中文摘要 | 第3-5页 |
英文摘要 | 第5-6页 |
缩略词表 | 第10-11页 |
1 绪论 | 第11-17页 |
1.1 问题的提出和研究意义 | 第11-14页 |
1.1.1 类风湿关节炎 | 第11-12页 |
1.1.2 滑膜组织的生理学和病理学情况 | 第12页 |
1.1.3 RA中的FLS的情况 | 第12-13页 |
1.1.4 鸦胆子苦醇 | 第13-14页 |
1.2 研究的目的和内容 | 第14-17页 |
2 人成纤维样滑膜细胞的分离培养和观察 | 第17-29页 |
2.1 引言 | 第17页 |
2.2 实验材料 | 第17-22页 |
2.2.1 实验细胞 | 第17-18页 |
2.2.2 主要材料和仪器设备 | 第18-19页 |
2.2.3 主要试剂 | 第19-20页 |
2.2.4 主要试剂配制方法 | 第20-22页 |
2.3 实验方法 | 第22-25页 |
2.3.1 成纤维样滑膜细胞的原代分离和培养 | 第22-23页 |
2.3.2 结晶紫染色实验检测RA FLS形态 | 第23-24页 |
2.3.3 细胞骨架染色实验检测RA FLS细胞骨架 | 第24页 |
2.3.4 Western blotting实验检测RA FLS标志物的表达 | 第24-25页 |
2.4 实验结果 | 第25-28页 |
2.4.1 成纤维样滑膜细胞的原代分离和培养 | 第25-26页 |
2.4.2 RA FLS结晶紫染色和细胞骨架染色 | 第26-27页 |
2.4.3 RA FLS标志物的检测 | 第27-28页 |
2.5 讨论 | 第28页 |
2.6 本章小结 | 第28-29页 |
3 鸦胆子苦醇对RA FLS增殖和凋亡的影响 | 第29-39页 |
3.1 引言 | 第29页 |
3.2 实验材料 | 第29-31页 |
3.2.1 实验细胞 | 第29页 |
3.2.2 主要材料和仪器设备 | 第29-30页 |
3.2.3 主要试剂 | 第30页 |
3.2.4 主要试剂配制方法 | 第30-31页 |
3.3 实验方法 | 第31-34页 |
3.3.1 MTS实验检测鸦胆子苦醇对细胞毒性的影响 | 第31页 |
3.3.2 EdU细胞增殖实验检测细胞增殖 | 第31-32页 |
3.3.3 Western blotting实验检测细胞中蛋白表达 | 第32-34页 |
3.4 实验结果 | 第34-37页 |
3.4.1 鸦胆子苦醇对细胞毒性的影响 | 第34页 |
3.4.2 鸦胆子苦醇对细胞增殖的影响 | 第34-35页 |
3.4.3 鸦胆子苦醇对细胞凋亡的影响 | 第35-37页 |
3.5 讨论 | 第37-38页 |
3.6 本章小结 | 第38-39页 |
4 鸦胆子苦醇对RA FLS运动能力的影响 | 第39-49页 |
4.1 引言 | 第39页 |
4.2 实验材料 | 第39-41页 |
4.2.1 实验细胞 | 第39页 |
4.2.2 主要材料和仪器设备 | 第39-40页 |
4.2.3 主要试剂 | 第40-41页 |
4.2.4 主要试剂配制方法 | 第41页 |
4.3 实验方法 | 第41-43页 |
4.3.1 Transwell细胞小室实验检测细胞迁移 | 第41页 |
4.3.2 Transwell细胞小室实验检测细胞侵袭 | 第41-42页 |
4.3.3 细胞骨架荧光染色实验检测细胞骨架 | 第42-43页 |
4.3.4 AFM实验检测细胞杨氏模量 | 第43页 |
4.4 实验结果 | 第43-46页 |
4.4.1 鸦胆子苦醇对细胞迁移的影响 | 第43-44页 |
4.4.2 鸦胆子苦醇对细胞侵袭的影响 | 第44-45页 |
4.4.3 鸦胆子苦醇对细胞骨架的影响 | 第45页 |
4.4.4 鸦胆子苦醇对细胞杨氏模量的影响 | 第45-46页 |
4.5 讨论 | 第46-47页 |
4.6 本章小结 | 第47-49页 |
5 鸦胆子苦醇对RA FLS细胞行为影响的机制探索 | 第49-75页 |
5.1 引言 | 第49-51页 |
5.2 实验材料 | 第51-54页 |
5.2.1 实验细胞 | 第51页 |
5.2.2 主要材料和仪器设备 | 第51-52页 |
5.2.3 主要试剂 | 第52-53页 |
5.2.4 主要试剂配制方法 | 第53-54页 |
5.3 实验方法 | 第54-64页 |
5.3.1 Western blotting实验检测蛋白表达 | 第54-57页 |
5.3.2 酶谱实验检测MMP-2 表达 | 第57-59页 |
5.3.3 qPCR实验检测基因表达 | 第59-62页 |
5.3.4 ELISA实验检测MMP-1 表达 | 第62-64页 |
5.4 实验结果 | 第64-72页 |
5.4.1 鸦胆子苦醇对Nrf2表达的影响 | 第64-65页 |
5.4.2 鸦胆子苦醇对pERK表达的影响 | 第65-66页 |
5.4.3 鸦胆子苦醇对MMP-1 表达的影响 | 第66-68页 |
5.4.4 鸦胆子苦醇对MMP-2 表达的影响 | 第68-70页 |
5.4.5 鸦胆子苦醇对MMP-3 表达的影响 | 第70-71页 |
5.4.6 鸦胆子苦醇对CHI3L1表达的影响 | 第71-72页 |
5.4.7 鸦胆子苦醇对N-WASP、肌动蛋白结合蛋白和整合素表达的影响 | 第72页 |
5.5 讨论 | 第72-74页 |
5.6 本章小结 | 第74-75页 |
6 结论与展望 | 第75-77页 |
6.1 主要结论 | 第75-76页 |
6.2 工作展望 | 第76-77页 |
致谢 | 第77-79页 |
参考文献 | 第79-85页 |
附录 作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第85页 |