摘要 | 第10-12页 |
英文摘要 | 第12-13页 |
1 前言 | 第14-19页 |
1.1 东亚小花蝽的研究现状 | 第14页 |
1.2 HSPs的研究概况 | 第14-18页 |
1.2.1 HSPs的研究背景 | 第14-15页 |
1.2.2 HSPs的表达调控 | 第15-16页 |
1.2.3 HSPs蛋白的结构特性 | 第16-17页 |
1.2.4 HSPs与昆虫的生长发育 | 第17页 |
1.2.5 HSPs与昆虫耐热性的关系 | 第17页 |
1.2.6 昆虫在化学农药胁迫下的研究进展 | 第17-18页 |
1.3 本实验研究目的及意义 | 第18-19页 |
2 材料与方法 | 第19-31页 |
2.1 虫源及饲养方法 | 第19页 |
2.2 主要的试剂及仪器 | 第19页 |
2.3 东亚小花蝽在胁迫下捕食功能试验方法及数据处理 | 第19-21页 |
2.3.1 东亚小花蝽不同温度下生物学状态观察与鉴定 | 第19-20页 |
2.3.2 不同温度下,东亚小花蝽成虫对大豆蚜成虫的捕食功能反应 | 第20页 |
2.3.3 不同温度下,东亚小花蝽成虫捕食大豆蚜的种内干扰 | 第20页 |
2.3.4 30%高效氯氰菊酯对东亚小花蝽成虫的毒力试验 | 第20页 |
2.3.5 不同浓度高效氯氰菊酯下,东亚小花蝽对大豆蚜成虫的捕食功能反应 | 第20页 |
2.3.6 高效氯氰菊酯处理下,东亚小花蝽成虫捕食大豆蚜的种内干扰 | 第20-21页 |
2.3.7 数据处理 | 第21页 |
2.4 东亚小花蝽hsc70、hsp70、hsp90基因全长的克隆 | 第21-25页 |
2.4.1 总RNA的提取 | 第21页 |
2.4.2 第一链cDNA的合成 | 第21-22页 |
2.4.3 hsc70、hsp70和hsp90基因片段的克隆 | 第22-23页 |
2.4.4 hsc70、hsp70、hsp90的 5′RACE c DNA的获得 | 第23页 |
2.4.5 hsc70、hsp70和hsp90基因 3′RACE及 5′RACE的克隆及全长的获得 | 第23-25页 |
2.5 hsc70、hsp70和hsp90基因的原核表达 | 第25-28页 |
2.5.1 hsc70、hsp70和hsp90 cDNA序列ORF的扩增 | 第25-26页 |
2.5.2 原核表达载体的构建 | 第26-27页 |
2.5.3 蛋白的诱导表达与检测 | 第27页 |
2.5.4 Western blot分析 | 第27-28页 |
2.6 hsc70、hsp70、hsp90基因胁迫条件下表达分析 | 第28-31页 |
2.6.1 东亚小花蝽于不同温度下的胁迫处理 | 第28页 |
2.6.2 东亚小花蝽于不同高效氯氰菊酯浓度下的胁迫处理 | 第28-29页 |
2.6.3 东亚小花蝽于温度、高效氯氰菊酯双因子胁迫下的胁迫处理 | 第29页 |
2.6.4 总RNA的提取 | 第29页 |
2.6.5 c DNA第一条链的合成 | 第29页 |
2.6.6 荧光定量PCR引物的设计 | 第29-30页 |
2.6.7 定量PCR引物特异性检测 | 第30页 |
2.6.8 定量片段的确认 | 第30页 |
2.6.9 荧光定量PCR | 第30页 |
2.6.10数据处理 | 第30-31页 |
3 结果与分析 | 第31-76页 |
3.1 东亚小花蝽成虫不同温度下对大豆蚜的捕食功能 | 第31-35页 |
3.1.1 东亚小花蝽成虫对大豆蚜捕食功能反应 | 第31-32页 |
3.1.2 东亚小花蝽成虫对大豆蚜寻找效应 | 第32页 |
3.1.3 东亚小花蝽成虫对大豆蚜捕食作用的种内干扰 | 第32-34页 |
3.1.4 温度对东亚小花蝽成虫捕食大豆蚜的影响 | 第34-35页 |
3.2 东亚小花蝽成虫在高效氯氰菊酯不同浓度梯度胁迫下对大豆蚜的捕食功能 | 第35页 |
3.2.130%高效氯氰菊酯对东亚小花蝽成虫的毒力试验 | 第35-39页 |
3.2.2 东亚小花蝽成虫在农药胁迫下对大豆蚜捕食功能反应 | 第35-36页 |
3.2.3 东亚小花蝽成虫在农药胁迫下对大豆蚜寻找效应 | 第36-37页 |
3.2.4 东亚小花蝽成虫农药胁迫下对大豆蚜捕食作用的种内干扰 | 第37-38页 |
3.2.5 农药胁迫对东亚小花蝽成虫捕食大豆蚜的影响 | 第38-39页 |
3.3 东亚小花蝽hsc70、hsp70、hsp90基因的克隆 | 第39-42页 |
3.3.1 hsc70、hsp70和hsp90 cDNA序列片段PCR扩增结果 | 第39-40页 |
3.3.2 hsc70、hsp70、hsp90基因 3′RACE和 5′RACE实验结果 | 第40-41页 |
3.3.3 hsc70、hsp70、hsp90基因c DNA序列全长 | 第41-42页 |
3.4 东亚小花蝽hsc70、hsp70、hsp90基因序列分析 | 第42-68页 |
3.4.1 东亚小花蝽hsc70基因序列分析 | 第42-50页 |
3.4.2 东亚小花蝽hsp70基因序列分析 | 第50-58页 |
3.4.3 东亚小花蝽hsp90基因序列分析 | 第58-68页 |
3.5 hsc70、hsp70和hsp90基因的原核表达 | 第68-70页 |
3.5.1 hsc70、hsp70和hsp90重组质粒的构建 | 第68页 |
3.5.2 hsc70、hsp70和hsp90重组质粒的诱导表达 | 第68-69页 |
3.5.3 hsc70、hsp70和hsp90重组蛋白的Western blot验证 | 第69-70页 |
3.6 hsc70、hsp70和hsp90基因胁迫表达模式 | 第70-76页 |
3.6.1 荧光定量分析特异引物的确定 | 第70-71页 |
3.6.2 高温胁迫下东亚小花蝽hsc70、hsp70和hsp90基因的表达变化 | 第71-73页 |
3.6.3 温度、高效氯氰菊酯双因子胁迫下hsc70、hsp70和hsp90的表达变化 | 第73-76页 |
4 讨论 | 第76-79页 |
4.1 东亚小花蝽对大豆蚜的捕食效果评价 | 第76页 |
4.2 hsc70、hsp70和hsp90基因的克隆及分析 | 第76-77页 |
4.3 不同温度下hsc70、hsp70和hsp90基因表达水平分析 | 第77-78页 |
4.4 温度、高效氯氰菊酯胁迫下hsc70、hsp70和hsp90基因表达水平 | 第78-79页 |
5 结论 | 第79-80页 |
致谢 | 第80-81页 |
参考文献 | 第81-89页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第89页 |