| 中文摘要 | 第3-7页 |
| Abstract | 第7-10页 |
| 缩略语/符号说明 | 第18-22页 |
| 前言 | 第22-25页 |
| 研究现状、成果 | 第22-24页 |
| 研究目的、方法 | 第24-25页 |
| 一、胆酸喂养Apc~(min/+)小鼠诱导肠道腺瘤恶变 | 第25-55页 |
| 1.1 实验材料 | 第25-29页 |
| 1.1.1 实验动物 | 第25页 |
| 1.1.2 主要试剂及其配制方法 | 第25-27页 |
| 1.1.3 主要实验仪器 | 第27-29页 |
| 1.1.4 主要溶液的配制 | 第29页 |
| 1.2 实验方法 | 第29-41页 |
| 1.2.1 Apc~(min/+)小鼠的鉴定 | 第29-33页 |
| 1.2.2 Apc~(min/+)小鼠的饲养 | 第33页 |
| 1.2.3 Apc~(min/+)小鼠分组及处理方法 | 第33页 |
| 1.2.4 Apc~(min/+)小鼠粪便及肠道组织留取方法 | 第33-34页 |
| 1.2.5 Apc~(min/+)小鼠肠道肿瘤病理学检查方法 | 第34-37页 |
| 1.2.5.1 肠道肿瘤大体观察方法 | 第34页 |
| 1.2.5.2 肠道肿腺瘤病理组织学制备及观察 | 第34-37页 |
| 1.2.6 Realtime-PCR技术 | 第37-40页 |
| 1.2.6.1 小鼠肠道组织总RNA提取 | 第37页 |
| 1.2.6.2 小鼠肠道组织RNA逆转录 | 第37-38页 |
| 1.2.6.3 PCR引物合成 | 第38-39页 |
| 1.2.6.4 Realtime-PCR反应体系 | 第39页 |
| 1.2.6.5 Realtime-PCR反应条件 | 第39页 |
| 1.2.6.6 Realtime-PCR结果分析 | 第39-40页 |
| 1.2.7 免疫荧光双染技术 | 第40-41页 |
| 1.3 统计方法 | 第41页 |
| 1.4 实验结果 | 第41-50页 |
| 1.4.1 Apc~(min/+)小鼠品系鉴定结果 | 第41-42页 |
| 1.4.2 Apc~(min/+)小鼠饲养期间一般状态 | 第42-43页 |
| 1.4.3 胆酸喂养对Apc~(min/+)小鼠肠道腺瘤的影响 | 第43-45页 |
| 1.4.3.1 肠道肿瘤的分布 | 第43-44页 |
| 1.4.3.2 肠道肿瘤的数量 | 第44页 |
| 1.4.3.3 肠道肿瘤的大小 | 第44页 |
| 1.4.3.4 肠道肿瘤的恶变情况 | 第44-45页 |
| 1.4.4 胆酸处理后Apc~(min/+)+小鼠肠道腺瘤细胞增殖的变化 | 第45-46页 |
| 1.4.5 胆酸对小鼠肠道单核-巨噬系统的影响 | 第46-49页 |
| 1.4.5.1 小鼠肠道巨噬细胞招募及其表达情况改变 | 第46-47页 |
| 1.4.5.2 小鼠巨噬细胞表型转化的改变 | 第47-49页 |
| 1.4.6 胆酸对Wnt信号通路的影响 | 第49-50页 |
| 1.5 讨论 | 第50-54页 |
| 1.5.1 Apc~(min/+)小鼠动物模型研究背景及现状 | 第50-52页 |
| 1.5.2 高脂饮食及胆汁酸过量与肠道肿瘤发生的关系 | 第52页 |
| 1.5.3 胆酸促进小鼠肠腺瘤恶变的机制 | 第52-54页 |
| 1.5.3.1 胆酸促进肿瘤细胞增殖 | 第53页 |
| 1.5.3.2 胆酸影响小鼠肠道单核-巨噬系统 | 第53-54页 |
| 1.6 小结 | 第54-55页 |
| 二、胆汁酸与肠道菌群相互作用在肠道腺瘤恶变中的作用 | 第55-87页 |
