基于猪附红细胞体α-烯醇化酶基因的LAMP检测方法的建立及初步应用
| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 前言 | 第12-17页 |
| 1. 概述 | 第12页 |
| 2. 猪附红细胞体病的病原学研究 | 第12页 |
| 3. 猪附红细胞体病的流行病学 | 第12-13页 |
| 4. 猪附红细胞体病的临床症状 | 第13页 |
| 5. 猪附红细胞体病的检测方法和研究进展 | 第13-14页 |
| 6. α-烯醇化酶基因 | 第14页 |
| 7. α-烯醇化与自身疫病的关系 | 第14页 |
| 8. 环介导等温扩增技术 | 第14-15页 |
| 9. LAMP反应引物设计 | 第15-16页 |
| 9.1 引物设计的要点 | 第15页 |
| 9.2 反应原理 | 第15-16页 |
| 10. LAMP技术的特点 | 第16页 |
| 11. LAMP检测方法的应用 | 第16页 |
| 12. 研究的目的和意义 | 第16-17页 |
| 材料与方法 | 第17-25页 |
| 1 试验材料 | 第17-18页 |
| 1.1 试验材料 | 第17页 |
| 1.2 主要试剂 | 第17页 |
| 1.3 主要仪器设备 | 第17-18页 |
| 1.4 试验所需主要溶液的配置 | 第18页 |
| 2 试验方法 | 第18-25页 |
| 2.1 引物的设计与合成 | 第18-19页 |
| 2.2 猪附红细胞体α-烯醇化酶基因PCR扩增 | 第19-20页 |
| 2.3 目的片段的胶回收 | 第20页 |
| 2.4 目的基因载体构建 | 第20页 |
| 2.5 重组目的基因后转化 | 第20-21页 |
| 2.6 重组克隆质粒 | 第21-22页 |
| 2.7 重组克隆质粒的鉴定 | 第22页 |
| 2.8 LAMP反应引物的设计 | 第22-23页 |
| 2.9 LAMP反应体系的建立 | 第23页 |
| 2.10 LAMP反应条件的优化 | 第23-24页 |
| 2.11 特异性试验 | 第24页 |
| 2.12 敏感性试验 | 第24页 |
| 2.13 重复性试验 | 第24页 |
| 2.14 LAMP检测方法初步应用 | 第24-25页 |
| 结果 | 第25-32页 |
| 1. 猪附红细胞体-α烯醇化酶基因的PCR扩增 | 第25页 |
| 2. 重组质粒鉴定 | 第25-26页 |
| 3. LAMP方法的建立结果 | 第26-28页 |
| 4. 特异性试验 | 第28-29页 |
| 5. 敏感性试验 | 第29-30页 |
| 6. 重复性试验结果 | 第30页 |
| 7. LAMP检测方法初步临床应用结果 | 第30-32页 |
| 讨论 | 第32-35页 |
| 结论 | 第35-36页 |
| 参考文献 | 第36-40页 |
| 谢辞 | 第40-41页 |
| 作者简介 | 第41-42页 |
| 附录 | 第42页 |