 |
| 4.5 小结 | 第70-71页 |
| 第5章 不同铵硝配比下菜心根系转录组分析 | 第71-93页 |
| 5.1 引言 | 第71页 |
| 5.2 材料与方法 | 第71-76页 |
| 5.2.1 试验材料 | 第71-72页 |
| 5.2.2 试验处理 | 第72页 |
| 5.2.3 菜心根系总RNA的提取以及质量检测 | 第72页 |
| 5.2.4 菜心根系转录组测序和数据处理 | 第72-73页 |
| 5.2.5 菜心根系数字基因表达谱测序和数据处理 | 第73-74页 |
| 5.2.6 实时荧光定量PCR（q RT-PCR）分析 | 第74-75页 |
| 5.2.7 数据共享 | 第75-76页 |
| 5.3 结果与分析 | 第76-89页 |
| 5.3.1 菜心根系总RNA样品检测 | 第76-77页 |
| 5.3.2 RNA-Seq测序及组装质量评估 | 第77-78页 |
| 5.3.3 Unigene的功能注释 | 第78-82页 |
| 5.3.4 差异表达基因筛选与分析 | 第82-84页 |
| 5.3.5 氮素代谢相关基因的表达模式分析 | 第84-86页 |
| 5.3.6 植物激素传导途径差异表达基因的表达分析 | 第86-87页 |
| 5.3.7 参与氮素代谢调控的转录因子表达模式分析 | 第87-88页 |
| 5.3.8 实时荧光定量PCR验证转录组测序结果 | 第88-89页 |
| 5.4 讨论 | 第89-92页 |
| 5.5 小结 | 第92-93页 |
| 第6章 全文总结 | 第93-96页 |
| 6.1 主要结论 | 第93-94页 |
| 6.2 创新点 | 第94页 |
| 6.3 展望 | 第94-96页 |
| 致谢 | 第96-97页 |
| 参考文献 | 第97-108页 |
| 附录 | 第108页 |