| 2.1 实验材料 | 第55-58页 |
| 2.1.1 主要实验试剂及其配制 | 第55-57页 |
| 2.1.2 主要实验仪器 | 第57-58页 |
| 2.2 实验方法 | 第58-67页 |
| 2.2.1 小鼠粪便菌群 16S rRNA测序 | 第58-62页 |
| 2.2.2 气相色谱法检测小鼠回盲部粪便短链脂肪酸水平 | 第62-63页 |
| 2.2.3 FITC-D方法检测小鼠肠道通透性 | 第63页 |
| 2.2.4 肠道组织免疫组织化学染色 | 第63页 |
| 2.2.5 肠道组织PAS染色 | 第63-64页 |
| 2.2.6 Realtime-PCR技术 | 第64-66页 |
| 2.2.6.1 小鼠肠道组织总RNA提取 | 第64页 |
| 2.2.6.2 小鼠肠道组织RNA逆转录 | 第64页 |
| 2.2.6.3 PCR引物合成 | 第64-65页 |
| 2.2.6.4 Realtime-PCR反应体系 | 第65-66页 |
| 2.2.6.5 Realtime-PCR反应条件 | 第66页 |
| 2.2.6.6 Realtime-PCR结果分析 | 第66页 |
| 2.2.7 液-质连用色谱法检测小鼠粪便胆汁酸代谢水平 | 第66-67页 |
| 2.3 统计方法 | 第67页 |
| 2.4 实验结果 | 第67-82页 |
| 2.4.1 胆酸对Apc~(min/+)小鼠肠道菌群的影响 | 第67-74页 |
| 2.4.1.1 小鼠肠道菌群OTU聚类分析 | 第67-68页 |
| 2.4.1.2 小鼠肠道菌群物种分布情况 | 第68-69页 |
| 2.4.1.3 小鼠肠道菌群PCA、PCoA及样品聚类分析 | 第69-71页 |
| 2.4.1.4 小鼠肠道菌群物种丰度及多样性改变 | 第71-72页 |
| 2.4.1.5 门水平上胆酸对小鼠肠道菌群的主要改变 | 第72页 |
| 2.4.1.6 属水平上胆酸对小鼠肠道菌群的主要改变 | 第72-73页 |
| 2.4.1.7 菌种水平上胆酸对小鼠肠道菌群的主要改变 | 第73-74页 |
| 2.4.2 胆酸诱导的肠道菌群失调对宿主回盲部短链脂肪酸的影响 | 第74-76页 |
| 2.4.3 胆酸诱导的肠道菌群失衡对Apcmin/+小鼠肠道粘膜屏障的影响 | 第76-79页 |
| 2.4.3.1 对小鼠肠道上皮通透性的影响 | 第76页 |
| 2.4.3.2 对小鼠肠道紧密连接的影响 | 第76-77页 |
| 2.4.3.3 对小鼠肠道杯状细胞功能的影响 | 第77-78页 |
| 2.4.3.4 对小鼠肠道潘氏细胞功能的影响 | 第78-79页 |
| 2.4.4 胆酸诱导的肠道菌群失衡促进肠道发生低度炎症 | 第79-80页 |
| 2.4.5 胆酸诱导的肠道菌群失调对宿主肠道各种胆汁酸水平的影响 | 第80-82页 |
| 2.5 讨论 | 第82-86页 |
| 2.5.1 肠道菌群与肠道肿瘤发生的关系 | 第82-83页 |
| 2.5.2 胆酸及其诱导的肠道菌群失衡促进小鼠肠腺瘤恶变的机制 | 第83-86页 |
| 2.5.2.1 胆酸诱导肠道菌群失衡 | 第83-84页 |
| 2.5.2.2 胆酸诱导的肠道菌群失衡改变肠道短链脂肪酸水平 | 第84-85页 |
| 2.5.2.3 胆酸诱导的肠道菌群失衡导致肠道屏障功能破坏及低度炎症 | 第85-86页 |
| 2.5.2.4 胆酸诱导的肠道菌群失衡改变肠道胆汁酸水平 | 第86页 |
| 2.6 小结 | 第86-87页 |
| 三、整体调控肠道菌群对Apc~(min/+)小鼠腺瘤恶变发生的影响 | 第87-97页 |
| 3.1 实验材料 | 第87-89页 |
