| 摘要 | 第10-12页 |
| 英文摘要 | 第12-13页 |
| 1 前言 | 第14-24页 |
| 1.1 TGE的流行特点 | 第14-15页 |
| 1.2 TGE主要临床特征 | 第15页 |
| 1.3 TGEV病原特征 | 第15-17页 |
| 1.3.1 TGEV的分类地位 | 第15-16页 |
| 1.3.2 TGEV的形态学特征 | 第16页 |
| 1.3.3 TGEV的培养特性 | 第16-17页 |
| 1.3.4 TGEV的理化特性 | 第17页 |
| 1.4 TGEV分子生物学的研究进展 | 第17-20页 |
| 1.4.1 TGEV基因组特征 | 第17-18页 |
| 1.4.2 TGEV主要结构蛋白及其生物学功能 | 第18-19页 |
| 1.4.3 TGEV的非结构蛋白 | 第19-20页 |
| 1.5 TGE的诊断技术 | 第20-22页 |
| 1.5.1 病毒的分离 | 第20页 |
| 1.5.2 电镜观察法 | 第20-21页 |
| 1.5.3 血清学检测方法 | 第21页 |
| 1.5.4 分子生物学检测方法 | 第21-22页 |
| 1.6 蚀斑技术 | 第22-23页 |
| 1.6.1 蚀斑的概念和形成机理 | 第22页 |
| 1.6.2 蚀斑技术的应用 | 第22-23页 |
| 1.7 研究的目的和意义 | 第23-24页 |
| 2 材料与方法 | 第24-32页 |
| 2.1 试验材料 | 第24-27页 |
| 2.1.1 病料 | 第24页 |
| 2.1.2 细胞 | 第24页 |
| 2.1.3 试验动物 | 第24页 |
| 2.1.4 TGEV抗体检测试剂 | 第24页 |
| 2.1.5 检测引物 | 第24-25页 |
| 2.1.6 主要试剂 | 第25页 |
| 2.1.7 主要试剂配制 | 第25-26页 |
| 2.1.8 主要仪器设备 | 第26-27页 |
| 2.2 实验方法 | 第27-32页 |
| 2.2.1 病毒的分离 | 第27页 |
| 2.2.2 病毒核酸鉴定 | 第27-29页 |
| 2.2.3 TGEV的纯化 | 第29-30页 |
| 2.2.4 病毒理化特性 | 第30页 |
| 2.2.5 动物回归试验 | 第30-32页 |
| 3 结果 | 第32-45页 |
| 3.1 TGEV细胞培养特性 | 第32-36页 |
| 3.1.1 TGEV分离毒接种猪睾丸原代细胞 | 第32页 |
| 3.1.2 TGEV接种ST细胞 | 第32-33页 |
| 3.1.3 TGEV分离毒接种pk15细胞 | 第33-34页 |
| 3.1.4 TGEV细胞培养毒RT-PCR检测结果 | 第34页 |
| 3.1.5 TGEV分离毒在不同细胞上繁殖滴度 | 第34-35页 |
| 3.1.6 间接免疫荧光检测结果 | 第35-36页 |
| 3.2 TGEV分离毒在ST细胞上增殖的结果 | 第36页 |
| 3.3 病毒纯度鉴定 | 第36-37页 |
| 3.4 TGEV蚀斑纯化结果 | 第37-41页 |
| 3.4.1 蚀斑形成试验 | 第37-38页 |
| 3.4.2 蚀斑克隆化 | 第38页 |
| 3.4.3 纯化后病毒核酸检测 | 第38页 |
| 3.4.4 间接免疫荧光检测 | 第38-39页 |
| 3.4.5 病毒的增殖稳定性 | 第39页 |
| 3.4.6 蚀斑克隆毒及原始毒滴度的测定结果 | 第39-40页 |
| 3.4.7 直接负染电镜法观察病毒结果 | 第40页 |
| 3.4.8 超薄切片电镜观察结果 | 第40-41页 |
| 3.5 TGEV理化特性实验结果 | 第41-42页 |
| 3.5.1 TGEV耐热性试验 | 第41页 |
| 3.5.2 病毒PH稳定性试验 | 第41页 |
| 3.5.3 病毒乙醚敏感试验 | 第41-42页 |
| 3.5.4 病毒氯仿敏感试验 | 第42页 |
| 3.6 动物回归试验检测结果 | 第42-45页 |
| 3.6.1 临床症状 | 第42-43页 |
| 3.6.2 剖检病变 | 第43页 |
| 3.6.3 RT-PCR方法检测病料 | 第43-45页 |
| 4 讨论 | 第45-49页 |
| 4.1 TGEV毒株分离培养 | 第45-46页 |
| 4.2 TGEV毒株纯化 | 第46-47页 |
| 4.3 TGEV毒株理化特性 | 第47-49页 |
| 5 结论 | 第49-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-57页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第57页 |