摘要 | 第8-11页 |
Abstract | 第11-13页 |
0 序言 | 第14-32页 |
第一部分 具有群感效应抑制作用的中药材提取物的筛选 | 第32-55页 |
引言 | 第32页 |
1 材料 | 第32-34页 |
2 实验方法 | 第34-43页 |
2.1 药材粗提物的制备 | 第34-35页 |
2.2 报告菌平板方法的确证 | 第35-36页 |
2.3 报告菌检测能力的确证及信号分子浓度的确证 | 第36-38页 |
2.4 滤纸片法初筛药物 | 第38-40页 |
2.5 最低抑菌浓度(MIC)的测定 | 第40-41页 |
2.6 药物浓度梯度确证 | 第41页 |
2.7 复筛 | 第41页 |
2.8 紫色菌素的定量分析 | 第41-43页 |
3 实验结果 | 第43-54页 |
3.1 报告菌平板法对报告菌检测能力的确证及信号分子浓度的确证 | 第43-46页 |
3.2 滤纸片法初筛药物 | 第46-49页 |
3.3 最低抑菌浓度(MIC)的测定 | 第49-50页 |
3.4 药物浓度梯度确证 | 第50-52页 |
3.5 紫色菌素的定量分析 | 第52-54页 |
4 讨论与小结 | 第54-55页 |
第二部分 车前草QSI有效成分的提取及确证 | 第55-64页 |
引言 | 第55页 |
1 材料 | 第55-56页 |
1.1 实验菌株 | 第55页 |
1.2 实验药材 | 第55页 |
1.3 主要设备 | 第55-56页 |
1.4 主要试剂 | 第56页 |
2 实验方法 | 第56-58页 |
2.1 车前草醇提物的分离提取及检测 | 第56-57页 |
2.2 乙酸乙酯部位水解的影响 | 第57页 |
2.3 乙酸乙酯部位的分离及检测 | 第57-58页 |
3 实验结果 | 第58-63页 |
3.1 车前草醇提物的分离提取及检测 | 第58-60页 |
3.2 乙酸乙酯不同部位的作用 | 第60-61页 |
3.3 乙酸乙酯部位的分离纯化及检测 | 第61-63页 |
4 讨论与小结 | 第63-64页 |
第三部分 车前草对铜绿假单胞菌毒力因子的影响 | 第64-92页 |
引言 | 第64页 |
1 实验材料 | 第64-67页 |
1.1 实验菌株 | 第64页 |
1.2 主要材料 | 第64页 |
1.3 仪器设备及器材 | 第64-65页 |
1.4 试剂和培养基的配置方法 | 第65-67页 |
2 实验方法 | 第67-73页 |
2.1 铜绿假单胞菌生长曲线: | 第67-68页 |
2.2 待测药物对铜绿假单胞菌PA01最低抑菌浓度(MIC)的测定: | 第68页 |
2.3 通过MTT(四甲基偶氮唑盐法)法研究不同浓度车前草对PAO1生长曲线的影响: | 第68-69页 |
2.4 铜绿假单胞菌体外生物膜模型构建[62][63] | 第69-70页 |
2.5 生物膜下绿脓菌素释放量的测定 | 第70页 |
2.6 生物膜下海藻酸盐释放量的测定(1,3 二羟基萘)[67] | 第70-71页 |
2.7 鼠李糖脂含量的测定 | 第71页 |
2.8 蛋白水解酶活性测定 | 第71-72页 |
2.9 PAO1对H2O2敏感性的检测 | 第72页 |
2.10 细菌运动性检测 | 第72-73页 |
2.11 细菌外毒素A的检测[73] | 第73页 |
2.12 统计学分析 | 第73页 |
3 实验结果 | 第73-90页 |
3.1 铜绿假单胞菌生长曲线: | 第73-74页 |
3.2 待测药物对铜绿假单胞菌PA01最低抑菌浓度(MIC)的测定: | 第74页 |
3.3 通过MTT(四甲基偶氮唑盐法)法研究不同浓度PE12对PAO1生长曲线的影响: | 第74-76页 |
3.4 生物膜下绿脓菌素释放量的测定 | 第76-77页 |
3.5 生物膜下海藻酸盐释放量的测定(1,3 二羟基萘) | 第77-79页 |
3.6 鼠李糖脂含量的测定 | 第79-81页 |
3.7 蛋白水解酶活性测定 | 第81-82页 |
3.8 PAO1对H2O2敏感性的检测 | 第82-86页 |
3.9 细菌运动性检测 | 第86-88页 |
3.10 外毒素A的测定 | 第88-90页 |
4 讨论与小结 | 第90-92页 |
第四部分 车前草对铜绿假单胞菌PA01生物膜的影响 | 第92-105页 |
引言 | 第92页 |
1 材料 | 第92-93页 |
1.1 实验菌株 | 第92页 |
1.2 实验药材 | 第92页 |
1.3 仪器设备 | 第92页 |
1.4 主要试剂 | 第92-93页 |
2 实验步骤 | 第93-95页 |
2.1 铜绿假单胞菌体外生物膜模型构建 | 第93页 |
2.2 生物膜半定量[74] | 第93-94页 |
2.3 银染法对生物膜的检测[67]: | 第94页 |
2.4 扫描电镜对生物膜的检测 | 第94-95页 |
3 实验结果 | 第95-103页 |
3.1 铜绿假单胞菌体外生物膜模型构建 | 第95页 |
3.2 生物膜半定量 | 第95-99页 |
3.3 银染法对生物膜的检测[74]: | 第99-100页 |
3.4 扫描电镜对生物膜的检测 | 第100-103页 |
4 讨论与小结 | 第103-105页 |
第五部分 车前草对铜绿假单胞菌群感效应系统相关基因的影响 | 第105-114页 |
引言 | 第105页 |
1.实验材料 | 第105-106页 |
1.1 实验菌株 | 第105页 |
1.2 实验材料 | 第105页 |
1.3 仪器设备 | 第105页 |
1.4 主要试剂及配置 | 第105-106页 |
2 实验方法 | 第106-110页 |
2.1 菌液的制备 | 第106页 |
2.2 引物设计 | 第106-107页 |
2.3 总RNA提取 | 第107页 |
2.4 反转录 | 第107-108页 |
2.5 荧光定量PCR | 第108-109页 |
2.6 数据处理 | 第109-110页 |
3 实验结果 | 第110-112页 |
3.1 四个基因的扩增曲线和熔解曲线 | 第110-111页 |
3.2 基因定量比较 | 第111-112页 |
4 讨论与小结 | 第112-114页 |
第六部分 总结与展望 | 第114-116页 |
1 总结 | 第114页 |
2 创新点 | 第114-115页 |
3 展望 | 第115-116页 |
参考文献 | 第116-123页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第123-124页 |
附录一 | 第124-127页 |
附录二 | 第127-132页 |
致谢 | 第132页 |