摘要 | 第4-7页 |
ABSTRACT | 第7-9页 |
第一章 文献综述 | 第12-19页 |
1.1 植物幼年向成年阶段转变研究进展 | 第12-14页 |
1.1.1 植物幼年向成年阶段转变的形态学特征 | 第12-13页 |
1.1.2 植物幼年向成年阶段转变的分子机制 | 第13-14页 |
1.2 miRNA研究进展 | 第14-16页 |
1.2.1 miRNA表达调控—以miR156为例 | 第14-15页 |
1.2.2 miRNA加工过程及作用机制 | 第15-16页 |
1.3 DEL3基因研究进展 | 第16-17页 |
1.4 本实验的研究目的与意义 | 第17-19页 |
第二章 del3突变体表型及突变基因分析 | 第19-31页 |
2.1 实验材料 | 第19-21页 |
2.1.1 材料 | 第19页 |
2.1.2 主要仪器设备 | 第19-20页 |
2.1.3 主要试剂及溶液配方 | 第20-21页 |
2.2 实验方法 | 第21-26页 |
2.2.1 植物栽培 | 第21页 |
2.2.2 表型考察 | 第21页 |
2.2.3 图位克隆 | 第21-23页 |
2.2.3.1 F_2群体构建 | 第22页 |
2.2.3.2 TPS法拟南芥基因组抽提 | 第22页 |
2.2.3.3 图位克隆定位分析 | 第22-23页 |
2.2.4 候选基因克隆及dCAPS鉴定 | 第23-26页 |
2.2.4.1 拟南芥组织DNA精细抽提 | 第24页 |
2.2.4.2 克隆引物设计 | 第24页 |
2.2.4.3 目的基因的获得 | 第24-25页 |
2.2.4.4 PCR产物胶回收 | 第25页 |
2.2.4.5 测序并进行dCAPS验证 | 第25-26页 |
2.3 结果与分析 | 第26-31页 |
2.3.1 del3突变体表型分析 | 第26-27页 |
2.3.2 de13突变体突变基因分析 | 第27-31页 |
2.3.2.1 图位克隆定位分析 | 第27页 |
2.3.2.2 突变体候选基因测序分析结果 | 第27-28页 |
2.3.2.3 dCAPS鉴定结果 | 第28-29页 |
2.3.2.4 遗传等位互补测定结果 | 第29-31页 |
第三章 DEL3调控拟南芥幼年向成年阶段转变机制研究 | 第31-50页 |
3.1 实验材料 | 第31-32页 |
3.1.1 材料 | 第31页 |
3.1.2 主要仪器设备 | 第31页 |
3.1.3 主要试剂及溶液配方 | 第31-32页 |
3.2 实验方法 | 第32-37页 |
3.2.1 拟南芥RNA提取、cDNA制备及qRT-PCR检测 | 第32-35页 |
3.2.1.1 拟南芥组织获得 | 第32页 |
3.2.1.2 拟南芥TRIZOL法总RNA抽提 | 第32-34页 |
3.2.1.3 拟南芥组织cDNA的制备 | 第34-35页 |
3.2.1.4 qRT-PCR检测 | 第35页 |
3.2.2 拟南芥多突纯合突变体遗传材料的获得 | 第35-36页 |
3.2.2.1 拟南芥杂交 | 第35页 |
3.2.2.2 遗传材料的获得 | 第35-36页 |
3.2.2.3 基于多突变体表型的遗传分析 | 第36页 |
3.2.3 GUS染色 | 第36页 |
3.2.4 外源蔗糖添加培养 | 第36-37页 |
3.2.5 表型分析 | 第37页 |
3.2.5.1 del3突变体表型分析 | 第37页 |
3.2.5.2 del3与chl-4及miRNA加工途径相关基因遗传材料表型分析 | 第37页 |
3.3 结果与分析 | 第37-50页 |
3.3.1 del3突变体中miR156-SPLs途径相关基因表达检测 | 第37-39页 |
3.3.1.1 miR156-SPLs途径基因定量PCR检测结果 | 第37-38页 |
3.3.1.2 GUS报告株系染色结果 | 第38-39页 |
3.3.2 DEL3与miR156-SPLs途径基因遗传关系分析 | 第39-41页 |
3.3.2.1 miR172过表达回复del3突变体表型分析 | 第39-40页 |
3.3.2.2 toe1/toe2双缺失突变体回复del3突变体表型分析 | 第40-41页 |
3.3.3 del3与chl-4突变体表型比较分析 | 第41-43页 |
3.3.3.1 del3与chl-4突变体缺陷表型比较分析 | 第41-42页 |
3.3.3.2 del3与chl-4突变体相关基因表达比较分析 | 第42-43页 |
3.3.4 外源添糖回复del3突变体表型分析 | 第43-44页 |
3.3.5 del3突变体中miRNA加工缺陷分析 | 第44-47页 |
3.3.6 del3突变体中miRNA加工途径相关基因表达分析 | 第47-48页 |
3.3.7 DEL3与miRNA加工途径相关基因遗传关系分析 | 第48-50页 |
第四章 结论与讨论 | 第50-54页 |
4.1 结论 | 第50-51页 |
4.2 讨论 | 第51-54页 |
参考文献 | 第54-62页 |
附录 | 第62-70页 |
致谢 | 第70-73页 |
个人简介 | 第73页 |