中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
缩略语/符号说明 | 第11-13页 |
前言 | 第13-17页 |
研究现状、成果 | 第13-15页 |
研究目的、方法 | 第15-17页 |
一、实验对象和方法 | 第17-43页 |
1.1 实验材料 | 第17-18页 |
1.1.1 质粒载体 | 第17页 |
1.1.2 细胞系 | 第17页 |
1.1.3 主要试剂和耗材 | 第17-18页 |
1.2 配置试剂 | 第18-23页 |
1.2.1 细胞培养所需 | 第18-19页 |
1.2.2 质粒转化所需 | 第19页 |
1.2.3 质粒提取所需 | 第19-20页 |
1.2.4 慢病毒制备所需 | 第20页 |
1.2.5 慢病毒感染所需 | 第20页 |
1.2.6 提取RNA所需 | 第20-21页 |
1.2.7 RT反应所需 | 第21页 |
1.2.8 Western Blotting所需 | 第21-23页 |
1.2.9 免疫荧光实验所需 | 第23页 |
1.3 仪器设备 | 第23-24页 |
1.4 实验方法及步骤 | 第24-43页 |
1.4.1 质粒构建原理 | 第24-29页 |
1.4.2 质粒转化 | 第29页 |
1.4.3 质粒的提取鉴定 | 第29-30页 |
1.4.4 细胞培养 | 第30-32页 |
1.4.5 慢病毒制备 | 第32页 |
1.4.6 慢病毒感染 | 第32-33页 |
1.4.7 Western Blotting步骤 | 第33-37页 |
1.4.8 免疫荧光步骤 | 第37页 |
1.4.9 Trizol法提取总RNA步骤 | 第37-38页 |
1.4.10 RT-PCR步骤 | 第38-39页 |
1.4.11 核质分离提取RNA步 | 第39-40页 |
1.4.12 线粒体膜势能检测方法(JC-1)及步骤 | 第40页 |
1.4.13 CellTiter-Glo Luminescent Cell Viability Assay检测细胞内ATP含量步骤 | 第40-41页 |
1.4.14 软琼脂克隆形成实验步骤 | 第41-43页 |
二、实验结果 | 第43-58页 |
2.1 乳腺肿瘤细胞系中检测到有限活化的Caspase-3/7 | 第43-48页 |
2.2 Caspase-3/7 对乳腺肿瘤细胞生长是必须的 | 第48-49页 |
2.3 Caspase-3/7 有助于提高乳腺肿瘤细胞对周围代谢微环境的适应性 | 第49-51页 |
2.4 Caspase-3/7 在乳腺肿瘤细胞能量生成中发挥着重要的作用 | 第51-52页 |
2.5 可控活化的Caspase-3/7 可能是由caspase-8 激活的 | 第52-54页 |
2.6 Caspase-8 能提高乳腺肿瘤细胞的能量代谢速率 | 第54-57页 |
2.7 低剂量的AT101能促进MCF-7/Caspase-8DN大量凋亡 | 第57-58页 |
三、讨论 | 第58-59页 |
结论 | 第59-61页 |
参考文献 | 第61-64页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第64-65页 |
综述 Caspase非凋亡功能的研究进展 | 第65-77页 |
综述参考文献 | 第73-77页 |
致谢 | 第77页 |