摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-7页 |
1 前言 | 第12-18页 |
1.1 细菌耐药机制简介 | 第12-15页 |
1.2 氨基糖苷类药物耐药性及 16S rRNA甲基化酶的发现历程 | 第15-17页 |
1.3 16S rRNA甲基化酶特征及流行现状 | 第17-18页 |
2 材料与方法 | 第18-41页 |
2.1 材料 | 第18-23页 |
2.1.1 受试菌株 | 第18页 |
2.1.2 培养基 | 第18-19页 |
2.1.3 主要试剂 | 第19页 |
2.1.4 主要溶液的配制 | 第19-22页 |
2.1.5 主要仪器与设备 | 第22页 |
2.1.6 药物 | 第22-23页 |
2.2 方法 | 第23-41页 |
2.2.1 细菌的复苏、鉴定与保存 | 第23-24页 |
2.2.2 耐药表型的筛选 | 第24页 |
2.2.3 16S rRNA甲基化酶基因的检测 | 第24-25页 |
2.2.4 16S rRNA甲基化酶阳性菌对14种抗菌药的敏感性实验 | 第25-26页 |
2.2.5 脉冲场凝胶电泳(PFGE) | 第26-29页 |
2.2.6 接合转移 | 第29-30页 |
2.2.7 接合子ESBLs基因检测及鉴定 | 第30-32页 |
2.2.8 接合子质粒复制子分型 | 第32-34页 |
2.2.9 质粒抽提 | 第34-36页 |
2.2.10 接合子质粒的酶切分析 | 第36页 |
2.2.11 S1-PFGE | 第36-39页 |
2.2.12 Southern杂交 | 第39-41页 |
3 结果与分析 | 第41-53页 |
3.1 细菌的复苏和鉴定结果 | 第41-42页 |
3.2 阿米卡星-庆大霉素耐药菌株初步筛选 | 第42页 |
3.3 肠杆菌 16S rRNA甲基化酶基因的检测结果 | 第42-44页 |
3.4 药敏性测试结果 | 第44页 |
3.5 PFGE结果 | 第44-46页 |
3.6 接合转移实验结果 | 第46-50页 |
3.6.1 筛选接合子的药物浓度 | 第46页 |
3.6.2 接合实验结果 | 第46页 |
3.6.3 接合子 16S rRNA甲基化酶基因的PCR检测结果 | 第46-47页 |
3.6.4 接合子Eric-PCR检测结果 | 第47页 |
3.6.5 接合子及原菌株的MIC比较 | 第47页 |
3.6.6 接合子复制子分型结果 | 第47-48页 |
3.6.7 接合子质粒的酶切分析 | 第48-49页 |
3.6.8 接合子bla_(TEM-1),bla_(CTX-M)基因检测 | 第49-50页 |
3.7 S1-PFGE和Southern杂交结果 | 第50-53页 |
4 讨论 | 第53-58页 |
4.1 宠物源肠杆菌中 16S rRNA甲基化酶的流行情况及其介导的耐药特征 | 第53-55页 |
4.2 16S rRNA甲基化酶基因和 β-内酰胺酶基因的相关性 | 第55-56页 |
4.3 16S rRNA甲基化酶基因的传播机制研究 | 第56-58页 |
全文结论 | 第58-59页 |
致谢 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-65页 |