| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 主要符号对照表 | 第9-10页 |
| 第1章 引言 | 第10-27页 |
| 1.1 研究背景 | 第10-25页 |
| 1.1.1 流感与流感病毒 | 第10-11页 |
| 1.1.2 流感病毒的结构和组成 | 第11-13页 |
| 1.1.3 流感病毒HA蛋白的结构和功能 | 第13-17页 |
| 1.1.4 流感病毒的感染与复制 | 第17-19页 |
| 1.1.5 流感病毒的变异 | 第19-20页 |
| 1.1.6 高致病性禽流感H5N1 | 第20-22页 |
| 1.1.7 高致病性禽流感H5N1的疫苗 | 第22-23页 |
| 1.1.8 高致病性禽流感H5N1的治疗 | 第23-24页 |
| 1.1.9 酵母表面展示系统 | 第24-25页 |
| 1.2 研究目标 | 第25页 |
| 1.3 研究方案 | 第25-26页 |
| 1.4 研究意义 | 第26-27页 |
| 第2章 材料和方法 | 第27-45页 |
| 2.1 实验材料 | 第27-29页 |
| 2.1.1 细胞株 | 第27页 |
| 2.1.2 菌株 | 第27页 |
| 2.1.3 质粒 | 第27-29页 |
| 2.1.4 血清 | 第29页 |
| 2.2 实验试剂 | 第29-32页 |
| 2.2.1 分子实验试剂 | 第29-30页 |
| 2.2.2 培养基 | 第30-31页 |
| 2.2.3 流式抗体 | 第31页 |
| 2.2.4 其他试剂 | 第31-32页 |
| 2.3 实验仪器 | 第32页 |
| 2.4 实验耗材 | 第32-33页 |
| 2.5 实验方法 | 第33-45页 |
| 2.5.1 改造pCTCON2载体 | 第33页 |
| 2.5.2 构建pCTCON2-HA质粒 | 第33-34页 |
| 2.5.3 构建抗原片段文库 | 第34-35页 |
| 2.5.4 构建抗原突变文库 | 第35-36页 |
| 2.5.5 酵母转化、培养和诱导 | 第36-37页 |
| 2.5.6 酵母的流式分析和分选 | 第37-39页 |
| 2.5.7 单克隆抗体的生产 | 第39页 |
| 2.5.8 假病毒中和实验 | 第39-41页 |
| 2.5.9 定点突变 | 第41-42页 |
| 2.5.10 构建HA嵌合体 | 第42-44页 |
| 2.5.11 软件应用 | 第44-45页 |
| 第3章 实验结果 | 第45-81页 |
| 3.1 建立利用酵母表面展示抗原片段文库分析表位的方法 | 第45-55页 |
| 3.1.1 技术流程图 | 第45-46页 |
| 3.1.2 酵母表面展示H5 HA | 第46-47页 |
| 3.1.3 构建H5N1 HA的抗原片段文库 | 第47-48页 |
| 3.1.4 验证筛选过程的特异性 | 第48-51页 |
| 3.1.5 分析HA重组蛋白免疫的小鼠血清中多克隆抗体反应 | 第51-55页 |
| 3.1.6 小结 | 第55页 |
| 3.2 鉴定五株针对H5N1 HA的人源单克隆抗体的表位 | 第55-73页 |
| 3.2.1 五株单克隆抗体中和活性的评价 | 第55-56页 |
| 3.2.2 利用抗原片段文库分析五株单克隆抗体的表位 | 第56-57页 |
| 3.2.3 利用抗原突变文库分析五株单克隆抗体的精细表位 | 第57-61页 |
| 3.2.4 利用突变假病毒确定五株单克隆抗体的关键中和位点 | 第61-62页 |
| 3.2.5 解析抗原抗体复合物的晶体结构 | 第62-63页 |
| 3.2.6 从晶体结构上分析 65C6识别的表位 | 第63-65页 |
| 3.2.7 从晶体结构上分析AVFluIgG03识别的表位 | 第65-67页 |
| 3.2.8 从晶体结构上分析 100F4识别的表位 | 第67-69页 |
| 3.2.9 总结H5N1 HA头部的中和表位 | 第69-72页 |
| 3.2.10 小结 | 第72-73页 |
| 3.3 分析高致病性禽流感H5N1康复者血清中多克隆抗体反应 | 第73-81页 |
| 3.3.1 康复者血清中和活性的评价 | 第73-74页 |
| 3.3.2 利用抗原片段文库分析血清多克隆抗体反应 | 第74-75页 |
| 3.3.3 利用嵌合假病毒分析中和抗体识别的表位 | 第75-77页 |
| 3.3.4 利用突变假病毒分析中和抗体的精细表位 | 第77-80页 |
| 3.3.5 小结 | 第80-81页 |
| 第4章 讨论与展望 | 第81-96页 |
| 4.1 酵母表面展示系统在研究抗原抗体相互作用中的应用 | 第81-88页 |
| 4.1.1 不同表面展示系统的比较 | 第81-82页 |
| 4.1.2 抗体表位的研究方法 | 第82-84页 |
| 4.1.3 酵母表面展示系统在其他病毒抗原表位研究中的应用 | 第84-87页 |
| 4.1.4 利用酵母展示系统测定抗原抗体的亲和力 | 第87-88页 |
| 4.2 抗体治疗 | 第88-93页 |
| 4.2.1 多克隆抗体与单克隆抗体的比较 | 第88-89页 |
| 4.2.2 构建双特异性抗体 | 第89-90页 |
| 4.2.3 从酵母表面展示抗体文库中分离抗体 | 第90-92页 |
| 4.2.4 利用酵母展示系统进行抗体的优化 | 第92-93页 |
| 4.3 新型流感疫苗的设计 | 第93-95页 |
| 4.3.1 基于HA头部的新型重组疫苗 | 第93页 |
| 4.3.2 通用流感疫苗的挑战 | 第93-94页 |
| 4.3.3 酵母疫苗 | 第94页 |
| 4.3.4 设计针对H5N1病毒的表位疫苗 | 第94-95页 |
| 4.4 总结 | 第95-96页 |
| 参考文献 | 第96-113页 |
| 致谢 | 第113-115页 |
| 个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第115-116页 |
