| 摘要 | 第4-5页 |
| SUMMARY | 第5-6页 |
| 缩略词 | 第7-8页 |
| 主要仪器 | 第8-12页 |
| 第一部分 文献综述 | 第12-20页 |
| 1 发情周期 | 第12-14页 |
| 1.1 发情周期的分期 | 第12页 |
| 1.2 发情周期中生殖内分泌的变化和调节 | 第12-13页 |
| 1.3 不同发情周期卵巢中卵泡发育的变化 | 第13-14页 |
| 1.3.1 原始卵泡 | 第13页 |
| 1.3.2 生长卵泡 | 第13页 |
| 1.3.3 囊状卵泡 | 第13-14页 |
| 1.3.4 成熟卵泡 | 第14页 |
| 1.3.5 不同发情周期卵巢中的闭锁卵泡 | 第14页 |
| 1.4 不发情的因素 | 第14页 |
| 2 输卵管 | 第14-18页 |
| 2.1 哺乳动物输卵管的解剖学结构 | 第15页 |
| 2.2 哺乳动物输卵管的组织学结构 | 第15-16页 |
| 2.3 输卵管的功能 | 第16页 |
| 2.3.1 精子在输卵管中的运行 | 第16页 |
| 2.3.2 卵子在输卵管中的运行 | 第16页 |
| 2.3.3 精—卵的识别与结合 | 第16页 |
| 2.4 输卵管上皮细胞 | 第16-18页 |
| 2.4.1 输卵管上皮细胞的组成 | 第16-17页 |
| 2.4.2 输卵管上皮细胞的分离培养方法 | 第17页 |
| 2.4.3 输卵管上皮细胞的功能及应用 | 第17-18页 |
| 3 输卵管蛋白 | 第18-20页 |
| 第二部分 牦牛输卵管蛋白在发情周期的表达及EGF对其表达的影响 | 第20-46页 |
| 实验一 牦牛输卵管蛋白(Ovn)的cDNA克隆及其在发情周期中的差异性表达 | 第20-32页 |
| 前言 | 第20-21页 |
| 1 材料与方法 | 第21-25页 |
| 1.1 输卵管组织的采集 | 第21-22页 |
| 1.2 主要试剂 | 第22页 |
| 1.3 总RNA的提取 | 第22-23页 |
| 1.4 cDNA的克隆与测序 | 第23页 |
| 1.5 牦牛发情周期各阶段输卵管蛋白mRNA的qRT-PCR检测 | 第23-25页 |
| 1.6 牦牛输卵管蛋白的免疫组织化学检测 | 第25页 |
| 1.7 数据分析 | 第25页 |
| 2 结果与分析 | 第25-29页 |
| 2.1 牦牛输卵管蛋白的cDNA合成及核苷酸序列分析 | 第25-26页 |
| 2.2 牦牛发情周期各阶段输卵管中输卵管蛋白mRNA的表达 | 第26-28页 |
| 2.3 牦牛输卵管蛋白在发情周期各阶段输卵管的分布 | 第28-29页 |
| 3 讨论 | 第29-31页 |
| 4 结论 | 第31-32页 |
| 实验二 EGF对牦牛输卵管上皮细胞Ovn、HIF-1α 表达的影响及与凋亡的关联性分析 | 第32-46页 |
| 前言 | 第32-33页 |
| 1 材料与方法 | 第33-39页 |
| 1.1 样品采集 | 第33页 |
| 1.2 主要试剂 | 第33-34页 |
| 1.3 牦牛输卵管上皮细胞的分离和培养 | 第34-36页 |
| 1.3.1 主要试剂的配制 | 第34页 |
| 1.3.2 牦牛输卵管上皮细胞的分离及原代培养 | 第34-35页 |
| 1.3.3 输卵管上皮细胞的传代培养 | 第35页 |
| 1.3.4 输卵管上皮细胞的免疫荧光染色鉴定 | 第35页 |
| 1.3.5 输卵管上皮细胞的冻存 | 第35-36页 |
| 1.3.6 输卵管上皮细胞的复苏 | 第36页 |
| 1.4 EGF作用输卵管上皮细胞 | 第36页 |
| 1.5 总RNA提取 | 第36-37页 |
| 1.6 反转录及PCR扩增 | 第37-38页 |
| 1.7 Ovn、HIF-1α、Bax和Bcl-2 mRNA的qRT-PCR检测 | 第38-39页 |
| 1.8 数据分析 | 第39页 |
| 2 结果与分析 | 第39-44页 |
| 2.1 牦牛输卵管上皮细胞的培养观察及鉴定 | 第39-41页 |
| 2.1.1 牦牛输卵管上皮细胞体外培养的形态学观察 | 第39-40页 |
| 2.1.2 输卵管上皮细胞的免疫荧光染色鉴定 | 第40-41页 |
| 2.1.3 两种细胞冻存方法的确定 | 第41页 |
| 2.2 EGF对牦牛输卵管上皮细胞的影响 | 第41-44页 |
| 2.2.1 引物特异性的确定 | 第41-42页 |
| 2.2.2 EGF对牦牛输卵管上皮细胞Ovn、HIF-1α、Bax和Bcl-2 mRNA表达的影响 | 第42-44页 |
| 3 讨论 | 第44-45页 |
| 4 结论 | 第45-46页 |
| 全文总结 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |
| 导师简介 | 第58-59页 |
| 作者简介 | 第59-60页 |