| 3.1.1 实验动物 | 第87页 |
| 3.1.2 主要实验试剂 | 第87-88页 |
| 3.1.3 主要实验仪器 | 第88-89页 |
| 3.1.4 主要溶液的配置 | 第89页 |
| 3.2 实验方法 | 第89-90页 |
| 3.2.1 Apc~(min/+)小鼠分组及处理方法 | 第89-90页 |
| 3.2.2 Apc~(min/+)小鼠出死后的标本留取及大体肿瘤观察计数 | 第90页 |
| 3.2.3 Apc~(min/+)小鼠肠道组织病理学观察方法 | 第90页 |
| 3.2.4 Realtime-PCR技术 | 第90页 |
| 3.3 统计方法 | 第90页 |
| 3.4 实验结果 | 第90-95页 |
| 3.4.1 Apc~(min/+)小鼠品系鉴定结果 | 第90页 |
| 3.4.2 Apc~(min/+)小鼠饲养期间一般状态 | 第90-91页 |
| 3.4.3 去除肠道菌群对胆酸诱导腺瘤恶变发生的影响 | 第91-94页 |
| 3.4.3.1 肠道肿瘤的分布 | 第91-92页 |
| 3.4.3.2 肠道肿瘤的数量 | 第92-93页 |
| 3.4.3.3 肠道肿瘤的大小 | 第93页 |
| 3.4.3.4 肠道肿瘤的恶变情况 | 第93-94页 |
| 3.4.4 去除肠道菌群对肠道炎症水平的影响 | 第94-95页 |
| 3.5 讨论 | 第95-96页 |
| 3.6 小结 | 第96-97页 |
| 四、胆酸诱导的肠道菌群失衡对IL-6/STAT3信号通路的影响 | 第97-111页 |
| 4.1 实验材料 | 第97-100页 |
| 4.1.1 实验动物 | 第97页 |
| 4.1.2 实验细胞 | 第97页 |
| 4.1.3 主要实验试剂 | 第97-98页 |
| 4.1.4 主要实验仪器 | 第98-99页 |
| 4.1.5 主要溶液的配制 | 第99-100页 |
| 4.2 实验方法 | 第100-107页 |
| 4.2.1 Apc~(min/+)小鼠的鉴定与饲养 | 第100页 |
| 4.2.2 Apc~(min/+)小鼠分组及处理方法 | 第100页 |
| 4.2.3 小鼠肠道组织免疫组织化学染色 | 第100-102页 |
| 4.2.4 肠道组织Realtime-PCR技术 | 第102页 |
| 4.2.5 粪菌液的制备 | 第102页 |
| 4.2.6 结肠肿瘤细胞系培养 | 第102-103页 |
| 4.2.7 Western blot技术 | 第103-107页 |
| 4.3 统计方法 | 第107页 |
| 4.4 实验结果 | 第107-109页 |
| 4.4.1 Apc~(min/+)小鼠IL-6/STAT3信号通路关键分子变化 | 第107-108页 |
| 4.4.2 粪菌液刺激IMCE细胞激活IL-6/STAT3信号通路 | 第108-109页 |
| 4.5 讨论 | 第109-110页 |
| 4.5.1 高脂饮食、肠道菌群失衡与低度炎症发生 | 第109-110页 |
| 4.5 2 炎症微环境及IL-6/STAT3信号通路与肠癌发生的关系 | 第110页 |
| 4.6 小结 | 第110-111页 |
| 全文结论 | 第111-113页 |
| 论文创新点 | 第113-114页 |
| 参考文献 | 第114-127页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第127-129页 |
| 综述 肠道菌群、菌群代谢产物与结直肠癌 | 第129-158页 |
| 综述参考文献 | 第142-158页 |
| 致谢 | 第158-160页 |
| 个人简历 | 第160页 |
