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温度、高效氯氰菊酯对东亚小花蝽(Orius sauteri)捕食功能及体内HSPs的表达水平影响

摘要第10-12页
英文摘要第12-13页
1 前言第14-19页
    1.1 东亚小花蝽的研究现状第14页
    1.2 HSPs的研究概况第14-18页
        1.2.1 HSPs的研究背景第14-15页
        1.2.2 HSPs的表达调控第15-16页
        1.2.3 HSPs蛋白的结构特性第16-17页
        1.2.4 HSPs与昆虫的生长发育第17页
        1.2.5 HSPs与昆虫耐热性的关系第17页
        1.2.6 昆虫在化学农药胁迫下的研究进展第17-18页
    1.3 本实验研究目的及意义第18-19页
2 材料与方法第19-31页
    2.1 虫源及饲养方法第19页
    2.2 主要的试剂及仪器第19页
    2.3 东亚小花蝽在胁迫下捕食功能试验方法及数据处理第19-21页
        2.3.1 东亚小花蝽不同温度下生物学状态观察与鉴定第19-20页
        2.3.2 不同温度下,东亚小花蝽成虫对大豆蚜成虫的捕食功能反应第20页
        2.3.3 不同温度下,东亚小花蝽成虫捕食大豆蚜的种内干扰第20页
        2.3.4 30%高效氯氰菊酯对东亚小花蝽成虫的毒力试验第20页
        2.3.5 不同浓度高效氯氰菊酯下,东亚小花蝽对大豆蚜成虫的捕食功能反应第20页
        2.3.6 高效氯氰菊酯处理下,东亚小花蝽成虫捕食大豆蚜的种内干扰第20-21页
        2.3.7 数据处理第21页
    2.4 东亚小花蝽hsc70、hsp70、hsp90基因全长的克隆第21-25页
        2.4.1 总RNA的提取第21页
        2.4.2 第一链cDNA的合成第21-22页
        2.4.3 hsc70、hsp70和hsp90基因片段的克隆第22-23页
        2.4.4 hsc70、hsp70、hsp90的 5′RACE c DNA的获得第23页
        2.4.5 hsc70、hsp70和hsp90基因 3′RACE及 5′RACE的克隆及全长的获得第23-25页
    2.5 hsc70、hsp70和hsp90基因的原核表达第25-28页
        2.5.1 hsc70、hsp70和hsp90 cDNA序列ORF的扩增第25-26页
        2.5.2 原核表达载体的构建第26-27页
        2.5.3 蛋白的诱导表达与检测第27页
        2.5.4 Western blot分析第27-28页
    2.6 hsc70、hsp70、hsp90基因胁迫条件下表达分析第28-31页
        2.6.1 东亚小花蝽于不同温度下的胁迫处理第28页
        2.6.2 东亚小花蝽于不同高效氯氰菊酯浓度下的胁迫处理第28-29页
        2.6.3 东亚小花蝽于温度、高效氯氰菊酯双因子胁迫下的胁迫处理第29页
        2.6.4 总RNA的提取第29页
        2.6.5 c DNA第一条链的合成第29页
        2.6.6 荧光定量PCR引物的设计第29-30页
        2.6.7 定量PCR引物特异性检测第30页
        2.6.8 定量片段的确认第30页
        2.6.9 荧光定量PCR第30页
        2.6.10数据处理第30-31页
3 结果与分析第31-76页
    3.1 东亚小花蝽成虫不同温度下对大豆蚜的捕食功能第31-35页
        3.1.1 东亚小花蝽成虫对大豆蚜捕食功能反应第31-32页
        3.1.2 东亚小花蝽成虫对大豆蚜寻找效应第32页
        3.1.3 东亚小花蝽成虫对大豆蚜捕食作用的种内干扰第32-34页
        3.1.4 温度对东亚小花蝽成虫捕食大豆蚜的影响第34-35页
    3.2 东亚小花蝽成虫在高效氯氰菊酯不同浓度梯度胁迫下对大豆蚜的捕食功能第35页
    3.2.130%高效氯氰菊酯对东亚小花蝽成虫的毒力试验第35-39页
        3.2.2 东亚小花蝽成虫在农药胁迫下对大豆蚜捕食功能反应第35-36页
        3.2.3 东亚小花蝽成虫在农药胁迫下对大豆蚜寻找效应第36-37页
        3.2.4 东亚小花蝽成虫农药胁迫下对大豆蚜捕食作用的种内干扰第37-38页
        3.2.5 农药胁迫对东亚小花蝽成虫捕食大豆蚜的影响第38-39页
    3.3 东亚小花蝽hsc70、hsp70、hsp90基因的克隆第39-42页
        3.3.1 hsc70、hsp70和hsp90 cDNA序列片段PCR扩增结果第39-40页
        3.3.2 hsc70、hsp70、hsp90基因 3′RACE和 5′RACE实验结果第40-41页
        3.3.3 hsc70、hsp70、hsp90基因c DNA序列全长第41-42页
    3.4 东亚小花蝽hsc70、hsp70、hsp90基因序列分析第42-68页
        3.4.1 东亚小花蝽hsc70基因序列分析第42-50页
        3.4.2 东亚小花蝽hsp70基因序列分析第50-58页
        3.4.3 东亚小花蝽hsp90基因序列分析第58-68页
    3.5 hsc70、hsp70和hsp90基因的原核表达第68-70页
        3.5.1 hsc70、hsp70和hsp90重组质粒的构建第68页
        3.5.2 hsc70、hsp70和hsp90重组质粒的诱导表达第68-69页
        3.5.3 hsc70、hsp70和hsp90重组蛋白的Western blot验证第69-70页
    3.6 hsc70、hsp70和hsp90基因胁迫表达模式第70-76页
        3.6.1 荧光定量分析特异引物的确定第70-71页
        3.6.2 高温胁迫下东亚小花蝽hsc70、hsp70和hsp90基因的表达变化第71-73页
        3.6.3 温度、高效氯氰菊酯双因子胁迫下hsc70、hsp70和hsp90的表达变化第73-76页
4 讨论第76-79页
    4.1 东亚小花蝽对大豆蚜的捕食效果评价第76页
    4.2 hsc70、hsp70和hsp90基因的克隆及分析第76-77页
    4.3 不同温度下hsc70、hsp70和hsp90基因表达水平分析第77-78页
    4.4 温度、高效氯氰菊酯胁迫下hsc70、hsp70和hsp90基因表达水平第78-79页
5 结论第79-80页
致谢第80-81页
参考文献第81-89页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第89页

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